一种降解N,N-二甲基甲酰胺的大肠杆菌工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种降解N,N

【技术实现步骤摘要】
一种降解N,N
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二甲基甲酰胺的大肠杆菌工程菌及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，特别是涉及一种降解N,N
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二甲基甲酰胺的大肠杆菌工程菌及其应用。

技术介绍

[0002]N,N
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二甲基甲酰胺(简称DMF)是一种在自然界中不存在的人工化学品，于1893年首次合成。随后，由于N,N
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二甲基甲酰胺与大多数有机液体和水都具有良好的混溶性，被誉为“万能溶剂”，被广泛应用于各种化学、制造和制药行业。2001年，全球N,N
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二甲基甲酰胺消费量约为285,000公吨，且N,N
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二甲基甲酰胺的需求还以3.5％的速率逐年增加。N,N
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二甲基甲酰胺作为溶剂，在工业生产中被反复回收利用；其作为溶剂在生产和处理过程中几乎无化学消耗，最终成为了废弃物，进入废水。由于N,N
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二甲基甲酰胺的化学结构稳定，难以被普通的生物淤泥降解；因此，相关行业排放的工业废水中仍含有N,N
‑r/>二甲基甲酰胺，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为出发菌株经过基因改造导入外源基因，使不具备降解N,N
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二甲基甲酰胺的所述出发菌株能够降解N,N
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二甲基甲酰胺；所述外源基因包括二甲基甲酰胺酶基因DMFase、二甲胺脱氢酶基因DMAase和甲胺脱氢酶基因MAase。2.根据权利要求1所述的大肠杆菌工程菌，其特征在于，所述二甲基甲酰胺酶基因DMFase的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述二甲胺脱氢酶基因DMAase的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述甲胺脱氢酶基因MAase的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。3.根据权利要求1所述的大肠杆菌工程菌，其特征在于，所述经过基因改造导入外源基因还包括敲除所述大肠杆菌的内源基因；所述内源基因包括乙醛酸途径抑制因子基因iclR和琥珀酸脱氢酶基因sdhAB。4.一种如权利要求1
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3任一项所述的大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)利用基因编辑技术，将包含二甲基甲酰胺酶基因的载体转入大肠杆菌，替换乙醛酸途径抑制因子基因iclR，构建大肠杆菌一代工程菌株EcEng1
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DMF；(2)利用基因编辑技术，将包含二甲胺脱氢酶基因的载体转入所述大肠杆菌一代工程菌株EcEng1
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DMF，替换琥珀酸脱氢酶基因sdhAB，构建大肠杆菌二代工程菌株EcEng2
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DMA；(3)将包含甲胺脱氢酶基因的载体转入所述大肠杆菌二代工程菌株EcEng2
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DMA，构建大肠杆菌三代工程菌株EcEng3<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玮，陈雨蒙，邓最祥，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：