一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用技术方案

本发明专利技术属于核酸检测与细胞成像技术领域，公开了一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用。该无酶恒温核酸扩增系统包括发卡H1、发卡H2和双链H3L；双链H3L由L链和H3链组成；发卡H1、发卡H2标记有可发生荧光共振能量转移的荧光供体和荧光受体；在目标核酸存在情况下，发卡H1与发卡H2发生催化发卡自组装反应，形成H1‑

【技术实现步骤摘要】
一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用


[0001]本专利技术属于核酸检测与细胞成像
，具体涉及一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用。

技术介绍

[0002]RNA在生物的生命活动中起着至关重要的作用，其中信使RNA(mRNA)是携带遗传信息并能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸，在基因表达和调控中起着核心作用。了解基因表达和调控不仅增加对各种生命过程的认识，而且有助于疾病诊断和治疗，例如mRNA表达就与癌症的发生发展密切相关。
[0003]针对mRNA上述特点，研究者开发了许多mRNA检测和成像方法，其中mRNA原位分析是主流的成像技术。活细胞内mRNA原位分析可以提供不同类型细胞内RNA的表达、定位、降解、储存和调节等综合信息，故可用于恶性肿瘤的临床诊断和药物疗效监测，甚至成为某些癌症相关的“金标准”。
[0004]荧光原位杂交(FISH)技术是mRNA原位分析的一种传统方法，它能够实现组织、细胞甚至亚细胞水平的成像，具有高分辨率的标志RNA定位的优点，但该方法具有有限的灵敏度。近年来，恒温核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无酶恒温核酸扩增系统，其特征在于，包括发卡H1、发卡H2和双链H3L；所述双链H3L由L链和H3链组成；所述发卡H1、发卡H2分别标记有可发生荧光共振能量转移的荧光供体和荧光受体；在目标核酸存在情况下，引发所述发卡H1与所述发卡H2发生催化发卡自组装反应，形成H1‑
H2复合物并置换得到目标核酸；所述H1‑
H2复合物可与所述双链H3L中L链结合并置换得到发卡H3；所述发卡H3进一步引发所述发卡H1与所述发卡H2发生催化发卡自组装反应，形成H1‑
H2复合物并置换得到发卡H3。2.根据权利要求1所述的无酶恒温核酸扩增系统，其特征在于，所述荧光供体为Cy3，所述荧光受体为Cy5。3.根据权利要求1所述的无酶恒温核酸扩增系统，其特征在于，所述双链H3L、发卡H1和发卡H2的摩尔比为1:(1.5
‑
2.5):(1.5
‑
2.5)。4.根据权利要求3所述的无酶恒温核酸扩增系统，其特征在于，所述双链H3L、发卡H1和发卡H2的摩尔比为1:2:2。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：田元新，梁鹏英，孙蒙旭，杨子中，李铜，郭铭琪，段文军，谢宝平，陈金香，陈俊，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：