本发明专利技术属于天然产物提取和纯化技术领域，涉及一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法，具体包括牡丹雄蕊粗提物的提取、三香豆素亚精胺粗品的制备和三香豆素亚精胺纯品的纯化。本发明专利技术提供的方法能够从牡丹雄蕊提取分离获得三香豆酰亚精胺粗品，经过NaOH溶液和HCl溶液的纯化获得纯度在96％以上的三香豆酰亚精胺纯品。酰亚精胺纯品。酰亚精胺纯品。
【技术实现步骤摘要】
一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法
[0001]本专利技术属于天然产物提取和纯化
，具体涉及一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法。
技术介绍
[0002]牡丹原产于中国西部秦岭和大巴山一带，除了作为观赏植物外，还可用于生产丹皮入药，具有改善心血管疾病、镇静、消炎和提高机体免疫力等药效。牡丹雄蕊是牡丹中重要的可开发利用资源，每年有千吨以上的牡丹鲜雄蕊产出，其中一部分被用来制作雄蕊茶，另一部分自然飘落，目前针对牡丹雄蕊尚未有进一步的开发利用。
[0003]N1‑
(E)
‑
N5‑
(E)
‑
N
10
‑
(E)
‑
三香豆酰亚精胺是酚胺化合物，所示结构如下。
[0004][0005]三香豆酰亚精胺类物质具有调节植物生长、细胞增殖、诱导花的形成，在植物的发育和防御中有着特殊的功能。近年来研究表明，三香豆酰亚精胺类物质具有抗真菌、抗炎和抗氧化等多种功能活性。作为新兴的功能活性因子，三香豆酰亚精胺类物质可应用于保健品、化妆品和药品等多领域。当前N1‑
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10
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三香豆酰亚精胺主要从藏红花等药材花粉中分离获得，但由于该类物质的顺反异构体多达8个，目前大规格纯化制备较难。
技术实现思路
[0006]本专利技术为解决目前三香豆酰亚精胺分离纯化难度的技术问题，提供了一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法，本方法能够从牡丹雄蕊提取分离获得三香豆酰亚精胺粗品，经过NaOH溶液和HCl溶液的纯化获得纯度在96以上的三香豆酰亚精胺纯品。
[0007]本专利技术提供了一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法，包括如下步骤：
[0008]S1，牡丹雄蕊粗提物的提取：取新鲜的牡丹雄蕊烘干，然后加入溶剂超声提取3
‑
5次，合并提取液，浓缩除去溶剂，得到牡丹雄蕊粗提物；
[0009]S2，三香豆素亚精胺粗品的提取：将S1获得的牡丹雄蕊粗提物依次采用石油醚和乙酸乙酯等体积萃取，浓缩后获得乙酸乙酯粗提物，将乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇进行梯度洗脱，梯度设置为80:1，40:1，20:1，10:1，8:1，分别获得上述梯度下的洗脱液，合并梯度为40:1，20:1，10:1，8:1的洗脱液，浓缩后，加入体积分数为50％的甲醇水溶液，析出白色固体，抽滤，真空干燥，获得香豆酰亚精胺粗品；
[0010]S3，三香豆素亚精胺的纯化：在S2获得的香豆酰亚精胺粗品中加入NaOH碱液至完全溶解，然后滴加HCl溶液至pH≤3，白色固体析出后抽滤，保留固体，冻干，得到N1‑
(E)
‑
N5‑
(E)
‑
N
10
‑
(E)
‑
三香豆素亚精胺纯品。
[0011]进一步地，S1中，牡丹雄蕊烘干温度为50
‑
60℃。
[0012]进一步地，S1中，所述溶剂为甲醇和乙醇中的任意一种。
[0013]进一步地，S1中，所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:6
‑
10。
[0014]进一步地，S1中，所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:8。
[0015]进一步地，S2中，石油醚和乙酸乙酯等体积萃取3
‑
4次。
[0016]进一步地，S2中，所述乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇梯度洗脱在100
‑
200目的硅胶柱层析上进行。
[0017]进一步地，S3中，所述NaOH碱液的浓度为0.001M。
[0018]进一步地，S3中，所述HCl溶液浓度为1N。
[0019]进一步地，S3中，加入HCl溶液时边搅拌边逐滴加入。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0021]1、本专利技术提供的从牡丹雄蕊中提取分离纯化三香豆酰亚精胺的方法，显著提升了该三香豆素亚精胺的产量，并降低了生产成本；纯化方法使用碱液和酸液处理，与传统的制备液相相比，工艺简便易行，成本低廉，可大规格制备。该方法提高了牡丹雄蕊的利用率，最终检测到三香豆素亚精胺纯度为96.2％
‑
97.2％。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1为本专利技术实施例1获得的三香豆素亚精胺纯品的核磁1H谱(Bruker400MHz,CD3OD)。
[0024]图2为本专利技术实施例1获得的三香豆素亚精胺纯品的核磁
13
C谱(Bruker100MHz,CD3OD)。
[0025]图3为本专利技术实施例1获得的三香豆素亚精胺纯品的ESI
‑
MS质谱(正离子模式)。
[0026]图4为本专利技术实施例1中三香豆素亚精胺粗品的纯度分析。
[0027]图5为本专利技术实施例1中三香豆酰亚精胺纯品的纯度分析。
[0028]图6为本专利技术实施例3中三香豆酰亚精胺纯品的纯度分析。
具体实施方式
[0029]下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0030]实施例1
[0031]一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法
[0032]一、实验方法
[0033]1、牡丹雄蕊粗提物的提取
[0034](1)干燥：将新鲜的牡丹雄蕊50℃烘干；
[0035](2)提取：向烘干得到的牡丹雄蕊中加入8倍重量的甲醇超声提取3次，超声条件为40KHz频率，常温，每次30分钟，获得提取液；
[0036](3)浓缩：合并(2)中3次提取获得的提取液，旋转蒸发仪浓缩除去甲醇溶剂，得到牡丹雄蕊粗提物。
[0037]2、三香豆素亚精胺粗品的提取
[0038](1)将牡丹雄蕊粗提物依次采用石油醚和乙酸乙酯进行等体积萃取3次；
[0039](2)旋转蒸发浓缩乙酸乙酯萃取液，获得乙酸乙酯粗提物，将乙酸乙酯粗提物在100
‑
200目的硅胶柱层析上经乙酸乙酯:甲醇(梯度设置为80:1，40:1，20:1，10:1，8:1)梯度洗脱，获得上述不同梯度下的洗脱液，合并乙酸乙酯:甲醇为40:1，20:1，10:1，8:1洗脱获得的洗脱液，浓缩后，加入体积分数为50％甲醇水液，析出大量白色固体，抽滤，真空干燥，得到香豆酰亚精胺粗品，纯度分析本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，牡丹雄蕊粗提物的提取：取新鲜的牡丹雄蕊烘干，然后加入溶剂超声提取3
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5次，合并提取液，浓缩除去溶剂，得到牡丹雄蕊粗提物；S2，三香豆素亚精胺粗品的提取：将S1获得的牡丹雄蕊粗提物依次采用石油醚和乙酸乙酯等体积萃取，浓缩后获得乙酸乙酯粗提物，将乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇进行梯度洗脱，梯度设置为80:1，40:1，20:1，10:1，8:1，分别获得上述梯度下的洗脱液，合并梯度为40:1，20:1，10:1，8:1的洗脱液，浓缩后，加入体积分数为50％的甲醇水溶液，析出白色固体，抽滤，真空干燥，获得香豆酰亚精胺粗品；S3，三香豆素亚精胺的纯化：在S2获得的香豆酰亚精胺粗品中加入NaOH碱液至完全溶解，然后滴加HCl溶液至pH≤3，白色固体析出后抽滤，保留固体，冻干，得到N1‑
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三香豆素亚精胺纯品。2.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法，其特征在于，S1中，牡丹雄蕊烘干温度为50
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【专利技术属性】
技术研发人员：汤江江，彭晓娜，项萍，白章振，高锦明，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：
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