糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用制造技术

本发明专利技术涉及糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用。对糖基转移酶UGT

【技术实现步骤摘要】
糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用。

技术介绍

[0002]人参(Panax ginseng C.A.Mayer)为五加科多年生草本植物，是我国传统的名贵中药。中药人参具有广泛的抗癌、抗疲劳、提高免疫力、保护心脑血管等药理活性。中药人参中含有的主要药用成分——人参皂苷，是一类四环三萜类化合物。迄今为止，已经从17种人参属植物中鉴定出了180种人参皂苷，大多为四环的达玛烷型结构。达玛烷型人参皂苷可进一步分为原人参二醇(PPD)、原人参三醇(PPT)等类型。在植物中，PPT的糖基化位点通常为C
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6和C
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20的羟基，形成人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、F1等产物，PPT的C
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3位糖基化修饰后获得的产物被称为非天然人参皂苷，稀有人参皂苷Rh1(式(1))和非天然人参皂苷3
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O
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β
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Glc
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种糖基转移酶的突变体，其特征在于，将糖基转移酶UGT
BL
1的氨基酸序列中第62位、第66位、第320位、第321位氨基酸残基中的一个或多个突变为另一种氨基酸残基得到；或将糖基转移酶UGT
BL
1的氨基酸序列中第62位、第320位、第321位氨基酸残基与一个弹性突变位点进行四位点组合突变得到，所述弹性突变位点为第63位、64位、142位、150位、168位第170位；所述糖基转移酶UGT
BL
1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述糖基转移酶UGT
BL
1的第62位氨基酸残基突变为酪氨酸、组氨酸、精氨酸、半胱氨酸、缬氨酸、脯氨酸、赖氨酸、丙氨酸、谷氨酸中的任意一种；第66位氨基酸残基突变为组氨酸、精氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸中的任意一种；第320位氨基酸残基突变为异亮氨酸、酪氨酸、精氨酸、色氨酸、亮氨酸、组氨酸、谷氨酰胺中的任意一种；第321位氨基酸残基突变为甘氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、精氨酸、亮氨酸、组氨酸、半胱氨酸中的任意一种。2.权利要求1所述突变体在酶法合成稀有人参皂苷Rh1中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述突变体为第62位、第320位或第321位单个位点突变，或第62位、第321位两个位点组合突变，或第62位、第320位和第321位三个位点组合突变；或第62位、第320位、第321位和第64位/170位四个位点组合突变。4.权利要求1所述突变体在酶法合成非天然人参皂苷3
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O<...

【专利技术属性】
技术研发人员：何冰芳，姜天玥，储建林，赵璐，葛艳，李玉婷，田亚妮，钦松，吴斌，高振，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：