一种具有多重耐受性的产酯酵母及其分离方法、应用技术

本发明专利技术公开了一种具有多重耐受性的产酯酵母及其分离方法、应用。产酯酵母为菌株Millerozyma farinose CZ001，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.26211。一种如权利要求1

【技术实现步骤摘要】
一种具有多重耐受性的产酯酵母及其分离方法、应用


[0001]本专利技术涉及产酯酵母领域，具体是一种具有多重耐受性的产酯酵母及其分离方法、应用。

技术介绍

[0002]白酒在日常生活中占据重要的地位，随着消费升级，人们对白酒品质的追求越来越高。高端白酒逐渐占有更大的市场份额，如何提高品质，丰富风味化合物成分，对企业和社会均具有重要意义。酒曲是酿造白酒的重要材料之一，含有大量功能微生物，其酯化力的高低影响力白酒的风味化合物含量及白酒的品质。研究高酯化力酵母菌并将其用于酒曲制作，可提高酒曲酯化力，从而提高白酒品质，满足人们对高品质白酒的需求，对企业的长久发展具有重要意义。
[0003]酒曲制作及白酒酿造过程伴随着极端环境条件，如高温、低pH、高乙醇等。这些环境条件可严重影响酵母菌的生长及生存，从而影响酵母菌的应用效果。一株酵母菌很难同时兼具高酯化力、耐高温、耐酸、耐乙醇等特点。因此，开发可同时满足上述条件的优良酵母菌仍是一个重要研究方向。
[0004]此外，不同的地域、原料、生产工艺等因素，也会影响酵母菌的应用效果。筛选高酯化力酵母菌可丰富酿酒微生物种质资源库，增加可供企业选择的优良酵母菌资源，对于解决企业问题具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一种具有多重耐受性的产酯酵母及其分离方法、应用，以解决现有技术产酯酵母菌存在的酯化力、适应性不足的问题。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：
[0007]一种具有多重耐受性的产酯酵母，所述产酯酵母为菌株Millerozyma farinose CZ001，于2022年12月25日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.26211。
[0008]进一步的，所述菌株M.farinose CZ001在25
‑
55℃的条件下良好生长。
[0009]进一步的，所述菌株M.farinose CZ001在pH为2
‑
9的条件下良好生长。
[0010]进一步的，所述菌株M.farinose CZ001在乙醇含量为0
‑
18％vol的条件下良好生长。
[0011]一种上述具有多重耐受性的产酯酵母的分离方法，基于酯化力选取大曲，再从选取的大曲中经分离纯化、筛选后得到所述菌株M.farinose CZ001。
[0012]一种上述具有多重耐受性的产酯酵母在酒类中提高酯化力的应用。
[0013]一种上述具有多重耐受性的产酯酵母在酒曲中提高酯化力的应用。
[0014]进一步的，所述酒曲为麸曲。
[0015]进一步的，通过响应面法对所述菌株M.farinose CZ001接种于麸曲时的培养条件
进行优化。
[0016]进一步的，经响应面法优化确定，所述菌株M.farinose CZ001在葡萄糖含量10.51％、蛋白胨含量4.8％、酵母粉含量2.08％的条件下生长和酯化力显著提高。
[0017]与现有技术相比，本专利技术优点为：
[0018]本专利技术提供了一种具有耐高温、耐酸、耐乙醇且酯化力高等多重优良特性的产酯酵母及其分离方法和培养条件优化方法，本专利技术的产酯酵母可应用于酒类尤其是酒曲，能够提高酯化力。本专利技术在丰富酿酒微生物种质资源库、提高白酒香气成分、提高效率、节能减排等方面具有重要价值。
附图说明
[0019]图1为酵母菌酯化力对比图。其中：CK，对照酵母(安琪酵母股份有限公司生产的白酒专用酿酒产酯高活性干酵母)；小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0020]图2为PCR扩增ITS1
‑
5.8S
‑
ITS2区和26S rDNA的D1/D2区的琼脂糖凝胶电泳图。其中：
ⅰ
，CZ001对应的电泳条带；
ⅱ
，CZ002对应的电泳条带；
ⅲ
，CZ003对应的电泳条带。
‑
，阴性对照；A，扩增ITS1
‑
5.8S
‑
ITS2区条带；B，扩增26S rDNA的D1/D2区条带。
[0021]图3为扩增ITS1
‑
5.8S
‑
ITS2区系统发育树图。
[0022]图4为扩增26S rDNA的D1/D2区系统发育树图。
[0023]图5为酵母菌的生长曲线图。其中：A，CZ001；B，CZ002；C，CZ003；D，对照酵母。OD600为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0024]图6为四株酵母菌在不同温度下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母；OD600为菌液稀释5倍后的检测值。小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0025]图7为四株酵母菌在不同pH下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母；OD600为菌液稀释5倍后的检测值。小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0026]图8为四株酵母菌在不同乙醇含量下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母。OD600为菌液稀释5倍后的检测值。小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0027]图9为菌株产四种酯的产量。其中：CK，对照酵母。小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0028]图10为菌株对四种酯的产酯偏好性。其中：CK，对照酵母。小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0029]图11为葡萄糖含量对CZ001生长的影响。其中：OD600为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0030]图12为蛋白胨含量对CZ001生长的影响。其中：OD600为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0031]图13为酵母粉含量对CZ001生长的影响。其中：OD600为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0032]图14为各因素之间相互作用的曲面图和等高线图。其中：A，葡萄糖和蛋白胨相互
作用的曲面图(i)和等高线图(ii)；B，葡萄糖和酵母粉相互作用的曲面图(i)和等高线图(ii)；C，蛋白胨和酵母粉相互作用的曲面图(i)和等高线图(ii)。
[0033]图15为优化前与优化后CZ001的生长情况对比图。其中：OD600为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0034]图16为优化前与优化后CZ001的酯化力对比图。其中：图中数值均重复3次以上。
[0035]图17为添加优化前与优化后CZ001制作麸曲的酯化力。其中：图中数值均重复3次以上。
具体实施方式
[0036]下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。
[0037]实施例一
[0038]本实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有多重耐受性的产酯酵母，其特征在于，所述产酯酵母为菌株 Millerozyma farinose CZ001，于2022年12月25日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO. 26211。2.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的产酯酵母，其特征在于，所述菌株M. farinose CZ001在25
‑
55℃的条件下良好生长。3.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的产酯酵母，其特征在于，所述菌株M. farinose CZ001在pH为2
‑
9的条件下良好生长。4.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的产酯酵母，其特征在于，所述菌株M. farinose CZ001在乙醇含量为0
‑
18%vol的条件下良好生长。5.一种如权利要求1
‑
4中任意一项所述具有多重耐受性的产酯酵母的分离方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄训端，贾秀连，张部昌，汪焰胜，高强，周明，王志侠，李登壮，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：