本发明专利技术公开了识别并结合细胞朊蛋白的核酸适体及其应用。本发明专利技术属于生化分析技术领域，具体涉及一种识别并结合细胞朊蛋白的核酸适体及其应用。本发明专利技术提供的核酸适体为序列表1中序列1和序列2及其核酸适体衍生物。本发明专利技术的核酸适体及其衍生物可在识别细胞朊蛋白高表达肿瘤或者制备检测细胞朊蛋白高表达肿瘤的试剂盒中应用。本发明专利技术所示核酸适体具有高亲和力、无免疫原性、能够体外化学合成、分子量小，可以对不同部位进行修饰和取代，且序列稳定，易于保存，便于标记。便于标记。
【技术实现步骤摘要】
识别并结合细胞朊蛋白的核酸适体及其应用
[0001]本专利技术属于生化分析
，具体涉及一种识别并结合细胞朊蛋白的核酸适体及其应用。
技术介绍
[0002]细胞朊蛋白(Cellular Prion Protein(PrPc),又叫CD230)是一种细胞表面的糖磷脂酰肌醇附着的脂筏定位蛋白质，由位于染色体上的PRNP基因编码。细胞朊蛋白最初合成由一个253个氨基酸的前体蛋白组成，去除N和C端信号肽后，其最终形式由208个氨基酸组成，PrPc从鱼类到哺乳动物高度保守。成熟细胞朊蛋白N端有含组氨酸和甘氨酸的多肽重复序列，称为八肽重复区，由四个PHGGGWGQ的完美重复构成。该区域可结合Cu
2+
、Zn
2+
等二价金属离子，因此细胞朊蛋白可作为细胞摄取和排出Cu
2+
的受体。细胞朊蛋白在神经系统、免疫系统和多种肿瘤细胞中均有表达，与细胞增殖、凋亡、分化和迁移等细胞功能有关，且在胃癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌等多种癌症中高表达。此外，细胞朊蛋白的表达量与癌细胞的增殖、转移和耐药性有一定的关系。且与神经细胞黏附因子(NCAM)、表皮生长因子受体(EGFR)、烟碱乙酰胆碱受体、整合素β1等多种蛋白质相互作用，同时参与调控超氧化物歧化酶(SOD)的活性，参与调节多种生命活动，在细胞发育、分化、粘附和迁移中起重要作用。
[0003]核酸适体(aptamer)是通过指数富集配体的系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX)从核酸分子文库中体外筛选得到的能够特异性识别靶标的单链寡核苷酸序列。其多由10
‑
150个碱基组成的，其具有分子量小，稳定性好，水溶性好，生物体内免疫原性低，易体外合成以及改造修饰等优点。且核酸适体具有较大表面积和大量受体结合位点，易形成多种三维空间构型，如发卡、假结、G
‑
四链体等，其能够与靶标物质基于范德华力、静电作用、氢键和疏水作用等紧密结合，且可以区分结构类似物质，也被称之为“化学抗体(Chemical Antibody)”。目前，核酸适体作为新型的仿生识别元素，已在疾病诊断与治疗、药物筛选、分子识别和分析检测等众多领域得到了广泛的应用。
技术实现思路
[0004]本专利技术所要解决的技术问题是如何识别和/或结合细胞朊蛋白。
[0005]为了解决以上技术问题，本专利技术提供了识别并结合细胞朊蛋白的核酸适体。
[0006]本专利技术提供的核酸适体，可为如下A1)
‑
A8)中任一种：
[0007]A1)序列1所示的单链DNA分子；
[0008]A2)序列2所示的单链DNA分子；
[0009]A3)将A1)或A2)所示的核酸适体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；
[0010]A4)将A1)或A2)所示的核酸适体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适体具
有相同功能的核酸适体的衍生物；
[0011]A5)将A1)或A2)所示的核酸适体的骨架改造为硫代磷酸脂骨架，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；
[0012]A6)由A1)或A2)所示的核酸适体编码的RNA分子，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体衍生物；
[0013]A7)由A1)或A2)所示的核酸适体编码的肽核酸，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；
[0014]A8)将A1)
‑
A7)任一所示的核酸适体的一端或中间接上信号分子和/或活性分子和/或功能基团和/放射性核素，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物。
[0015]上述核酸适体中，A8)中的所述功能基团为荧光基团、生物素基团、放射性物质、治疗性物质、地高辛、纳米发光材料或酶标记。
[0016]本专利技术还提供了用于识别并结合细胞朊蛋白的试剂。
[0017]所述试剂含有上述核酸适体。
[0018]本专利技术还提供了上述核酸适体，和/或序列3和/或序列4和/或序列5所述核酸适体或其衍生物在下述任一种中的应用：
[0019](B1)识别或辅助识别细胞朊蛋白；
[0020](B2)结合或辅助结合细胞朊蛋白；
[0021](B3)检测或辅助检测待测样品中是否含有细胞朊蛋白；
[0022](B4)制备检测或辅助检测待测样品中是否含有细胞朊蛋白的产品；
[0023](B5)检测或辅助检测待测样品中细胞朊蛋白含量；
[0024](B6)制备检测或辅助检测待测样品中细胞朊蛋白含量的产品；
[0025](B7)检测或辅助检测表达细胞朊蛋白的肿瘤或肿瘤细胞；
[0026](B8)制备检测或辅助检测表达细胞朊蛋白的肿瘤或肿瘤细胞的产品；
[0027](B9)识别或辅助识别肿瘤或肿瘤细胞；
[0028](B10)结合或辅助结合肿瘤或肿瘤细胞；
[0029](B11)识别或辅助识别八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段；
[0030](B12)结合或辅助结合八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段；
[0031](B13)制备识别或辅助识别八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段产品；
[0032](B14)制备结合或辅助结合八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段产品；
[0033](B15)检测或辅助检测待测样品中是否含有八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段；
[0034](B16)制备检测或辅助检测待测样品中是否含有八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段的产品；
[0035](B17)制备识别或辅助识别肿瘤或肿瘤细胞的产品；
[0036](B18)制备结合或辅助结合肿瘤或肿瘤细胞的产品；
[0037](B19)制备靶向细胞朊蛋白的产品；
[0038](B20)制备诊断或治疗与细胞朊蛋白相关疾病的产品；
[0039](B21)制备用于靶向细胞朊蛋白的动物成像的探针；
[0040](B22)制备用于靶向细胞朊蛋白的治疗产品。
[0041]上述应用中，所述识别或辅助识别细胞朊蛋白为识别或辅助识别所述八肽重复区多肽片段和/或含有所述八肽重复区中1个、2个或4个重复单元的截短多肽片段，所述八肽重复区多肽片段的氨基酸序列为序列表中的序列15，所述重复单元的氨基酸序列为序列表中的序列15的第10
‑
17位。
[0042]上述应用中，所述肿瘤细胞为人前列腺癌细胞，人卵巢癌紫杉醇耐药细胞或人乳腺癌阿霉素耐药细胞。
[0043]本发本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种核酸适体，为如下A1)
‑
A8)中任一种：A1)序列1所示的单链DNA分子；A2)序列2所示的单链DNA分子；A3)将A1)或A2)所示的核酸适体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；A4)将A1)或A2)所示的核酸适体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；A5)将A1)或A2)所示的核酸适体的骨架改造为硫代磷酸脂骨架，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；A6)由A1)或A2)所示的核酸适体编码的RNA分子，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体衍生物；A7)由A1)或A2)所示的核酸适体编码的肽核酸，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物；A8)将A1)
‑
A7)任一所示的核酸适体的一端或中间接上信号分子和/或活性分子和/或功能基团和/放射性核素，得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物。2.根据权利要求1所述的核酸适体，其特征在于：A8)中的所述功能基团为荧光基团、生物素、放射性物质、治疗性物质、地高辛、纳米发光材料或酶标记。3.用于识别并结合细胞朊蛋白的试剂，其特征在于：所述试剂含有权利要求1或2所述的核酸适体。4.权利要求1
‑
2任一所述的核酸适体，和/或序列3和/或序列4和/或序列5所述核酸适体或其衍生物在下述任一种中的应用：(B1)识别或辅助识别细胞朊蛋白；(B2)结合或辅助结合细胞朊蛋白；(B3)检测或辅助检测待测样品中是否含有细胞朊蛋白；(B4)制备检测或辅助检测待测样品中是否含有细胞朊蛋白的产品；(B5)检测或辅助检测待测样品中细胞朊蛋白含量；(B6)制备检测或辅助检测待测样品中细胞朊蛋白含量的产品；(B7)检测或辅助检测表达细胞朊蛋白的肿瘤或肿瘤细胞；(B8)制备检测或辅助检测表达细胞朊蛋白的肿瘤或肿瘤细胞的产品；(B9)识别或辅助识别肿瘤或肿瘤细胞；(B10)结合或辅助结合肿瘤或肿瘤细胞；(B11)识别或辅助识别八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段；(B12)结合或辅助结合八肽重复区多肽片段及含1个、2个或4个八肽重复区中重复单元的截短多肽片段；(B13)制备识别或辅助...
【专利技术属性】
技术研发人员：上官棣华，盛景，张楠，刘祥军，隆振豪，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：
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