一种测定高脂肪样品基质中的黄曲霉毒素预警指示物Averantin的方法技术

本发明专利技术属于有害污染物风险预警检测技术领域，具体涉及一种测定高脂肪样品基质中的黄曲霉毒素预警指示物Averantin的方法。包括：取粉碎后的待检测样品，加入提取剂甲基叔丁基醚，振荡后离心，取上清液加入作为萃取剂的离子液体，形成均匀溶液；在水和氮吹辅助下，使离子液体萃取相分离；抽取沉积在下端的离子液体萃取相进入高效液相色谱仪

【技术实现步骤摘要】
determination of pesticides in representative crop fatty matrices:Olives and sunflower seeds[J].Food Chemistry,2022,386,132558)，但该方法的整个过程仍存在多次转移步骤，且所用试剂种类多，影响方法的准确度和简便性。
[0004]综上，由于AFs易感作物如花生、玉米、芝麻和坚果样品脂肪含量高，而AFs预警指示物AVN含量往往极低，故需发展准确、灵敏的适用于高脂肪含量样品基质中黄曲毒素预警指示物AVN的测定方法，为建立AVN与AFs之间的准确时间过程关系提供方法基础。

技术实现思路

[0005]针对高脂肪基质中亲脂性污染物等共提取物的存在，影响黄曲毒素预警指示物AVN检测方法的加标回收率、灵敏度和重复性，以及样品前处理过程中消除或降低共提取物时操作繁琐复杂、耗时的问题，本专利技术采用简单、快速的能高效萃取AVN的新型均相液液微萃取技术，与常规高效液相色谱仪
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紫外检测器联用，建立了一种简单、准确、高灵敏测定高脂肪基质样品中黄曲毒素预警指示物AVN的新方法，该方法具体是先通过离子液体与样品溶液形成均相溶液，离子液体能与目标物之间产生强的相互作用从而与共提取物有力竞争目标物，接着，在水和氮吹的辅助下，使离子液体萃取相分离。
[0006]本专利技术具体采用以下技术方案：
[0007]一种测定高脂肪样品基质中的黄曲霉毒素预警指示物Averantin的方法，包括以下步骤：
[0008]将待检测样品粉碎，称取样品，加入提取剂甲基叔丁基醚，涡旋10～120s后，离心5～10min，透明的上清液为制备出的非水样品溶液。取非水样品溶液至锥形底离心管中，加入作为萃取剂的离子液体，形成均相溶液；在水和氮吹辅助下，使离子液体萃取相分离；抽取一定体积的沉积在下端的离子液体萃取相进入高效液相色谱仪
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紫外检测器分析。其中，待检测样品、提取剂、萃取剂、水的用量比为：0.1～0.5g:1～5mL:20～45μL:1～5mL。
[0009]离子液体能充分溶解于样品提取液中形成均相溶液，离子液体与AVN的接触面积无限大，实现两者的高效传质，且在萃取过程中AVN在离子液体相和对应共提取物相进行分配，离子液体能通过强的π
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π和氢键作用将AVN从高脂肪基质提取液中高效萃取出来。接着，在水和氮吹的辅助下，使离子液体相和共提取物相分离，消除亲脂性污染物等共萃取物的干扰。整个萃取过程采用仅微升级的离子液体，实现微萃取。
[0010]其中，高效液相色谱条件为：色谱柱为C18(4.6
×
250mm，5μm)，进样量10μL，柱温30℃，流速1mL/min；流动相为甲醇/乙腈/水(35:35:30，v/v/v)；紫外检测波长330nm。
[0011]上述步骤中，氮吹的温度为40～60℃，氮吹至至离子液体萃取相从提取液中分离并沉积到下部。
[0012]上述步骤中，所述的水与萃取剂不互溶。所述的萃取剂离子液体需与样品溶液互溶，形成均相溶液，具体的，所用的离子液体为1
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己基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([HMIM][Tf2N])。
[0013]本专利技术的有益效果为：
[0014]1.本专利技术构建了一种简单、快速的能高效萃取高脂肪含量谷物样品中痕量污染物的新型均相液液微萃取技术，进而提出了一种能简单、准确、高灵敏测定高脂肪基质谷物样品中黄曲霉毒素预警指示物AVN的新方法。
[0015]2.本专利技术采用实验室常规高效液相色谱仪
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紫外检测器就能实现黄曲霉毒素预警指示物的准确、高灵敏测定，有助于AFs早期预警，保障全民食品质量安全。
[0016]3.本专利技术建立的均相液液微萃取
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高效液相色谱
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紫外检测方法为进一步研究AFs的预警技术提供了一种新的分析策略。
附图说明
[0017]图1为萃取剂种类对萃取效率的影响。
[0018]图2为[HMIM][Tf2N]与AVN的电势图；图中(a)AVN，(b)[HMIM]+
，(c)[Tf2N]‑
。
[0019]图3为[HMIM][Tf2N]的体积对萃取效率的影响。
[0020]图4为水的体积对萃取效率的影响。
[0021]图5为空白花生样品加标前后的色谱图。
具体实施方式
[0022]下面通过具体实施方式对本专利技术进行更加详细的说明，以便于对本专利技术技术方案的理解，但并不用于对本专利技术保护范围的限制。
[0023]实施例中所述的空白花生样品是指该花生样品中未检测出AVN，检测步骤如下：
[0024]将花生样品粉碎后，称取0.2g花生样品，加入2mL甲基叔丁基醚，涡旋提取30s，以4000rpm离心5min。取1mL上清液，加入35μL[HMIM][Tf2N]和4mL水。60℃下氮吹约5min至离子液体萃取相从提取液中分离并沉积到下部，抽取沉积到下端的离子液体10μL，进高效液相色谱仪
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紫外检测器分析。
[0025]实施例1：不同种类萃取剂试验研究
[0026]本实施例主要研究不同种类离子液体对萃取效率的影响。所选用的离子液体为1
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丁基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([BMIM][Tf2N])、1
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己基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([HMIM][Tf2N])、1
‑
辛基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([OMIM][Tf2N])、1
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癸基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([DeMIM][Tf2N])、1,3
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二己基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([HHIM][Tf2N])和1
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乙烯基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺([VHIM][Tf2N])，分别将其作为萃取剂对花生样品中的黄曲霉毒素预警指示物AVN进行萃取。具体操作步骤如下：
[0027](1)将空白花生样品粉碎，称取样品0.2g，加入提取剂甲基叔丁基醚2mL，涡旋30s后，以4000rpm离心5min，透明的上清液为空白花生样品提取液。
[0028](2)分别取1mL空白花生样品提取液至锥形底离心管中，添加50ng/mL的AVN，分别加入40μL以上6种不同的离子液体和4mL水。60℃下氮吹约5min至离子液体萃取相从提取液中分离并沉积到下部，抽取离子液体10μL，进高效液相色谱仪
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紫外检测器分析。
[0029]将得到的萃取回收率进行对比，结果如图1所示。
[0030]从图1中可以看到，在考察的离子液体中，[HMIM][Tf2N]为萃取剂时萃取回收率最好。这一方面是由于[HMIM][Tf2N]能充分溶解本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定高脂肪样品基质中的黄曲霉毒素预警指示物Averantin的方法，其特征在于，包括以下步骤：取粉碎后的待检测样品，加入提取剂甲基叔丁基醚，振荡后离心，取上清液加入作为萃取剂的离子液体，形成均匀溶液；在水和氮吹辅助下，使离子液体萃取相分离；抽取沉积在下端的离子液体萃取相进入高效液相色谱仪
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紫外检测器分析；所述的水与萃取剂不互溶；待检测样品、提取剂、萃取剂、水的用量比为：0.1～0.5 g: 1～5 mL: 20～45
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L: 1～5 mL。2.根据权利要求1所述的一种方法，其特征在于，所述振荡采用涡旋方式进行，涡旋时间为10～120 s。3.根据权利要求1所述的一种方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丽君，李景娜，张雅琪，孙亚明，满勇，
申请(专利权)人：河南工业大学，
类型：发明
国别省市：