本发明专利技术涉及生物医药拟领域，公开了一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物及其应用，该提取物以鲜川东獐牙菜为原料，经有机溶剂提取、离心、浓缩、复溶得到。本技术方案的川东獐牙菜提取物经过肝内胆汁淤积大鼠模型验证具有明显的改善肝内胆汁淤积的作用，能够有效地改善胆汁淤积性肝炎大鼠的血清肝功指标、肝组织氧化应激指标和肝组织病理状态，川东獐牙菜可以通过上调肝组织FXR、NTCP、BSEP、MRP2和TGR5蛋白的表达，下调肝组织CYP7A1、NF
【技术实现步骤摘要】
一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物及其应用
[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物及其应用。
技术介绍
[0002]胆汁淤积性肝炎又称胆汁淤积性肝病，是由药源性损伤、自身免疫性疾病和酒精中毒等病因引起肝细胞或毛细胆管功能障碍，减少胆汁酸外排而导致的肝脏疾病，甚至引发肝硬化、肝衰竭、肝癌等疾病，胆汁淤积性肝炎发病率在全国范围内正逐年升高，临床将1.5倍血清碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)数值作为临界判断的指标。肝内胆汁淤积症是肝脏疾病常见的症候群，多与胆汁分泌障碍，肝细胞中胆汁酸蓄积有关，具体病因不明确。肝内胆汁淤积症是新生儿高发的肝脏疾病，发病率在1:2500到1:5000之间。
[0003]肝细胞摄取胆汁酸，在肝细胞内转运，通过毛细胆管排泄，其中的任何步骤出现异常均可导致胆汁排泄不畅，引起胆汁淤积。目前胆汁淤积性肝炎的主要治疗方式包括药物治疗和肝移植，熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid，UDCA)作为首选药物被FDA批准治疗CLI，但疗效欠佳；奥贝胆酸(Obeticholic acid，OCA)是法呢醇X受体(Farnesyl X receptor,FXR)激动剂，能调节胆汁流速和胆酸盐重吸收改善CLI症状，作为备选药物用于对UDCA无应答的PBC患者，但OCA会增加瘙痒、腹痛等副作用。西医对胆汁淤积性肝病的治疗是以针对病因和相关并发症为主，尚无特效的治疗药物，而且所伴发的全身瘙痒等症状、昂贵的医疗费用、漫长的疾病过程给患者造成了严重的身心负担。目前，肝移植是治疗胆汁淤积终末期肝病的唯一有效方法，但肝移植后胆管阻塞、大出血、免疫排斥、癌变等问题仍有待攻克。因此，寻找新的靶点和临床有效且副作用小的药物治疗胆汁淤积性肝炎具有重要意义。
技术实现思路
[0004]本专利技术意在提供一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物及其应用，以解决现有技术中胆汁淤积性肝炎治疗时存在的副作用大、治疗效果不佳的问题。
[0005]为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物，以鲜川东獐牙菜为原料，经有机溶剂提取、离心、浓缩、复溶得到。
[0006]另一方面，本技术方案提供一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物在制备治疗胆汁淤积性肝炎药物中的应用。
[0007]优选的，作为一种改进，一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0008]步骤一、原料的选择：以鲜川东獐牙菜为原料；
[0009]步骤二、烘干：将洗净的川东獐牙菜全草置入烘箱进行烘干处理；
[0010]步骤三、提取：以乙醇为溶剂对烘干后的川东獐牙菜进行回流提取；
[0011]步骤四、离心机浓缩：将提取液离心除杂后，上清液进行减压浓缩，浓缩后加入超
纯水进行复溶处理。
[0012]优选的，作为一种改进，步骤二中，烘干温度为50℃。
[0013]优选的，作为一种改进步骤三中，在进行溶剂提取前，将川东獐牙菜剪成3～5cm的段状。
[0014]优选的，作为一种改进，步骤三中，提取溶剂为50
‑
70％乙醇，提取溶剂与川东獐牙菜的质量比为(8
‑
12):1。
[0015]优选的，作为一种改进，步骤三中，提取次数为3次，每次提取时间为2h，提取结束后过滤处理并合并提取液。
[0016]优选的，作为一种改进，步骤四中，离心速度为3000rpm/min，离心时间为15
‑
20min。
[0017]优选的，作为一种改进，步骤四中，浓缩温度为45
‑
55℃。
[0018]优选的，作为一种改进，步骤四中，将复溶的川东獐牙菜提取物经D101大孔树脂，依次用水、20％乙醇、40％乙醇、60％乙醇、80％乙醇、100％乙醇梯度洗脱，每个梯度洗脱6个柱体积，最后将水洗脱部位和100％乙醇洗脱部位弃去，其余各部位混合后，用旋转蒸发仪减压浓缩，加入超纯水进行溶解并定容至400mL。
[0019]本方案的原理及优点是：本技术方案的川东獐牙菜提取物经过肝内胆汁淤积大鼠模型验证具有明显的改善肝内胆汁淤积的作用，能够有效地改善胆汁淤积性肝炎大鼠的血清肝功指标、肝组织氧化应激指标和肝组织病理状态，川东獐牙菜可以通过上调肝组织FXR、NTCP、BSEP、MRP2和TGR5蛋白的表达，下调肝组织CYP7A1、NF
‑
κB、IκBα、TNF
‑
α蛋白的表达，对ANIT致胆汁淤积性肝炎大鼠有明显的保护作用。结果表明，川东獐牙菜通过激活FXR核受体和TGR5核受体，调节胆汁酸合成酶CYP7A1、胆汁酸摄取转运体NTCP、外排转运体MRP2和BSEP的表达，从而减少胆汁酸的合成，降低肝细胞对胆汁酸的摄取，增加胆汁酸的外排，从而改善肝内胆汁淤积性肝炎；同时川东獐牙菜可以通过调节NF
‑
κB炎症通路进而抑制NF
‑
κB、IκBα、TNF
‑
α蛋白的表达，降低下游炎症细胞因子的表达，改善ANIT诱导的胆汁淤积性肝炎。在研发期间，川东獐牙菜改善胆汁淤积的药效及药理机制研究为本技术方案的难点之一，其中ANIT造模剂量尤其关键，需要长时间的摸索和研究。
附图说明
[0020]图1为本专利技术实施例中HE染色流程图。
[0021]图2肝组织Western blot实验步骤流程图。
[0022]图3为川东獐牙菜对肝内胆汁淤积大鼠的肝指数影响(x
±
s，n＝8)。
[0023]图4为川东獐牙菜对肝内胆汁淤积大鼠血清生化指标的变化。
[0024]图5为川东獐牙菜对肝内胆汁淤积大鼠肝组织匀浆中SOD、GSH和MDA含量的影响(x
±
s，n＝8)。
[0025]图6为川东獐牙菜对肝内胆汁淤积大鼠肝脏病理学变化的影响(HE，200
×
)。
[0026]图7为川东獐牙菜对大鼠肝组织中FXR、CYP7a1、NTCP、BSEP、MRP2、TGR5、NF
‑
κB p65、IκB
‑
α、TNF
‑
α蛋白表达的影响。
具体实施方式
[0027]下面通过具体实施方式进一步详细说明，但本专利技术的实施方式不限于此。若未特别指明，下述实施方式所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段；所用的实验方法均为常规方法；所用的材料、试剂等，均可从商业途径得到。
[0028]实施例1
[0029]一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物：以鲜川东獐牙菜为原料，经有机溶剂提取、离心、浓缩、复溶得到。
[0030]一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0031]步骤一、将新鲜川东獐牙菜全草洗去泥沙等杂本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物，其特征在于：以鲜川东獐牙菜为原料，经有机溶剂提取、离心、浓缩、复溶得到。2.根据权利要求1所述的一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、原料的选择：以鲜川东獐牙菜为原料；步骤二、烘干：将洗净的川东獐牙菜全草置入烘箱进行烘干处理；步骤三、提取：以乙醇为溶剂对烘干后的川东獐牙菜进行回流提取；步骤四、离心机浓缩：将提取液离心除杂后，上清液进行减压浓缩，浓缩后加入超纯水进行复溶处理。3.根据权利要求2所述的一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，其特征在于：步骤二中，烘干温度为50℃。4.根据权利要求3所述的一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，其特征在于：步骤三中，在进行溶剂提取前，将川东獐牙菜剪成3～5cm的段状。5.根据权利要求4所述的一种改善胆汁淤积性肝损伤的川东獐牙菜提取物的制备方法，其特征在于：步骤三中，提取溶剂为50
‑
70％乙醇，提取溶剂与川东獐牙菜的质量比为(8
‑
12):1。6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：王文祥，熊伟，李宁，杨策，冯彬彬，易东阳，
申请(专利权)人：重庆三峡医药高等专科学校，
类型：发明
国别省市：
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