具有4-氨基苯甲酸羟基化活性的多肽及其利用制造技术

本发明专利技术提供一种具有优异的4

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽及其利用


[0001]本专利技术涉及一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽及其用途。

技术介绍

[0002]聚苯并噁唑(PBO)作为耐热性、力学强度优异的工程塑料而为人所知，用于纤维材料及半导体元件的绝缘膜等(非专利文献1)。
[0003]苯并噁唑骨架通过邻氨基苯酚骨架与羧酸的缩合而生成。因此，期待在分子内具有这些官能团的4
‑
氨基
‑3‑
羟基苯甲酸(4,3
‑
AHBA)类作为PBO单体是有用的。实际上，正在研究使用了4,3
‑
AHBA的聚苯并噁唑的合成和物性评价(非专利文献2)。
[0004]近年来，面向地球环境负荷减轻等以可再生能源作为原料的利用微生物发酵的化合物的制造方法备受瞩目。例如，进行了具有与4,3
‑
AHBA类似的结构的3
‑
氨基
‑4‑
羟基苯甲酸(3,4
‑
AHBA)的利用微生物的生产和聚合物化的研究(专利文献1)。
[0005]关于4,3
‑
AHBA的制造，迄今为止已知将硝基芳香族化学地还原来合成的方法等(专利文献2)。作为能够进行通过微生物法的4,3
‑
AHBA发酵生产的对策，考虑对能够在微生物内进行生物合成的4
‑
氨基苯甲酸(4
‑
ABA)的3位进行羟基化，但关于这样的反应，仅报道了一部分的4
‑
羟基苯甲酸羟化酶稍有活性(非专利文献3、4)。
[0006]专利文献1：日本专利第5445453号公报
[0007]专利文献2：日本专利第3821350号公报
[0008]非专利文献1：村濑浩贵，SENI GAKKAISHI(纤维与工业)，Vol.66，No.6(2010)
[0009]非专利文献2：Lon J.Mathias et al.,Macromolecules,Vol.18,No.4,pp.616
‑
622(1985)
[0010]非专利文献3：Barrie Entsch et al.,The Journal of Biological Chemistry,Vol.262,No.13,pp.6060
‑
6068(1987)
[0011]非专利文献4：Domenico L.Gatti et al.,Biochemistry,Vol.35,No.2,pp.567
‑
578(1996)

技术实现思路

[0012]本专利技术涉及以下的1)～7)。
[0013]1)一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽，其中，在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列中，序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位相当的位置处的氨基酸残基为下述氨基酸，
[0014](a)39位或与其相当的位置：半胱氨酸；
[0015](b)43位或与其相当的位置：亮氨酸、组氨酸；
[0016](c)83位或与其相当的位置：缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸；
[0017](d)106位或与其相当的位置：丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苏氨酸；
[0018](e)180位或与其相当的位置：丙氨酸；
[0019](f)266位或与其相当的位置：缬氨酸、苯丙氨酸；
[0020](g)346位或与其相当的位置：亮氨酸；
[0021](h)363位或与其相当的位置：缬氨酸、亮氨酸；
[0022](i)371位或与其相当的位置：苯丙氨酸。
[0023]2)一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的突变多肽的制造方法，其中，在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成且具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽中，序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位相当的位置处的氨基酸残基为下述氨基酸，
[0024](a)39位或与其相当的位置：半胱氨酸；
[0025](b)43位或与其相当的位置：亮氨酸、组氨酸；
[0026](c)83位或与其相当的位置：缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸；
[0027](d)106位或与其相当的位置：丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苏氨酸；
[0028](e)180位或与其相当的位置：丙氨酸；
[0029](f)266位或与其相当的位置：缬氨酸、苯丙氨酸；
[0030](g)346位或与其相当的位置：亮氨酸；
[0031](h)363位或与其相当的位置：缬氨酸、亮氨酸；
[0032](i)371位或与其相当的位置：苯丙氨酸。
[0033]3)一种4
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氨基苯甲酸羟基化活性的提高方法，其中，包括：在由序列号2所示的氨基酸序列或其与具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成且具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位相当的位置处的氨基酸残基置换为下述氨基酸，
[0034](a)39位或与其相当的位置：半胱氨酸；
[0035](b)43位或与其相当的位置：亮氨酸、组氨酸；
[0036](c)83位或与其相当的位置：缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸；
[0037](d)106位或与其相当的位置：丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苏氨酸；
[0038](e)180位或与其相当的位置：丙氨酸；
[0039](f)266位或与其相当的位置：缬氨酸、苯丙氨酸；
[0040](g)346位或与其相当的位置：亮氨酸；
[0041](h)363位或与其相当的位置：缬氨酸、亮氨酸；
[0042](i)371位或与其相当的位置：苯丙氨酸。
[0043]4)一种多核苷酸，其编码1)所述的多肽。
[0044]5)一种载体或DNA片段，其中，含有4)所述的多核苷酸。
[0045]6)一种转化细胞，其中，含有5)所述的载体或DNA片段。
[0046]7)一种4
‑
氨基
‑3‑
羟基苯甲酸类的制造方法，其中，包括培养6)的转化细胞的工序。
具体实施方式
[004本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽，其中，在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列中，序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位相当的位置处的氨基酸残基为下述氨基酸，(a)39位或与其相当的位置：半胱氨酸；(b)43位或与其相当的位置：亮氨酸、组氨酸；(c)83位或与其相当的位置：缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸；(d)106位或与其相当的位置：丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苏氨酸；(e)180位或与其相当的位置：丙氨酸；(f)266位或与其相当的位置：缬氨酸、苯丙氨酸；(g)346位或与其相当的位置：亮氨酸；(h)363位或与其相当的位置：缬氨酸、亮氨酸；(i)371位或与其相当的位置：苯丙氨酸。2.一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的突变多肽的制造方法，其中，包括：在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成且具有4
‑
氨基苯甲酸羟基化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位相当的位置处的氨基酸残基置换为下述氨基酸，(a)39位或与其相当的位置：半胱氨酸；(b)43位或与其相当的位置：亮氨酸、组氨酸；(c)83位或与其相当的位置：缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸；(d)106位或与其相当的位置：丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苏氨酸；(e)180位或与其相当的位置：丙氨酸；(f)266位或与其相当的位置：缬氨酸、苯丙氨酸；(g)346位或与其相当的位置：亮氨酸；(h)363位或与其相当的位置：缬氨酸、亮氨酸；(i)371位或与其相当的位置：苯丙氨酸。3.一种4
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氨基苯甲酸羟基化活性的提高方法，其中，包括：在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成且具有4
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氨基苯甲酸羟基化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的39位、43位、83位、106位、180位、266位、346位、363位或371位、或与39位、43位、83位、106位、180位、26...

【专利技术属性】
技术研发人员：野中镜士朗，高桥史员，
申请(专利权)人：花王株式会社，
类型：发明
国别省市：