核酸纯化方法、核酸提取液和核酸纯化试剂盒技术

本发明专利技术提供能够效率良好地纯化核酸的核酸纯化方法。本发明专利技术的核酸纯化方法具备：将核酸与消泡剂和共沉淀剂进行混合的工序；纯化核酸的工序，消泡剂为非离子类表面活性剂和聚硅氧烷类消泡剂中的至少一种。氧烷类消泡剂中的至少一种。氧烷类消泡剂中的至少一种。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】核酸纯化方法、核酸提取液和核酸纯化试剂盒


[0001]本专利技术涉及核酸纯化方法、以及该核酸纯化方法中使用的核酸提取液和核酸纯化试剂盒。

技术介绍

[0002]以往，对纯化病毒、细菌、真菌或细胞等样品中含有的RNA、DNA等核酸的方法进行了各种研究。例如，已知在含有来自样品的核酸的提取液中添加醇等析出试剂使核酸析出，使析出的核酸吸附在固相载体上，将与核酸一起附着在固相载体上的来自样品的蛋白质等杂质清洗后，用溶出液回收核酸的方法。
[0003]例如，下述专利文献1中公开了使用微设备的核酸的分离纯化方法。所述核酸的分离纯化方法包括：使包含核酸的样品溶液与核酸吸附性载体接触，使核酸吸附的工序；在核酸被吸附了的状态下，通过清洗液清洗核酸吸附性载体的工序；通过回收液使核酸从核酸吸附性载体解吸，纯化核酸的工序。
[0004]此外，在专利文献1中记载了也可以包括将检体和核酸溶解试剂混合并均匀化而得到包含核酸的样品溶液的前处理工序。作为核酸溶解试剂，记载了可以是含有离液盐、表面活性剂、蛋白分解酶、消泡剂和核酸稳定剂中的至少一种的溶液。
[0005]现有技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献1：日本特开2006
‑
087372号公报

技术实现思路

[0008]专利技术所解决的技术问题
[0009]但是，在使用微芯片输送溶液时，存在产生气泡，影响核酸的纯化、检测的问题。
[0010]即使在使用专利文献1的核酸纯化方法的情况下，有时也不能充分抑制气泡的产生。此外，即使能够抑制气泡的产生，有时也不能充分提高核酸回收效率。因此，在专利文献1的核酸纯化方法中，存在难以兼顾抑制气泡的产生和提高核酸回收效率的问题。
[0011]此外，在使用自旋柱、磁性珠的核酸纯化方法中，也有为了除去来自检体的夹杂物而进行提取液的过滤器过滤的情况，但是存在：由于来自检体的粘性而引起的过滤阻力的上升、来自检体的起泡而使过滤器过滤的处理性变差的问题。
[0012]因此，在现有的核酸纯化方法中，存在难以高效地纯化核酸的问题。
[0013]本专利技术的目的在于：提供能够效率良好地纯化核酸的核酸纯化方法、以及该核酸纯化方法中使用的核酸提取液和核酸纯化试剂盒。
[0014]解决问题的技术手段
[0015]本专利技术的核酸纯化方法具备：将核酸与消泡剂和共沉淀剂进行混合的工序；和纯化所述核酸的工序，所述消泡剂为非离子类表面活性剂和聚硅氧烷类消泡剂中的至少一种。
[0016]本专利技术的核酸纯化方法的一个特定方案中，将所述核酸与所述消泡剂和共沉淀剂混合后，使所述核酸被固相载体吸附并纯化。
[0017]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和所述共沉淀剂的核酸提取液的工序，通过使包含所述核酸的样品与所述核酸提取液接触，而将所述核酸与所述消泡剂和共沉淀剂混合。
[0018]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述消泡剂为非离子类表面活性剂。
[0019]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和共沉淀剂的核酸提取液的工序，所述核酸提取液中的所述非离子类表面活性剂的含量为所述0.001体积％以上1体积％以下。
[0020]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述非离子类表面活性剂为选自聚氧亚烷基烷基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚、聚氧乙烯二苯乙烯化苯基醚、聚氧亚烷基脂肪酸酯、聚氧亚烷基甘油基醚、山梨糖醇酐脂肪酸酯、月桂基
‑
β
‑
D
‑
麦芽糖苷、聚氧乙烯烷胺、棕榈仁油脂肪酸二乙醇酰胺和毛地黄皂苷中的至少1种。
[0021]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述非离子类表面活性剂为聚氧亚烷基烷基醚与聚氧亚烷基脂肪酸酯的混合物。
[0022]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述消泡剂为所述聚硅氧烷类消泡剂。
[0023]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和共沉淀剂的核酸提取液的工序，所述核酸提取液中的所述聚硅氧烷类消泡剂的含量为0.001体积％以上10体积％以下。
[0024]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述聚硅氧烷类消泡剂由硅油和乳化剂构成。
[0025]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述聚硅氧烷类消泡剂是通过非离子类表面活性剂使硅油乳化而得到的。
[0026]本专利技术的核酸纯化方法的其他特定方案中，所述共沉淀剂为聚腺嘌呤。
[0027]本专利技术的核酸提取液为核酸纯化中使用的核酸提取液，其中，所述核酸提取液包含消泡剂和共沉淀剂，所述消泡剂为非离子类表面活性剂和聚硅氧烷类消泡剂中的至少一种。
[0028]本专利技术的核酸提取液的一个特定方案中，所述消泡剂为所述非离子类表面活性剂。
[0029]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述核酸提取液中的所述非离子类表面活性剂的含量为0.001体积％以上1体积％以下。
[0030]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述非离子类表面活性剂为选自聚氧亚烷基烷基醚、聚氧乙烯支链烷基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚、聚氧乙烯二苯乙烯化苯基醚、聚氧乙烯植物甾醇醚、聚氧亚烷基脂肪酸酯、聚氧亚烷基甘油基醚、山梨糖醇酐脂肪酸酯、月桂基
‑
β
‑
D
‑
麦芽糖苷、聚氧乙烯烷胺、棕榈仁油脂肪酸二乙醇酰胺和毛地黄皂苷中的至少1种。
[0031]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述非离子类表面活性剂为聚氧亚烷基烷基醚与聚氧亚烷基脂肪酸酯的混合物。
[0032]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述消泡剂为所述聚硅氧烷类消泡剂。
[0033]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述核酸提取液中的所述聚硅氧烷类消泡剂的含量为0.001体积％以上10体积％以下。
[0034]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述聚硅氧烷消泡剂由硅油和乳化剂构成。
[0035]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述聚硅氧烷消泡剂是通过非离子类表面活性剂使硅油乳化而得到的。
[0036]本专利技术的核酸提取液的其他特定方案中，所述共沉淀剂为聚腺嘌呤。
[0037]本专利技术的核酸纯化试剂盒包含根据本专利技术而构成的核酸提取液。
[0038]专利技术的效果
[0039]通过本专利技术，能够提供：能够效率良好地纯化核酸的核酸纯化方法，以及该核酸纯化方法中使用的核酸提取液和核酸纯化试剂盒。
附图说明
[0040]图1是表示本专利技术的一个实施方式的核酸纯化方法中使用的微芯片的示意性俯视图。
[0041]图2是沿图1中的A
‑
A线的部分的示意截面图。
[0042]图3是用于说明本专利技术的一个实施方式的核酸纯化方法中核酸吸附在阴离子性吸附体上的状态的示意图。
[0043]图4是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种核酸纯化方法，其具备：将核酸与消泡剂和共沉淀剂进行混合的工序；和纯化所述核酸的工序，所述消泡剂为非离子类表面活性剂和聚硅氧烷类消泡剂中的至少一种。2.根据权利要求1所述的核酸纯化方法，其中，将所述核酸与所述消泡剂和共沉淀剂混合后，使所述核酸被固相载体吸附并纯化。3.根据权利要求1或2所述的核酸纯化方法，其进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和共沉淀剂的核酸提取液的工序，通过使包含所述核酸的样品与所述核酸提取液接触，而将所述核酸与所述消泡剂和共沉淀剂混合。4.根据权利要求1～3中任一项所述的核酸纯化方法，其中，所述消泡剂为所述非离子类表面活性剂。5.根据权利要求4所述的核酸纯化方法，其进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和共沉淀剂的核酸提取液的工序，所述核酸提取液中的所述非离子类表面活性剂的含量为0.001体积％以上1体积％以下。6.根据权利要求4或5所述的核酸纯化方法，其中，所述非离子类表面活性剂为选自聚氧亚烷基烷基醚、聚氧乙烯支链烷基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚、聚氧乙烯二苯乙烯化苯基醚、聚氧乙烯植物甾醇醚、聚氧亚烷基脂肪酸酯、聚氧亚烷基甘油基醚、山梨糖醇酐脂肪酸酯、月桂基
‑
β
‑
D
‑
麦芽糖苷、聚氧乙烯烷胺、棕榈仁油脂肪酸二乙醇酰胺和毛地黄皂苷中的至少1种。7.根据权利要求4～6中任一项所述的核酸纯化方法，其中，所述非离子类表面活性剂为聚氧亚烷基烷基醚与聚氧亚烷基脂肪酸酯的混合物。8.根据权利要求1～3中任一项所述的核酸纯化方法，其中，所述消泡剂为所述聚硅氧烷类消泡剂。9.根据权利要求8所述的核酸纯化方法，其进一步具备：准备预先包含所述消泡剂和共沉淀剂的核酸提取液的工序，所述核酸提取液中的所述聚硅氧烷类消泡剂的含量为0.001体积％以上10体积％以下。10.根据权利要求8或9所述的核酸纯化方法，其中，所述聚硅氧烷类消泡剂由硅油和乳化剂构成。11.根据权利要求8～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：山口创，内田桂，高松辰典，河野隆昌，木下拓也，
申请(专利权)人：积水化学工业株式会社，
类型：发明
国别省市：