一种虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法。其特征在于：采用甲醇超声的上清液，作为供试品与对照药材溶液，同一块薄层板，4种检视条件下，检视到虎杖的35种信息斑点，归属约26种化学成分，各成分虽相互重叠，但在各自的显色和检视条件下，却互不干扰，都能呈现出清晰的荧光斑点或颜色斑点。关键技术是：展开剂的组合配比，使各检视条件下的不同成分，皆能良好分离，再配以增荧光和显色技术，灵敏度与信息量大幅度提升，获得一板26种成分的薄层效果，虎杖药材的质量可控性提升。一块薄层板，数毫升溶剂，其信息量可与指纹图谱媲美，但简便性、快捷性、低成本、高效率、靓丽直观的信息斑点却是指纹图谱不具备的。丽直观的信息斑点却是指纹图谱不具备的。丽直观的信息斑点却是指纹图谱不具备的。

【技术实现步骤摘要】
一种虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法


[0001]本专利技术涉及一种虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法。属于薄层鉴别领域。即，在同一块薄层板上，4种检视条件下，检视到虎杖的35种信息斑点，归属约26种不同的化学成分，各成分虽相互重叠，但在各自的显色和检视条件下，却互不干扰，都能呈现出清晰的荧光斑点或颜色斑点。

技术介绍

[0002]传统的中药材在防病治病方面，发挥着化学药品不可替代的作用。按传统中医的理论，由中药材组成的复方制剂，君臣佐使搭配合理，疗效增强，毒副作用降低或相抵，在防病治病方面发挥着标本兼治的独特作用，具有着数千年的悠久历史。但随着时代的发展，中药材资源的过度采挖，目前市场上的药材质量参差不齐，有效成分相差悬殊，继而影响了传统中药的防病治病效果，必须对市场的中药材进行全面质量评价。
[0003]《中国药典》是最权威的药材质量标准，从建国后的1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010、2015年版到现行的2020年版，已经跨越了11版，收载了近千种中药材，其质量标准收载的内容包括性状、显微鉴别、薄层鉴别、浸出物、特征图谱(即指纹图谱)和含量测定等，在药材中显微鉴别和薄层鉴别收载率较高，能达到收载药材的80
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90％，含量测定约为60％，指纹图谱最少，还不到5％。仅就薄层鉴别而言，目前收载的方法通常是处理一个供试品溶液，一块薄层板，展开一次，鉴别1种或2种指标成分。很难对药材的内在质量，做出整体的、多信息、多指标的综合质量评价。指纹图谱虽然可以解决一些问题，但一则由于高效液相色谱仪性能要求高，价格昂贵，图谱难以直观、清晰的给出对比结果，必须要有熟练的专业技术人员，采用相似度对比软件，对多种形状一样的波峰，做出对比判断；二则因收载率太低，仅是杯水车薪，难以在市场上简便、快速、低成本的监督中药材的质量。
[0004]综上所述，急需开发简便、快捷、低成本、高效率、多信息、多指标评价市场上众多中药材质量的评价方法，故创建了虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法的研究。
[0005]虎杖为廖科植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的干燥根茎和根。具有利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛，止咳化痰之功效。用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，癥瘕，跌打损伤，肺热咳嗽。虎杖含蒽醌及蒽醌苷，如大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚及其与糖结合的各种苷类；芪类化合物，如白藜芦醇，白藜芦苷；酚性成分，如迷人醇，6
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羟基芦荟大黄素，原儿茶酸，儿茶素，大黄素
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单甲醚等；黄酮类化合物，如槲皮素，槲皮素
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阿拉伯糖苷，槲皮素
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鼠李糖苷等。目前在《中国药典》2020年版一部虎杖项下收载的薄层鉴别是以虎杖药材和大黄素与大黄素甲醚为对照，检测紫外光灯365nm下的荧光斑点，但方法比较繁琐、复杂，需要提取、提取液蒸干、酸水解、氯仿萃取、萃取液蒸干、再定容，作为供试品溶液进行薄层鉴别。查阅文献多是采用药典方法，检测信息斑点最多5个，信息量少，无法对虎杖的整体质量做出全面评价。
[0006]鉴于上述薄层鉴别的背景基础，为提高检测效率、降低检测成本、减少环境污染，
创建了简便、快捷、虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法。

技术实现思路

[0007]采用甲醇超声的上清液，作为供试品与对照药材溶液，同一块薄层板，4种检视条件下，检视到虎杖的35种信息斑点，归属约26种化学成分，各成分虽相互重叠，但在各自的显色和检视条件下，却互不干扰，均能呈现出清晰的荧光斑点或颜色斑点。关键技术为：展开剂的组合配比，使各检视条件下的不同成分，皆能良好分离，再配以增荧光和显色技术，灵敏度与信息量大幅度提升，获得一板26种成分的薄层效果，虎杖药材的质量可控性提升。一块薄层板，数毫升溶剂，其信息量可与指纹图谱媲美，但简便性、快捷性、低成本、高效率、靓丽直观的信息斑点却是指纹图谱不具备的。
[0008]本专利技术解决其技术问题所采用的方案为：
[0009]取虎杖药材及其对照药材粉末各0.3g，分别加甲醇2ml，超声处理10分钟，上清液分别作为供试品溶液与对照药材溶液；吸取上述两种溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为8∶2∶3∶0.5的三氯甲烷
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乙酸乙酯
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甲醇
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浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；再喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液
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乙醇的混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
[0010]本专利技术的原理如下：
[0011]依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相溶的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再通过组分和配比最佳的展开剂进行展开，使多种检视条件下的各不相同的化学成分，均能在薄层板上依据吸附、解吸附能力的不同，得以良好分离。再借助各成分化学结构不同，遇不同的显色试剂，可以产生不同荧光或各种颜色的原理，做到了在同一块薄层板上，4种检视条件下，检视26种成分的多信息效果。
[0012]本专利技术的创新点及有益效果如下：
[0013]1.虎杖药材以体积比8∶2∶3∶0.5的三氯甲烷
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乙酸乙酯
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甲醇
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浓氨为展开剂展开后，置紫外光灯254nm下检视到7个褐色斑点(图1)；置紫外光灯365nm下检视到10个红、橙、黄、蓝、亮蓝等不同颜色荧光斑点，从斑点的形状、大小和Rf值又与褐色的斑点不同，说明不是相同的化学成分(图2)；喷以10％硫酸乙醇溶液显色后，再置紫外光灯365nm下检视，呈现出紫、橙、黄、蓝、亮蓝、白色等10个不同颜色荧光斑点和2个黑色斑点(图3)；仔细对比图2和图3中的各荧光斑点的形状、大小、含有量、颜色和Rf值，发现7个是相同的化合物，3个是不同的化合物，2个黑色的斑点也是新增化合物。最后再喷以香草醛硫酸乙醇溶液显色后，日光下检视到6个不同颜色的斑点(图4)，从其形状、大小、含有量和Rf值与图1、2、3相比，有4个颜色斑点是新增的。这样，在同一块薄层板上，4种检视条件下，共检视到不同的信息斑点35个，归属于26种不同的化学成分。同一块薄层板，同时检测26种化学成分斑点尚属首次，具有新颖性、创造性和节约资源、提高效率、提升检测监督力度的实用性。
[0014]2.与《中国药典》2020年版一部本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.本发明涉及一种虎杖药材的一板26种成分信息斑点薄层鉴别方法，其特征在于：取虎杖药材及其对照药材粉末各0.3g，分别加甲醇2ml，超声处理10分钟，上清液分别作为供试品溶液与对照药材溶液；吸取上述两种溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶GF
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薄层板上，以体积比为8∶2∶3∶0.5的三氯甲烷
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乙酸乙酯
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甲醇
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浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯365nm下...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪雪荣，赵丽丽，王亚芳，刘勇，缪雨臻，兰新财，安丽娜，
申请(专利权)人：浙江金大康动物保健品有限公司，
类型：发明
国别省市：