齐墩果烷型三萜衍生物在制备心血管疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了一种齐墩果烷型三萜衍生物在制备心血管疾病药物中的应用。本发明专利技术利用微生物转化技术，将白桦脂酮酸转化成了一种同时具有3位羰基，7β位，15α位，29位羟基和19β位，28β位内酯取代结构的新型齐墩果烷型三萜衍生物。通过体外心肌细胞损伤保护试验和心肌细胞缺血再灌注试验证实，该化合物具有较好的心肌细胞保护活性，可以作为治疗心肌梗死、冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性心力衰竭药物的活性成分，可应用于制备治疗心血管疾病的药物。疗心血管疾病的药物。

【技术实现步骤摘要】
齐墩果烷型三萜衍生物在制备心血管疾病药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及一种齐墩果烷型三萜衍生物在制备心血管疾病药物中的应用。

技术介绍

[0002]随着生活水平的提高和人口老龄化加剧，同时受社会、环境等因素影响，心血管疾病发病率逐年增加，已成为人类死亡率最高的疾病之一。在心肌梗死，缺血再灌注损伤等多种心血管疾病的发生发展过程中多伴有心肌细胞损伤，进而发生细胞凋亡等，引起心血管功能的紊乱。心肌缺血和氧化应激是心血管疾病产生的重要因素。
[0003]白桦脂酮酸又称桦木酮酸，是一种羽扇豆烷型五环三萜类化合物，主要来源于桦树的树皮,也存在于苹果、使君子、黄荆和黄杨等植物中。现代药理研究发现，白桦脂酮酸具有抗肿瘤、抗病毒和抗炎等生物活性，其中以抗黑色素瘤而闻名。白桦脂酮酸作为白桦酸的氧化产物，是药物化学研究的重要中间体。有研究发现，白桦脂酮酸经过结构改造后产物的抗HIV活性得以增强。在化学结构修饰方面，白桦脂酮酸的化学合成衍生物在抗肿瘤方面的研究较为丰富，化学结构修饰的位点主要为白桦脂酮酸3位的羰基和28位的羧基。但是，由于五环三萜类化合物结构的特殊性，母核缺乏活泼基团，反应位点少，采用常规化学反应方法难以获得母核上具有羟基、羰基等修饰的衍生物。因此，严重限制了白桦脂酮酸化学结构修饰的反应位点以及衍生物的结构多样性。微生物转化是利用微生物细胞体内的酶对底物进行结构修饰，使其转化成为其他化合物的过程。发酵真菌、放线菌等微生物在生长过程中产生的细胞内或细胞外特殊的酶不仅可以催化自身物质，对于外来化合物也能催化特定的化学反应，例如水解、氧化、还原、裂解、骨架重排等，因而成为了复杂天然产物结构修饰与改造的有力工具。本课题组长期从事天然活性成分的微生物转化研究，尤其是天然活性三萜的微生物转化研究。利用多种微生物对天然来源的常见三萜(包括达玛烷型、环阿尔廷烷型、乌苏烷型、齐墩果烷型三萜和羽扇豆烷型等)进行转化研究，发现微生物酶体系能选择性催化三萜母核上的多个非化学反应活性位点，从而获得母核上具有羟基、羰基等化学活性基团的衍生物(Journal of natural products 2021,84:2664
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2674；Phytochemistry 2021,182:112608；Natural Product Research 2021,35(16):2685
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2690；Phytochemistry 2019，166:112076；Planta Medica 2019,85(1):56
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61)。微生物转化产物一方面可以获得更强生物活性的衍生物直接用于药物研发，另一方面经微生物转化后母核上新引进的化学活性基团增加了进行化学修饰与改造的位点，解决了三萜类化合物有机化学制备衍生物反应位点少的难题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种齐墩果烷型三萜衍生物或其药学上可成的盐在制备心血管疾病药物中的应用，可预防或治疗心血管疾病。
[0005]本专利技术提供了一种具有式Ⅰ结构的齐墩果烷型三萜衍生物或其药学上可接受的盐
在制备心血管疾病药物中的应用，
[0006][0007]结构式为式Ⅰ的化合物为本专利技术首次公开的齐墩果烷型三萜新衍生物。
[0008]本专利技术还提供了上述齐墩果烷型三萜衍生物的制备方法，包括如下步骤：
[0009]1)发酵培养微生物，向培养基中加入白桦脂酮酸，接着进行转化培养，除去菌丝体后得到发酵液，所述微生物为卷霉属的菌株；
[0010]2)将所述发酵液经萃取后，蒸干萃取液，得到转化粗提物；
[0011]3)转化粗提物经硅胶柱色谱，以二氯甲烷：甲醇作为流动相进行梯度洗脱，收集流份后经TLC分析合并得5个组分。
[0012]4)将所述组分用反相高效液相色谱纯化，得到齐墩果烷型三萜衍生物。
[0013]优选的，步骤1)中，转化培养温度为30℃，摇床转速为130转/分，培养时间为120小时。
[0014]优选的，步骤2)中，所述萃取的萃取溶剂为二氯甲烷。
[0015]优选的，步骤3)中，梯度洗脱条件为二氯甲烷：甲醇100:0
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50:1
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30:1
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20:1
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10:1。
[0016]进一步的，所述心血管疾病包括心肌细胞凋亡、心力衰竭或心肌缺血再灌注损伤引起的心血管疾病。
[0017]进一步的，所述心血管疾病包括心肌梗死、冠状动脉粥样硬化性心脏病或慢性心力衰竭。
[0018]进一步的，所述药物还含有药学上可以接受的辅料。
[0019]进一步的，所述药学上可接受的辅料为稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂中的一种或几种。
[0020]与现有技术相比，本专利技术利用微生物转化技术，将羽扇豆烷型三萜白桦脂酮酸转化为齐墩果烷型三萜，同时对母核上非化学反应活性位点7位、15位和29位成功地进行了结构修饰，引入了活性反应活性基团羟基，获得了一个对心肌细胞损伤具有显著保护活性的齐墩果烷型三萜衍生物，可以作为治疗心血管疾病药物的活性成分，具有广泛的用途。
[0021]具体实施方式
[0022]为了进一步说明本专利技术，下面结合实施例对本专利技术提供的一种齐墩果烷型三萜衍生物的制备过程及其在心血管疾病药物的应用进行详细描述。
[0023]实施例1：结构式为式Ⅰ的化合物的制备
[0024]本专利技术采用微生物转化方法，以白桦脂酮酸为原料，经过发酵、提取、分离等步骤，来制备本专利技术化合物。卷霉(Circinella)属的菌株可以购自中国科学院微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，选用马铃薯培养基，于固体斜面培养基上置4℃冰箱内保存。
[0025]以蝇卷霉Circinella muscae CGMCC 3.2695为例，制备结构式为式Ⅰ的化合物的过程如下：
[0026]1)发酵、转化以及萃取
[0027]将蝇卷霉Circinella muscae CGMCC 3.2695接入2个250mL三角瓶(装有100mL马铃薯培养基)中，作为种子液。于摇床上130rpm、30℃下振荡培养1天后，待菌丝生长处于旺盛期，用无菌移液管吸取1mL的种子液，加入到20个1000mL摇瓶(装有400mL马铃薯培养基)中。振荡培养1天后，每个摇瓶中加入20mg白桦脂酮酸(0.2mL，100mg/mL DMSO溶液)，共用400mg底物。相同条件下继续转化5天，将发酵液过滤，滤除菌丝体，滤液用等体积的二氯甲烷萃取3次，萃取液减压浓缩至干，得到转化物粗提物约0.52g。
[0028]2)硅胶柱色谱分离
[0029]转化粗提物经硅胶柱色谱进行分离。二氯甲烷：甲醇梯度洗脱(100:0，50:1，30:1，20:1，10:1)。收集流份，经TLC分析后合并，得合并组分A
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E。
[0030]3)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有式Ⅰ结构的齐墩果烷型三萜衍生物或其药学上可接受的盐在制备心血管疾病药物中的应用，2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述心血管疾病包括心肌细胞凋亡、心力衰竭或心肌缺血再灌注损伤引起的心血管疾病。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述心血管疾病包括心肌梗死、冠状动脉粥...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈广通，吴艳妮，易颖，陆游佳，范博义，宋妍，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：