一种具有骨密度调节活性的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有骨密度调节活性的多肽及其应用，属于生物活性肽领域。本发明专利技术提供了SEQ ID NO.1所示的多肽在调节骨密度、改善骨质疏松方面的新用途。该多肽能以剂量依赖的形式促进MC3T3

【技术实现步骤摘要】
一种具有骨密度调节活性的多肽及其应用


[0001]本专利技术涉及一种具有骨密度调节活性的多肽及其应用，属于生物活性肽领域。

技术介绍

[0002]骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种以骨量丢失、骨微结构改变、骨脆性增加为主要特征的全身性骨骼疾病。人口老龄化程度增加是骨质疏松发生比例逐年升高的一个关键因素。据统计，全世界有20多亿骨质疏松患者，仅在美国骨质疏松人数高达2 400万人，且其中每年约有150万名患者会发生骨折。由此带来了非常严重的经济负担，因此，骨质疏松症也成为了当今社会不容忽视的社会公众健康问题之一。临床上有多种方法来治疗骨质疏松，其中雌激素替代疗法是预防和治疗骨质疏松症的首选，但有许多研究及临床数据表明长期服用雌激素会导致肝功能受损，还会引起子宫内膜过度增生，引起子宫出血等毒副作用。此外，许多常用治疗药物均有较严重的并发症。随着科技的发展，人们越来越重视食物疗法，通过调整饮食结构同时合理摄取一些含有骨密度调节的活性成分来有效的预防骨质疏松的发生，同时也为开发一些安全高效的骨质疏松治疗药物提供辅助参考。
[0003]骨组织中的成骨细胞和破骨细胞和相互平衡是影响骨质的主要原因。一旦该平衡被打破就会引发骨的相关疾病。骨组织时刻都进行着溶解吸收和再生修复的过程，当骨组织受损时，成骨细胞就会大量增殖，并在细胞外基质中成熟、矿化，形成新的骨组织覆盖被吸收的部位。因此，成骨细胞活力的降低、凋亡的增加是引起骨质疏松的一个重要因素。成骨细胞分化增殖的过程受到激素、生长调控因子等许多因素的影响。随着年龄的增大，成骨细胞的活性降低，破骨细胞的活性相对升高，导致骨吸收大于骨形成，最终导致骨质疏松的发生。因此，适当提高成骨细胞的活力，促进骨稳态受损时成骨细胞增殖及分化的进程，缓减骨吸收和骨形成之间的平衡对于骨质疏松的预防有一定的意义。
[0004]研究表明，许多生物活性肽可以以完整肽段形式直接通过小肠粘膜吸收，发挥较强的营养价值，在疾病的预防或治疗中发挥越来越大的作用。胶原蛋白肽可刺激关节软骨形成II型胶原蛋白等主要蛋白的表达。此外，南极磷虾肽、罗非鱼胶原蛋白多肽、狭鳕鱼皮胶原多肽以及许多植物蛋白来源的多肽均被报道有较好的调节骨密度活性，但由于技术的限制以及工艺成本高等因素，限制了其进行工业化生产和利用。鳕鱼(Gadus morhua)作为一种高经济价值的食用鱼，前期研究表明鳕鱼酶解物具有较强的骨密度调节活性，能有效缓减去卵巢小鼠骨质疏松症的发生，但其中主要的活性多肽开发还有很长的路要走。因此以鳕鱼肽为原料，鉴定并开发主要的活性多肽对于骨质疏松保健食品和药品的开发具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种具有骨密度调节活性的多肽，可应用于功能食品开发与生物制药等领域，调节骨密度或预防骨质疏松。本专利技术以MC3T3
‑
E1细胞的增殖及分化以及去卵巢小鼠的骨密度变化情况来评价多肽潜在的骨密度调节活性。
[0006]本专利技术提供了一种具有骨密度调节活性的多肽，其氨基酸序列为Gly
‑
Glu
‑
Thr
‑
Asn
‑
Pro
‑
Ala
‑
Asp
‑
Ser
‑
Lys
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ser
‑
Ile
‑
Arg(GETNPADSKPGSIR，P
‑
GM
‑
2)，分子量为1428Da。
[0007]本专利技术还提供了所述多肽在制备缓解和/或治疗骨质疏松的药物中的应用。
[0008]在一种实施方式中，所述缓解和/或治疗骨质疏松包括：
[0009](a)恢复因骨质疏松导致的骨密度降低；
[0010](b)恢复因骨质疏松导致的骨量减少；
[0011](c)恢复因骨质疏松导致的骨小梁数量减少。
[0012]在一种实施方式中，所述药物还含有药学上可接受的载体。
[0013]在一种实施方式中，所述药学上可接受的载体包括医学上通常使用的填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、矫味剂中的一种或多种。
[0014]在一种实施方式中，所述多肽的作用剂量≥20mg/kg。
[0015]本专利技术还提供了所述多肽在制备有助于改善骨密度的保健品中的应用。
[0016]本专利技术还提供了所述多肽的制备方法，包括如下步骤：将目标多肽的C
‑
端羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这个氨基酸的氨基作为起点，与另一分子氨基酸的羧基作用形成肽键；不断重复这一过程，即可以得到目标多肽产物；合成反应完成后，去除保护基，将肽链与树脂分离，即可获得目标产物。
[0017]在一种实施方式中，所述方法还包括纯化，脱盐，冻干后，获得多肽的冻干粉末。
[0018]本专利技术还提供一种具有骨密度调节活性的食品或药物，含有SEQ ID NO.1所示的多肽。
[0019]在一种实施方式中，所述食品或药物中所述多肽的纯度≥98％。
[0020]有益效果：
[0021]本专利技术首次合成的骨密度调节活性肽Gly
‑
Glu
‑
Thr
‑
Asn
‑
Pro
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Ala
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Asp
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Ser
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Lys
‑
Pro
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Gly
‑
Ser
‑
Ile
‑
Arg(SEQ ID NO.1所示)，经检测具有良好的促进MC3T3
‑
E1细胞增殖和分化活性，在浓度为100μg/mL干预72h后，MC3T3
‑
E1细胞活力提高了19％，碱性磷酸酶活性提高10％。同时，在体内小鼠模型中，持续12周的灌胃可显著增加去卵巢后骨质疏松小鼠的骨小梁数量，提高骨密度水平(其中骨小梁数量由模型组的0.51 1/mm提升至0.78 1/mm，骨密度由0.43mg/cm3提升至0.46mg/cm3)，可应用于具有骨密度调节的药品开发中；
[0022]2、本专利技术的骨密度调节活性肽水溶性良好、无色无味，可用于制备食品、保健品或药品，为骨密度的改善，骨质疏松症的改善或预防提供了新的可能。
附图说明
[0023]图1是利用高效液相色谱法测定的骨密度调节活性肽的结果图谱；
[0024]图2是固相法合成多肽液相
‑
质谱联用鉴定结果图；
[0025]图3是所述鳕鱼活性肽(P
‑
GM
‑
2)在干预24h、48h和72h后对MC3T3
‑
E1细胞的增殖情况影响图(*代表与空白对照组相比有显著性差异，p<0.05)；
[0026本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.多肽在制备缓解和/或治疗骨质疏松的药物中的应用，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缓解和/或治疗骨质疏松包括：(a)恢复因骨质疏松导致的骨密度降低；(b)恢复因骨质疏松导致的骨量减少；(c)恢复因骨质疏松导致的骨小梁数量减少。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述多肽的作用剂量≥20mg/kg。4.含有SEQ ID NO.1所示多肽的药物。5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于，所述药物还含有药学上可接受的载体。6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括医学上通常使用的填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、矫味剂中的一种或多...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜明，杨美莲，程述震，吴迪，王震宇，徐献兵，罗双群，李翠翠，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：