利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒及方法，试剂盒中引物组包括以CigR(Gene ID：75149114)基因为靶向基因的外引物对和内引物对，外引物对为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，内引物对为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。本发明专利技术采用上述的一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒及方法，检测阴沟肠杆菌特异性好、灵敏度高，操作简单，无需昂贵仪器。器。器。

【技术实现步骤摘要】
利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒及方法


[0001]本专利技术涉及微生物检测
，尤其是涉及一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒及方法。

技术介绍

[0002]阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中，在人和动物粪便、泥土、植物中可以检出，是一种条件致病菌。随着头孢菌素的广泛使用，产生了更多的由阴沟肠杆菌引起细菌性感染疾病，成为医院感染较为显著的病原菌。伤寒发病率在我国食源性疾病中占比较高，每年近十万人感染此病菌，对食品中阴沟肠杆菌进行精准检测是保障食品安全和指导细菌治疗的重要手段。
[0003]目前，针对食源性致病菌的检测主要有传统的培养富集法、荧光染色法、PCR分析法等。细菌培养法是病原菌检测的金标准，其缺点在于耗时长，只能对活的细菌进行培养，在敏感性与特异性方面存在局限性。荧光染色法是通过荧光显微镜观察荧光从而检测细菌，此法较传统培养法更快速方便、检出能力高，但需要专业的仪器、对操作人员要求高、不能量化指标，存在非特异性染色问题等。各种PCR技术主要通过DNA提取、PCR扩增本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的引物组，其特征在于：所述引物组包括以CigR基因为靶向基因的外引物对和内引物对，外引物对为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，内引物对为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。2.一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒，其特征在于：试剂盒内包含如权利要求1所述的外引物对、内引物对。3.根据权利要求1所述的一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒，其特征在于：所述内引物对与外引物对的摩尔比例为(6～12):1。4.根据权利要求1所述的一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含反应液、DNA解旋聚合酶、显色剂、荧光染料、阳性对照和阴性对照。5.根据权利要求1所述的一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒，其特征在于：所述反应液包括40mM Tris HCl、20mM KCl、16mM MgSO4、20mM(NH4)2SO4、0.2％(v:v)Tween 20、2.8mM dNTPs、1M甜菜碱，其pH为8.8。6.根据权利要求1所述的一种利用LAMP技术快速检测阴沟肠杆菌的试剂盒，其特征在于：所述DNA解旋聚合酶为Bst 2.0Warmstart DNA聚合酶。7.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：方海田，田云，刘洪涛，郑军平，张聪，刘慧燕，魏晓博，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：