一种检测结核分枝杆菌耐药基因的引物组合及试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种用于检测结核分枝杆菌耐药基因的扩增引物组合及试剂盒。该试剂盒是基于纳米孔测序技术使用的，包含经过设计、筛选、验证得到的20对引物。检测时，使用这些引物混合物，采用多重PCR扩增待测样本DNA，在反应过程中每对引物扩增一段核苷酸序列或整个基因全长序列，然后运用纳米孔测序技术的高通量和长片段读取特点，获得这些基因序列，最后通过生物信息学分析判定待测样本。本发明专利技术方法可以在同一个反应条件下，同时完成对多个基因的扩增与检测，无需培养结核分枝杆菌，能鉴定结核分枝杆菌复合菌群，并检测多种耐药基因，具有多指标、快速、特异性强、灵敏度高等特点。灵敏度高等特点。灵敏度高等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种检测结核分枝杆菌耐药基因的引物组合及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于检测结核分枝杆菌耐药基因的扩增引物组合及试剂盒。

技术介绍

[0002]目前全球结核病防控面临很大挑战，其病原体称为结核分枝杆菌，具有非常复杂的耐药谱(Daley,Thorac Surg Clin 2019,29:19
–
25；Gagneux,Nat Rev Microbiol 2018,16:202
–
213)。导致结核病高致死率的两个关键原因：耐多药结核病(MDR
‑
TB)，为感染的结核分枝杆菌至少对异烟肼和利福平具有耐药性；广泛耐药结核病(XDR
‑
TB)，指感染的结核分枝杆菌，不仅对异烟肼和利福平具有耐药性，而且对至少一种氟喹诺酮类药物和二线抗结核药物(卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素等)具有耐药性(Liang等，Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2021,40:1851
‑
1861)。
[0003]结核分枝杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于结核分枝杆菌耐药基因检测的专用引物组合，其特征在于为如下所述的20对引物：序号基因名称上游引物序列下游引物序列1gyrBGAACGCGATTCATAGCAGCATCCCATCAGCACGATCTTGTGGTA2Rv0678AACTTCGTACTCCACCACCTTGTTCGATCCAGATCGGTGACATG3atpECACCATTCAGATGCGCAATCAGTCGATGACTTTACGGCCATCTG4eisGTACGTTCATGATGCGCAACCCTGTCAGTCGACGACGGAAAA5inhACACGTCTTTATGTAGCGCGACAATCGAAGCATACGAATACGCCG6rpsAATCATCAAGGTGGCCATGATCCCGATGTCGATGACCTTGACCAT7gyrAGACGTTGTTGTTCCGGTTCATGAACGTAATAGCGGATCAGCTGG8rpsLGTGATCGACGACATCATCACGACCTTCTGTGCCACAGAAGTCTT9katGCACTAAATCGTTGTCCGGCAACCAAGGCCTGGTACAAGCTGAT10furAATCCGCTCATAGATCGGATCCACATCGGAACATACGAAGGCTGA11rplCGAGTCAAGGGTGTGTGTTGTCAGATGACCACCAGCACCTGTTTA12rpoBCTGCGCTATTGTTGGACGTTGACGTCCATGTAGTCCACCTCA13ubiATCGACACGTAGATCATGCCTTGCCAAGTCAACTGAGCTTTCCGT14pncAGCCTAAAGTCATTGTGGCAGTGATGGTTGAAGAGCTACTGTCGG15rrsTCTATGGATGACCGAACCTGGTGGTTTCCCCATTCGGAAATCCT16rrlACTAACCACCCAAAACCGGATCCCAACTCAACGCTTATTTCGCC17embBGCTCAATTGCCCAGCTCCTGTGATGCGGAACTTCGGGAT18whiB7CGTTTCGATGATCGCTCTGAACGCAAGCTGGAACAATACGGATC19hsp65TAGTGCGAAATGACCGAGATGGCCAAAGGTTGCCTACACGACT20tlyAATTTATCGACGACGGGCTATCCTCGTGAAACCG...

【专利技术属性】
技术研发人员：项光新，郑晓群，唐晨，徐峰，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：