本发明专利技术涉及一种免疫测定试剂盒的使用方法及其检测系统，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：将含待测靶分子的待测样本分别加入到容器1和容器2中，然后在容器1中加入α剂量的试剂1和试剂2，在容器2中加入β剂量的试剂1和试剂2，以对所述待测样本进行两个平行的免疫反应检测；其中容器1中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值与容器2中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值不同。本发明专利技术所述试剂盒的使用方法能够直接测得高达106ng/ml水平的高值样本浓度。度。度。
【技术实现步骤摘要】
一种免疫测定试剂盒的使用方法及其检测系统
[0001]本专利技术属于免疫检测
，具体涉及一种免疫测定试剂盒的使用方法及其检测系统。
技术介绍
[0002]免疫学检测是基于抗原
‑
抗体特异性反应的原理进行的，由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对被测物进行显示或信号的放大，常被用于检测蛋白质、激素等微量生物活性物质。
[0003]光激化学发光法是化学发光分析技术的常用方法之一，可用于研究生物分子间的相互作用，临床上主要用于疾病的检测。该技术整合了高分子微粒技术、有机合成、蛋白质化学及临床检测等相关领域的研究。光激化学发光分析技术的技术原理为:敏化剂在激光照射下能将周围环境中的氧分子激发为单线态氧分子，单线态氧分子能够与相距200nm左右的发光组合物反应，产生一定波长的光信号；当样品中包含待测抗原或抗体时，该抗原抗体的免疫反应能够使包含敏化剂的供体颗粒与包含发光组合物的受体颗粒结合，从而产生特定波长的光信号，检测该光信号即可检测待测抗原或抗体的含量。
[0004]在抗原
‑
抗体的剂量反应曲线中，当抗体量固定时，反应信号会随着抗原量的增加呈现出先上升后下降的现象。将反应信号随抗原剂量增加而上升的区域称为“前带”区域，反应信号随抗原剂量增加而下降的区域称为“后带”区域，前带与后带之间衔接的区域称为“等价带”。
[0005]在免疫反应中，随着抗原与抗体的比例上升其反应性呈现出先上升后下降现象，被称为“钩状效应”或“HOOK效应”。在临床上，钩状效应会导致高值样本产生错误的阴性结果，也就是“假阴性”。
[0006]目前的免疫检测方法通常是利用剂量
‑
反应曲线的前带区域，通过待测物含量与反应信号的线性关系计算待测物的浓度。而这种检测方法有诸多缺陷，例如：
[0007]检测范围狭窄：传统的免疫检测试剂只能利用剂量反应曲线的前带区段进行检测，检测浓度范围狭窄。超出检测范围的样本需要经过稀释后检测，操作复杂、耗时长、对稀释的精度要求高；
[0008]HOOK效应：传统的免疫检测试剂因为缺少识别HOOK效应的手段，常需要临床医师结合患者临床表现采用稀释血清样本的方法来鉴别样本是否存在HOOK效应，其操作复杂、耗时长，易造成漏检。
技术实现思路
[0009]针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的在于提供免疫测定试剂盒的使用方法及其检测系统。本专利技术所述免疫测定试剂盒的使用方法能够简便、快捷、精确地计算出待测物浓度，本专利技术所述检测系统能够实施本专利技术所述的试剂盒的使用方法。
[0010]为了实现上述目的及其他相关目的，本专利技术采用如下的技术方案：
[0011]本专利技术第一方面提供了一种免疫测定试剂盒的使用方法，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包含第一抗体(或抗原)包被的发光微粒，所述试剂2包含标记物标记的第二抗体(或抗原)；所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：
[0012]将含待测靶分子的待测样本分别加入到容器1和容器2中，然后在容器1中加入α剂量的试剂1和试剂2，在容器2中加入β剂量的试剂1和试剂2，以对所述待测样本进行两个平行的免疫反应检测；其中容器1中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值与容器2中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值不同。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，通过下述方式中的任意一种实现容器1中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值与容器2中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值不同：
[0014]方式1：容器1和容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量相同，且α不等于β；
[0015]方式2：容器1中加入的含待测靶分子的待测样本的量与容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量不同，且α等于β；
[0016]方式3：容器1中加入的含待测靶分子的待测样本的量与容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量不同，且α不等于β。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述方法还包括如下步骤：
[0018]激发和记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为第一测值和第二测值，并计算第一测值/第二测值的比值；其中所述第一测值来源于容器1，所述第二测值来源于容器2，且两个平行的免疫反应检测中第一测值对应的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值大于第二测值对应的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述方法还包括如下步骤：
[0020]A1，对待测靶分子含量已知的一系列不同浓度标准物质进行检测，其中对每个标准物质均进行两个平行的免疫反应检测，激发和记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为测值a和测值a
’
，且所述测值a与所述待测样本的第一测值的检测方式相同，所述测值a
’
与所述待测样本的第二测值的检测方式相同；
[0021]A2，计算测值a/测值a
’
的比值；
[0022]A3，做测值a/测值a
’
的比值与标准物质浓度的相关性标准曲线，并存储。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述方法还包括如下步骤：
[0024]调取存储的所述相关性标准曲线，将含待测靶分子的待测样本的第一测值/第二测值的比值代入标准曲线进行计算，来确定样本的浓度。
[0025]在本专利技术的一些实施方式中，所述方法还包括如下步骤：
[0026]B1，对待测靶分子含量已知的一系列不同浓度标准物质进行检测，其中对每个标准物质均进行两个平行的免疫反应检测，激发和记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为测值b和测值b
’
，且所述测值b与所述待测样本的第一测值的检测方式相同，所述测值b
’
与所述待测样本的第二测值的检测方式相同；
[0027]B2，做测值b与标准物质浓度的反应曲线A，并存储；
[0028]B3，做测值b
’
与标准物质浓度的反应曲线B，并存储；
[0029]B4，在反应曲线A的前带区域与反应曲线B的后带区域所对应的标准物质浓度重叠的部分中取一点，将该点对应的测值b/测值b
’
的比值记为临界点c，并存储。
[0030]在本专利技术的一些实施方式中，所述方法还包括如下步骤：
[0031]调取存储的所述反应曲线A、反应曲线B和临界点，对测样本的第一测值/第二测值的比值与临界点c的大小进行判断；当待测样本的第一测值/第二测值的比值≤临界点c时，使用反应曲线A的前带区域计算待测样本中待测靶分子的浓度；当待测样本的第一测值/第二测值的比值＞临界点c时，使用反应曲线B的后带区域计算待测样本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种免疫测定试剂盒的使用方法，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包含第一抗体(或抗原)包被的发光微粒，所述试剂2包含标记物标记的第二抗体(或抗原)；所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：将含待测靶分子的待测样本分别加入到容器1和容器2中，然后在容器1中加入α剂量的试剂1和试剂2，在容器2中加入β剂量的试剂1和试剂2，以对所述待测样本进行两个平行的免疫反应检测；其中容器1中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值与容器2中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值不同。2.根据权利要求1所述的使用方法，其特征在于，通过下述方式中的任意一种实现容器1中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值与容器2中所加试剂中的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值不同：方式1：容器1和容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量相同，且α不等于β；方式2：容器1中加入的含待测靶分子的待测样本的量与容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量不同，且α等于β；方式3：容器1中加入的含待测靶分子的待测样本的量与容器2中加入的含待测靶分子的待测样本的量不同，且α不等于β。3.根据权利要求1或2所述的使用方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：激发和记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为第一测值和第二测值，并计算第一测值/第二测值的比值；其中所述第一测值来源于容器1，所述第二测值来源于容器2，且两个平行的免疫反应检测中第一测值对应的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值大于第二测值对应的第一抗体(或抗原)和第二抗体(或抗原)的含量之和/待测靶分子的含量的比值。4.根据权利要求3所述的使用方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：A1，对待测靶分子含量已知的一系列不同浓度标准物质进行检测，其中对每个标准物质均进行两个平行的免疫反应检测，激发和记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为测值a和测值a
’
，且所述测值a与所述待测样本的第一测值的检测方式相同，所述测值a
’
与所述待测样本的第二测值的检测方式相同；A2，计算测值a/测值a
’
的比值；A3，做测值a/测值a
’
的比值与标准物质浓度的相关性标准曲线，并存储。5.根据权利要求4所述的使用方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：调取存储的所述相关性标准曲线，将含待测靶分子的待测样本的第一测值/第二测值的比值代入...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩双亭，张黎明，李临，
申请(专利权)人：科美博阳诊断技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。