Claudin6-mCherry报告基因CHO-K1稳转细胞株制备及应用制造技术

本申请公开了Claudin6

【技术实现步骤摘要】
Claudin6
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mCherry报告基因CHO
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K1稳转细胞株制备及应用


[0001]本申请涉及生物医药
，尤其涉及Claudin6
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mCherry报告基因CHO
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K1稳转细胞株制备及应用。

技术介绍

[0002]Claudins(CLDNs)蛋白家族最早是在1998年被发现的，由Furuse Mikio等人从鸡肝中克隆得到并为之命名。该家族蛋白是紧密连接(Tight junctions，TJs)的重要组成成分，在哺乳动物中，迄今为止发现了27个Claudins成员，大量研究已证实，Claudins家族是TJs必不可少的骨架蛋白，在维持上皮和内皮细胞中的细胞极性、细胞间的粘附固定、细胞旁路的离子运输等方面发挥重要作用。
[0003]Claudin6(UniProt ID：P56747)的分子量为23kDa，有四个跨膜结构域，两个胞外域和一个胞内域，胞内域含有一个PDZ结合区，可以募集具有PDZ结构域的蛋白AF
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6，AF
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种融合基因，其包括Claudin6基因的序列、mCherry基因的序列、HIS标签序列以及连接Claudin6基因和mCherry基因的linker，所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.一种重组质粒，其包括权利要求1所述融合基因，其中，构建所述重组质粒包括将Claudin6基因的序列和mCherry基因的序列使用linker进行连接融合，同时添加HIS标签的步骤；所述重组质粒全长DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。3.一种融合蛋白，其通过权利要求1所述融合基因或权利要求2所述重组质粒表达获得；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。4.一种慢病毒载体，其包括权利要求2所述重组质粒。5.根据权利要求4所述的慢病毒载体，其构建过程包括以下步骤：将三种包装质粒pL1、pL2、pL3和权利要求2所述重组质粒按照2:1:1:2的质量比进行混合，获得混合质粒；将混合质粒用无血清培养基溶解，将混有PEI的溶液逐滴加入到混合质粒的溶液中，获得混合液；将上述混合液加入到24孔板中，进行培...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄阳，岳涵，程昊，陈嘉琛，
申请(专利权)人：优睿赛思武汉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：