婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒及筛选方法技术

本发明专利技术公开了一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒，是由以下各组分组成：试剂盒主体A：固定液，多聚甲醛溶液；检测试剂B：染色液，苏丹黑染液；辅助试剂C：麻醉剂，三卡因溶液；辅助试剂D：PBST溶液，现配现用；辅助试剂E：脱色液，4℃储存。本发明专利技术能够实现婴童日用化学品炎症舒缓功效的快速识别，较目前常用的检测方法可降低试剂干扰引起的假阳性，对于炎症舒缓功效筛选的专一性更好，具有普遍的适用性特点，可应用于功效原料筛选和产品功效评价环节。价环节。价环节。

【技术实现步骤摘要】
婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒及筛选方法


[0001]本专利技术属于日用化学品炎症舒缓功效筛选的
，具体涉及一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒及筛选方法。

技术介绍

[0002]市场上许多婴童化妆品宣称具有炎症舒缓功效，目前对于炎症舒缓功效的筛选主要包括体外实验和在体试验。
[0003]体外实验方法包括物理化学法、生物化学法、细胞生物学法、三维重组皮肤模型替代法等。物理化学法是通过检测化妆品的物理性能和特定化学成分含量来评价其效果的便捷手段，目前在化妆品炎症舒缓功效评价方面多为特定功效成分的定性定量检测。生物化学法是借助光谱分析、电子显微镜以及其他物理、化学技术手段，对影响功效的特征指标(如自由基)、重要生物分子(如蛋白质等)含量进行测试分析的一种方法。在抗炎抗敏的功效评价中常用的生物化学实验有透明质酸酶抑制实验及自由基清除实验等，也有部分研究人员使用红细胞溶血试验。细胞生物学是研究细胞结构、功能及其生命规律的一门科学。细胞生物学法通过建立细胞模型，在体外模拟人体生理环境来培养细胞，测量细胞接触受试物前后的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒，其特征在于，是由以下各组分组成：试剂盒主体A：固定液，多聚甲醛溶液，用于斑马鱼幼鱼固定，4℃储存；检测试剂B：染色液，苏丹黑染液，用于中性粒细胞染色，4℃储存；辅助试剂C：麻醉剂，三卡因溶液，用于麻醉斑马鱼幼鱼，4℃储存；辅助试剂D：PBST溶液，现配现用；辅助试剂E：脱色液，4℃储存。2.根据权利要求1所述的婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒主体A是浓度为1％～2％的多聚甲醛溶液；所述检测试剂B是浓度为8～10％的苏丹黑染液；所述辅助试剂C是浓度为0.1～0.2g/mL的三卡因溶液；所述辅助试剂D是浓度为0.1％的PBST溶液；所述辅助试剂E是浓度为2～4％的脱色液。3.一种婴童日用化学品炎症舒缓功效的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：方法一：构建转基因型斑马鱼刺激模型，将发育至7～9小时的转基因斑马鱼暴露于含有婴童化妆品的胚胎培养液中，分别设置对照组、模型组和待测样品组；各组置于恒温光控的条件下培养，各组处理相同暴露时间72小时后，对转基因斑马鱼在荧光显微镜下观察，并统计红色中性粒细胞数量，收集观察后的转基因斑马鱼幼鱼，进行RNA提取，随后进行反转录反应以及荧光定量PCR，检测炎症因子il1b和il10转录水平筛选婴童日用化学品炎症舒缓功效；或，方法二：构建野生型斑马鱼刺激模型，以发育至三天的野生型斑马鱼幼鱼为受试对象，分别设置对照组、野生型模型组和待测样品组；各组置于恒温光控的条件下培养，待暴露至相同时间2天后，去除对照组、野生型模型组和待测样品组中的胚胎培养液，使用权利要求1或2所述的试剂盒，加入试剂盒主体A固定液进行固定；除去固定液，用辅助试剂D PBST溶液清洗鱼胚胎；然后用50％乙醇处理；将乙醇溶液除去，用辅助试剂E脱色液进行脱色处理；除去辅助试剂E，用检测试剂B染色液染色；将检测试剂B染色液除去，用70％乙醇溶液清洗；观察对照组、野生型模型组和待测样品组中斑马鱼幼鱼尾部中性粒细胞数量。4.根据权利要求3所述的婴童日用化学品炎症舒缓功效的筛选方法，其特征在于，所述方法一中设置对照组：以发育至7～9小时的转基因斑马鱼胚胎为受试对象，加入胚胎培养液；所述方法一中设置模型组：以发育至7～9小时的转基因斑马鱼胚胎为受试对象，加入浓度为0.1～0.5％的2,4
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二硝基氟苯诱导斑马鱼幼鱼产生炎症刺激；所述方法一中设...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆槿，李振辉，张阳，鲁剑，蒋旭峰，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：