一种表达沉默PD-L1基因的E1A/E1B双突变溶瘤腺病毒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种表达沉默PD

【技术实现步骤摘要】
一种表达沉默PD
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L1基因的E1A/E1B双突变溶瘤腺病毒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，特别涉及一种表达沉默PD
‑
L1基因的E1A/E1B双突变溶瘤腺病毒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]癌症的发病率逐年上升，早期癌有治愈可能，然而中晚期癌即使采用手术，放化疗，分子靶向药物及免疫治疗仍然无法治愈，需要开发新的治疗方法。
[0003]溶瘤腺病毒可以选择性地在肿瘤细胞内复制并破坏肿瘤而正常细胞不受影响，被认为是一种新型的抗肿瘤药物。其具有肿瘤选择性复制的理论基础是：腺病毒的复制需要细胞周期进入S期，腺病毒感染细胞后，其早期蛋白E1A与宿主细胞的 RB蛋白结合，激活E2F转录因子，迫使细胞周期进入S期，从而为腺病毒的复制提供了良好的环境。但是随着E2F的激活，p53也被激活。P53蛋白使细胞周期阻止在G1期或诱导细胞凋亡，从而限制了病毒的复制。然而腺病毒的E1B55KD蛋白可以结合并使p53蛋白失活，最终使细胞周期进入S期，从而使腺病毒能够在宿主细胞内复制。因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达沉默PD
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L1基因的E1A/E1B双突变溶瘤腺病毒，其特征在于：所述腺病毒的E1A与RB结合位点两个氨基酸替换突变、E1B55KD缺失、纤毛部分链接RGD、E1A启动子插入CD274的shRNA。2.一种权利要求1所述表达沉默PD
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L1基因的E1A/E1B双突变溶瘤腺病毒的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.构建pXC3E1A/E1B
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shCD274质粒：a.构建靶向人CD274145
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165位的CD274短发夹RNA；b.进行E1A(L122S/C124G)突变，并删除E1B
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55KD；c.合成U6
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shCD274
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E1A启动子
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E1A(L122S/C124G)
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E1B...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华，蔡志坚，徐一鹏，
申请(专利权)人：王华，
类型：发明
国别省市：