一种自金丝楸中4,9-二羟基-α-拉帕醌的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种自金丝楸中4,9

【技术实现步骤摘要】
一种自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法


[0001]本专利技术涉及化学工程和天然药物领域，尤其涉及一种金丝楸中4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备工艺。

技术介绍

[0002]楸树（Catalpa bungei）系紫葳科（Bignoniaceae）梓属（Catalpa）植物，是我国重要的乡土树种，是特有的珍贵用材和观赏树种，其栽培历史悠久，素有“木王”的美誉。在我国，东起东海岸，西到甘肃兰州、天水和四川汉源，北起山海关，南到云南临沧和广东广州均有楸树分布，地跨温带草原区、暖温带落叶阔叶林区和亚热带常绿阔叶林区3个植被区。
[0003]楸树的用途广泛，除了用作园林绿化、板材制造外，《中国中药资源志要》中还介绍了楸树的医药用途：其根皮、树皮（楸木皮），苦，凉。清热解毒，散淤消肿。用于跌打损伤，骨折，痈疮肿毒，痔瘘，吐逆，咳嗽。其叶（楸叶），苦，凉。消肿拔毒，排脓生肌。用于肿疬，瘰疬。其花，苦，凉。解毒，止痛，生肌。其果实、种子，苦、凉。清热利尿。用于小便淋痛，石淋，热毒，疥疮。
[0004]近10年，我国学者在楸树繁育技术、种植资源研究、生长发育研究、栽培及造林技术、病虫害研究、遗传育种、品种选育与应用等多个领域具有相当数量的文献报道，而对其化学成分及生物活性鲜有报道。对楸树的研究也多集中于花、叶、果实、种子等，对其心材的相关研究几乎没有，特别是对其化学组分、药用活性及其相关机制的研究，少有报道。金丝楸（Catalpa bungei“Jinsi”） 是楸树树组中重要成员，虽然有文献（Fitoterapia, 2022, 160, 105196）报道该种属植物中含有抗肿瘤活性物质萘醌类化合物，其中4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌及其手性成分均有显著抑制人乳腺癌细胞株MCF
‑
7增殖活性（IC
50
= 2.19 μM），与临床药物β
‑
拉帕醌活性相当，但提取与制备方法繁琐，需要经过多级柱层析和半制液相纯化，整体收率低（0.24%），不利于规模化制备。
[0005]萘醌类化合物的抗肿瘤活性长期以来备受国内外学者关注，如紫草素类、胡桃醌、沙尔威辛以及β
‑
拉帕醌等明星化合物，有的甚至走向临床前研究。其抗肿瘤作用的机理除了早期报道的对肿瘤细胞的烷基化作用外，它们还可干扰肿瘤生长所必需的多种酶系统，如拓扑异构酶、端粒酶、半胱天冬蛋白酶、蛋白络氨酸磷酸化酶等，诱导细胞凋亡，且对不同酶系统表现出不同的选择性。
[0006]因此，本专利技术以金丝楸为材料，提供了一种来源于心材的化学成分4,9
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二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法，收率高、步骤简单，易于工业化生产。该方法为我国金丝楸及其他楸树组成员开发、保护和育种提供新的思路，扩大天然产物来源抗肿瘤先导药物研究途径。

技术实现思路

[0007]本专利技术为了解决上述
技术介绍
中未有明确的方法来提取制备金丝楸中的4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌，提供了一种金丝楸中4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备工艺。
[0008]本专利技术提供了一种金丝楸4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备工艺，包括以下步骤：
（1）将金丝楸心材粉碎后置于数倍其质量的二氯甲烷溶剂中冷浸后过滤得提取液，经减压蒸馏得到金丝楸浸膏。
[0009]（2）取200
‑
300目的硅胶，选择性与石油醚混合，然后装入层析柱中。
[0010]（3）取步骤（1）中的浸膏，用二氯甲烷溶解，采用数倍浸膏质量的硅胶拌样后干法上样（或者与同等体积石油醚混合后湿法上样），上样完成后以石油醚：乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，利用 TLC 薄层色谱跟踪检测，根据 R
f
值和颜色进行分段，合并 R
f
值和颜色相同的部分，减压浓缩，干燥，得红色晶体，经检测为4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌。
[0011]步骤（1）中浸渍温度为常温，浸渍时间为70
‑
74 h。
[0012]步骤（3）中石油醚与乙酸乙酯的体积比为10
‑
15：1。
[0013]所述的R
f
值为0.16，展开剂为石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（v/v, 10:1）。
[0014]所制备的4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌经AQ
‑
C18高效液相色谱检测纯度为99%以上。
[0015]AQ
‑
C18高效液相色谱分析条件：色谱柱为AQ
‑
C18柱4.6
ꢀ×
250 mm， 5 μm；流动相为甲醇（A相）—水（B相）（梯度：0~20min，10%~100%甲醇；20~30 min，100%甲醇；30~35 min，100%~10%甲醇）；流速为1.0 mL/min；进样量为10 μL；检测波长为254 nm；柱温为30℃。
[0016]根据所述方法制备得到的4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌，4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌包括(4R)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌和(4S)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌，其中(4R)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌和(4S)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的质量比为50
‑
60:40
‑
50。
[0017]进一步优选方案中，(4R)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌和(4S)
‑
4,9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的质量比为60:40。
[0018]手性IA高效液相色谱分析条件：手性半制备柱为CHIRALPAK
®ꢀ
IA柱10 mm
ꢀ×ꢀ
250 mm，5 μm；以95％正己烷为流动相A，乙醇为流动相B，以A：B=5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将金丝楸心材粉碎后置于二氯甲烷溶剂中冷浸，浸渍后的提取液经减压蒸馏得到金丝楸浸膏；（2）将步骤（1）得到的金丝楸浸膏上样硅胶层析柱后经石油醚与乙酸乙酯的混合物洗脱，得到的晶体产物即为4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌。2.根据权利要求1所述的自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法，其特征在于，步骤（1）中浸渍温度为常温，浸渍时间为70
‑
74 h。3.根据权利要求1所述的自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法，其特征在于，步骤（2）中石油醚与乙酸乙酯的体积比为10
‑
15：1。4.根据权利要求1所述的自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌的制备方法，其特征在于，步骤（2）的洗脱过程根据 Rf 值和颜色进行分段，合并 Rf 值和颜色相同的部分，减压浓缩，干燥，得到的红色晶体即为4, 9
‑
二羟基
‑
α
‑
拉帕醌。5.根据权利要求4所述的自金丝楸中4, 9
‑
二羟基
‑
α
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拉帕醌的制备方法，其特征在于，所述的Rf 值...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓张双，李文丹，刘珊，王军辉，杜姝，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：