【技术实现步骤摘要】
一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备及在快速检测和高效杀灭金黄色葡萄球菌中的应用
[0001]本专利技术属于食品安全免疫检测和光催化杀菌的
,具体涉及一种基于聚集诱导发光材料的快速检测及高效杀灭金黄色葡萄球菌的方法。
技术介绍
[0002]金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病菌,在自然界中广泛存在。金黄色葡萄球菌污染的食品不仅会造成食品资源的浪费,还会引起许多食品安全事件。细菌感染的迅速增加需要方便和经济有效的检测策略。
[0003]目前,已有多种细菌检测策略,包括聚合酶链式反应、平板培养、磁共振、质谱、电化学、表面增强拉曼散射。其中,荧光免疫分析法是细菌检测的有效工具,但是传统的有机或无机荧光材料,由于ACQ效应,它们的荧光发射在聚集状态下会受到影响,部分或完全猝灭,从而极大地限制了它们的实际应用。因此,AIE(聚集诱导发光)材料引起了人们的广泛关注,AIE材料具有低背景辐射的高信噪比、高灵敏度、抗漂白能力强等优点,克服了传统荧光材料的缺点。
[0004]最近,抗菌光动力疗法(aPDT),利用光敏剂产生 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法,其特征在于该制备方法具体是按以下步骤完成的:一、将1,1,2,2
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四(4
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羧基苯)乙烯和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000溶解在四氢呋喃中,再加入去离子水,得到混合溶液Ⅲ;将混合溶液Ⅲ进行超声,然后在黑暗的通风橱中进行搅拌,去除四氢呋喃,再离心,使用去离子水对离心得到的固体产物进行清洗,再冷冻干燥,得到AIE纳米颗粒;将AIE纳米颗粒分散到去离子水中,得到AIE纳米颗粒溶液,并于4℃储存;二、将含有EDC和NHS的生理盐水与AIE纳米颗粒溶液混合,再在室温下孵育,孵育后再使用生理盐水洗涤,得到EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒;将EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒重悬到生理盐水中,加入3
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氨基苯硼酸,得到混合溶液Ⅳ;将混合溶液Ⅳ在室温下搅拌,最后使用生理盐水洗涤,去除3
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氨基苯硼酸,得到APBA
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AIE NPs,即为硼酸修饰的AIE纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法,其特征在于步骤一中所述的AIE纳米颗粒溶液中AIE纳米颗粒的浓度为1mg/mL;步骤一中所述的混合溶液Ⅲ中1,1,2,2
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四(4
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羧基苯)乙烯、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000、四氢呋喃与去离子水的质量体积比为0.5g:1g:1mL:9mL;步骤一中所述的超声为使用微尖探头超声波粉碎机超声处理20min~30min,所述的微尖探头超声波粉碎机的输出功率为180W;步骤一中在黑暗的通风橱中进行搅拌,搅拌的速度为500r/min~600r/min,搅拌的时间为10h~12h,去除四氢呋喃,再离心,使用去离子水对离心得到的固体产物进行清洗3次~5次,再在
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50℃下冷冻干燥10h,得到AIE NPs,即为AIE纳米颗粒。3.根据权利要求1所述的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法,其特征在于步骤二中所述的含有EDC和NHS的生理盐水中EDC的浓度为2mg/mL,NHS的浓度为2mg/mL;步骤二中所述的含有EDC和NHS的生理盐水与AIE纳米颗粒溶液的体积比为1:1;步骤二中所述的混合溶液Ⅳ中EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒、3
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氨基苯硼酸与生理盐水的质量体积比为1mg:2mg:1mL;步骤二中将混合溶液Ⅳ在室温下搅拌30min,最后使用生理盐水洗涤3次~5次,去除3
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氨基苯硼酸,得到APBA
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AIE NPs,即为硼酸修饰的AIE纳米颗粒。4.根据权利要求1所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用,其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒在快速检测金黄色葡萄球菌中应用。5.根据权利要求4所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用,其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒快速检测金黄色葡萄球菌是按以下步骤完成的:将含有金黄色葡萄球菌溶液与免疫球蛋白功能化Fe3O4溶液混合均匀,得到反应体系Ⅰ;将反应体系Ⅰ在37℃下孵育30min~120min,然后磁选分离,得到反应液;向反应液中加入硼酸修饰的AIE纳米颗粒,得到反应体系Ⅱ;将反应体系Ⅱ在37℃下孵育30min,再磁选分离,得到待检测溶液;使用荧光分光光度计分别检测待检测溶液和不含金黄色葡萄球菌的空白溶液的荧光强度,如果待检测溶液的荧光强度低于不含金黄色葡萄球菌的空白溶液的荧光强度,说明待检测溶液中含有金黄色葡萄球菌;所述的反应体系Ⅰ中金黄色葡萄球菌的浓度为10~106CFU/mL,免疫球蛋白功能化Fe3O4的浓度为400μg/mL;所述的反应体系Ⅱ中硼酸修饰的AIE纳米颗粒的浓度为200μg/mL。6.根据权利要求1所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用,其特征
在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒在高效杀灭金黄色葡萄球菌中应用。7.根据权利要求6所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用,其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒高效杀灭金黄色葡萄球菌是按以下步骤完成的:将免疫球...
【专利技术属性】
技术研发人员:汪蓉,张雅婕,陈芮,张祖旺,姚乐楠,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:
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