产1-脱氧野尻霉素的桑树内生菌、其分离纯化方法及应用技术

本发明专利技术属于发酵工程技术领域，公开了一种产1

【技术实现步骤摘要】
产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌、其分离纯化方法及应用


[0001]本专利技术属于微生物利用
，涉及一种扎氏甲基杆菌，具体地说是一种产1
‑
脱氧野尻霉素的桑树内生菌、其分离纯化方法及应用。

技术介绍

[0002]桑树是中国乃至世界范围广泛种植的重要树种，在农业、纺织、园林景观等各个方面都发挥着重要的作用。桑树属药食同源植物，桑枝、桑叶和果实均富含多糖、生物碱等生物活性成分，极具研究价值。
[0003]研究发现，桑树是1
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脱氧野尻霉素(1
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deoxynojirimycin,DNJ)含量最高的植物，DNJ为哌啶类多羟基生物碱，化学名称是3,4,5
‑
三羟基
‑2‑
羟甲基四氢吡啶，作为一种有效的α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂，具有显著的降血糖作用。近年来，随着生活水平的提高，糖尿病患者数量急剧增加，造成降糖物质的需求量也逐年增加，增加DNJ等降血糖药物上游原料的产量是很有必要的。
[0004]申请号为202010269030.8的中国专利技术专利申请公开了一种高纯度1
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脱氧野尻霉素的制备方法，该方法直接从桑叶提取DNJ，是通过铵型阳离子交换树脂富集DNJ，这种方法受桑叶中DNJ含量限制，所获得DNJ的产量有限，且操作步骤繁琐、生产周期长。随着发酵工程技术的进步，寻找到能够高产DNJ的菌株，通过发酵罐高效生产DNJ成为解决DNJ产量问题的关键方案。
专利技术内容
[0005]本专利技术的目的，是要提供一种产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌、其分离纯化方法及应用，该菌株是通过简便的分离纯化方法分离自桑树内生菌，应用于发酵工程从而达到快速、高产DNJ的目的；发酵工程所得发酵液经提取纯化后，达到用于生产具有降糖功能产品的目的。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
[0007]一种产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌，该菌株为扎氏甲基杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2022年8月29日，保藏编号是CGMCC No.25606，拉丁文名称为Methylobacterium sp.，进一步鉴定为Methylobacterium zatmanii。
[0008]作为本专利技术的一种限定，产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的16S rDNA序列全长为1438bp，具体序列如SEQ ID NO.1所示，为：
[0009]CCTGGCTCAGAGCGAACGCTGGCGGCAGGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGCACCTTCGGGTGTCAGTGGCAGACGGGTGAGTAACACGTGGGAACGTACCCTTCGGTTCGGAATAACTCAGGGAAACTTGAGCTAATACCGGATACGCCCTTTTGGGGAAAGGTTTACTGCCGAAGGATCGGCCCGCGTCTGATTAGCTTGTTGGTGGGGTAACGGCCTACCAAGGCGACGATCAGTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCTTAGG
GTTGTAAAGCTCTTTTGTCCGGGACGATAATGACGGTACCGGAAGAATAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCTAGCGTTGCTCGGAATCACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGCCGATTAAGTCGGGGGTGAAAGCCTGTGGCTCAACCACAGAATTGCCTTCGATACTGGTTGGCTTGAGACCGGAAGAGGACAGCGGAACTGCGAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTCGCAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCCGGTTCTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAATGCCAGCCGTTGGCCTGCTTGCAGGTCAGTGGCGCCGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCATCCCTTGACATGGCATGTTACCTCGAGAGATCGGGGATCCTCTTCGGAGGCGTGCACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCACGTCCTTAGTTGCCATCATTCAGTTGGGCACTCTAGGGAGACTGCCGGTGATAAGCCGCGAGGAAGGTGTGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGGGATGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGGTGACAGTGGGACGCGAAGCCGCGAGGTGGAGCAAATCCCCAAAAACCGTCTCAGTTCGGATTGCACTCTGCAACTCGGGTGCATGAAGGCGGAATCGCTAGTAATCGTGGATCAGCACGCCACGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTTGGTCTTACCCGACGGCGCTGCGCCAACCGCAAGGAGGCAGGCGACCACGGTAGGGTCAGCGACTGGGGTGAAGTCGTAACAAAGGTAACC
[0010]本专利技术还提供了产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的一种分离纯化方法，它是取桑叶清洗，干燥，消毒后，贴于固体培养基表面，经28℃培养72h，采用平板划线法对菌落进行分离纯化。
[0011]作为一种限定，所述固体培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
[0012]本专利技术还提供了上述产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的一种应用，它是将所述产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌接种于改良发酵培养基中，在温度为24
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32℃，且转速为130
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170r/min的条件下发酵，制得含1
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脱氧野尻霉素的发酵液。
[0013]作为本专利技术的一种限定，所述发酵的时间为60
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78h。
[0014]作为本专利技术的另一种限定，制成所述改良发酵培养基的有效成分的原料本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌，其特征在于，该菌株为扎氏甲基杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2022年8月29日，保藏编号是CGMCC No. 25606，拉丁文名称为Methylobacterium sp.。2.根据权利要求1所述的产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌，其特征在于，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。3.一种权利要求1所述的产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的分离纯化方法，其特征在于，取桑叶清洗，干燥，消毒后，贴于固体培养基表面，经28℃培养72h，采用平板划线法对菌落进行分离纯化。4.根据权利要求3所述的产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的分离纯化方法，其特征在于，所述固体培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基。5.一种产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌的应用，其特征在于，它是将权利要求1
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3中任一项所述产1
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脱氧野尻霉素的桑树内生菌接种于改良发酵培养基中，在温度为24
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32℃，且转速为130
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【专利技术属性】
技术研发人员：韩俊华，孙雨婷，张锦锦，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：