【技术实现步骤摘要】
检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于重金属离子快速检测
，具体涉及一种检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用，即利用时间分辨荧光免疫层析试纸条快速检测食品中的镉离子。
技术介绍
[0002]镉是一种常见的重金属，通常以镉离子的形式存在。受工业发展、农业活动、化石燃料燃烧等人为活动的影响，排放至环境中的重金属可进一步随大气、土壤、水源等进入生物圈循环。由于茶树适宜在酸性土壤中生长，种植茶树的土壤一旦被重金属污染，其酸性环境更有利于重金属向有效态转化，增大茶树根部对重金属的吸收，导致重金属易于从土壤向茶叶中迁移。茶叶中的镉离子污染不仅会导致茶叶产量和品质下降，还会通过直接接触或食物链富集等途径危及人类健康。研究表明，重金属可引起肺、肾脏、肝脏、血液、胃肠道、骨骼等器官损伤，从而诱发肝毒性、肾毒性、致癌性、致畸性、生殖毒性等。受重金属污染的茶叶不仅削弱茶产区的竞争力，也对茶叶的进出口市场产生一定的影响。传统的重金属检测技术包括原子吸收光谱法、原子荧...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：(1)、制备铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物；(2)、制备铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物喷涂的结合垫；(3)、将重金属镉抗原包被在T线上，将羊抗鼠二抗包被在C线上，烘干后，与吸水纸、样品垫、所述结合垫粘贴在一起，组装得到检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条。2.根据权利要求1所述的检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物的制备方法包括：将铕时间分辨荧光微球用硼酸盐缓冲液稀释后超声混匀，加入碳二亚胺盐酸盐溶液，活化反应后，离心弃上清，加入羊抗鼠二抗，偶联后加入重金属镉单克隆抗体，偶联，离心弃上清，加入封闭液封闭未结合位点，恒温摇匀反应后，离心弃上清，溶于硼酸盐缓冲液，冷藏备用；和/或，所述硼酸盐缓冲液的浓度为0.01
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0.05mol/L，pH为6
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9；和/或，所述碳二亚胺盐酸盐溶液在反应溶液中的终浓度为0.2
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0.4μg/μL；和/或，所述活化反应的时间为20
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45min，活化反应的温度为30
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40℃；和/或，所述离心的转速为12000
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16000rpm；离心的时间为30
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50min；和/或，所述重金属镉单克隆抗体的制备过程为：将Cd
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ITCBE
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BSA乳化后注射小鼠体内，经多抗血清效价测定、细胞融合、杂交瘤细胞筛选，将杂交瘤细胞注射未免疫小鼠腹腔内以获得小鼠腹水，透析后，得重金属镉单克隆抗体；和/或，所述重金属镉单克隆抗体的加入量为12
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80μg/mL；和/或，所述偶联的时间为30
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45min，偶联的温度为2
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8℃；和/或，所述封闭的时间为30
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45min，封闭的温度为30
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40℃；和/或，所述封闭液为牛血清白蛋白。3.根据权利要求1所述的检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物喷涂的结合垫的制备方法包括：将铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物用4
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羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液稀释，然后将其喷涂在玻璃纤维膜上，干燥后得到铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物喷涂的结合垫；和/或，所述4
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羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液的浓度为0.01
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0.05mol/L，pH为6
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8，其中含有5％的蔗糖、1％的牛血清白蛋白和0.1％的Proclin
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300；和/或，所述铕时间分辨荧光微球
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重金属镉单克隆抗体免疫复合物经4
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羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液稀释的稀释倍数为12
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30倍；和/或，所述喷涂的量为4
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8μL/cm；和/或，所述干燥的温度为30
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50℃，干燥的时间为2
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6h。4.根据权利要求1所述的检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，检测重金属镉离子的时间分辨荧光免疫层析试纸条的组装过
程包括：将重金属镉抗原与吗啉乙磺酸缓冲液混合稀释，羊抗鼠二抗与吗啉乙磺酸缓冲液混合稀释，然后分别划在硝酸纤维素膜的T线和C线上，将该划膜后的硝酸纤维素膜烘干后，...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏新林，韩子，潘怡，陈守慧，魏康，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：
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