一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂的制备方法与应用技术

本发明专利技术提供一种猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂，涉及动物疫苗领域。所述雾化保护剂是含有如下成分的水溶液：3

【技术实现步骤摘要】
一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂的制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及动物疫苗领域，具体涉及一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂的制备方法与应用。

技术介绍

[0002]伪狂犬病(Pseudorabies,PR)，又称奥耶斯基氏病，是由伪狂犬病病毒(Peudorabies virus,PRV)引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病。PRV主要通过口鼻感染，感染后在宿主呼吸道上皮细胞进行增殖。接着，感染扁桃体和肺脏，进而以自由扩散或血液传播等途径在体内扩散。另外，PRV可以进入三叉神经和嗅神经末梢，以侵入宿主中枢神经系统，最终导致以非化脓性脑膜炎为特征的中枢神经系统紊乱。目前，伪狂犬病已在全球50多个国家和地区报道流行。疫苗免疫是预防该病发生的主要方法。市售猪伪狂犬病疫苗主要分为活疫苗和灭活疫苗。活疫苗免疫采用肌肉注射或者滴鼻免疫的免疫方式，灭活疫苗采用肌肉注射的免疫方式。猪伪狂犬病灭活疫苗因其良好的生物安全性和在PR净化过程中发挥的作用为部分养殖场所青睐，但是与活疫苗相比，其存在免疫效果差的弊端。加上活疫苗的滴鼻免疫在一定程度上可以模拟自然感染。因此，在伪狂犬病的防控过程中，养殖场还是会优先选择经典的减毒活疫苗。
[0003]随着养殖规模的不断扩大，传统的人工逐头免疫的疫苗接种方式弊端突显，如劳动力成本巨大，频繁动猪以及针头的使用带来的动物应激与疾病传播的风险，不利于疫病的有效防控与养猪业的健康发展。气溶胶免疫因具备可大幅降低人工成本、可解决疫苗接种与交叉感染的矛盾、可显著减少动物应激以及可显著激活动物黏膜免疫水平等优势，已成为疫苗免疫方式改进方向之一。将猪伪狂犬病活疫苗制成雾化剂型，不仅能提高疫苗接种的方便性，而且大大节省劳动力和劳动时间。气溶胶疫苗颗粒的大小是影响气溶胶免疫成败的首要因素。成功的气溶胶免疫首先要将疫苗抗原颗粒输送到合适的靶组织。雾化颗粒在呼吸道中的沉降位置和沉降效率受其粒径(空气动力学参数)、粒径分布、颗粒形状和密度等因素的影响。由于猪鼻甲骨与气管解剖结构的特殊性，只有空气动力学质量中位粒径(MMAD)为1
‑
10μm的微粒可以进入呼吸道。所以必须将猪伪狂犬病雾化活疫苗的粒径控制在1
‑
10μm内。另外，气溶胶免疫还需保持疫苗抗原的活性，以保证产生有效的免疫应答。雾化保护剂对气溶胶活疫苗颗粒的大小和其中抗原的活性有很大影响。但是现有技术中没有适用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂，该雾化保护剂与现有市售猪伪狂犬病活疫苗混合后进行气溶胶免疫，气溶胶活疫苗的空气动力学质量中位粒径为1
‑
10μm，在空气中滞留30分钟后，仍然具有较高的滴度，且免疫保护率高。
[0005]本专利技术的目的采用如下技术方案实现：
[0006]一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂，是含有如下成分的水溶液：3
‑
24g/L海藻糖、3
‑
24g/L L
‑
精氨酸、3
‑
24g/L脯氨酸、1
‑
10％甘油，pH值7.0
‑
7.8。
[0007]在本专利技术中，所述雾化保护剂，是含有如下成分的水溶液：5
‑
20g/L海藻糖、5
‑
20g/L L
‑
精氨酸、5
‑
20g/L脯氨酸、2
‑
8％甘油，pH值7.0
‑
7.8。
[0008]在本专利技术中，所述雾化保护剂的溶剂是pH值为7.0
‑
7.8的磷酸缓冲液、10
‑
500mM Tris缓冲液或生理盐水。
[0009]在本专利技术中，所述磷酸缓冲液的浓度为0.005
‑
0.5M。
[0010]本专利技术还提供一种采用所述雾化保护剂制备猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的方法。
[0011]在本专利技术中，所述方法是将伪狂犬病活疫苗采用上述雾化保护剂溶解，然后进行雾化。
[0012]有益效果：本专利技术首次寻找到了用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂，该保护剂与现有市售猪伪狂犬病活疫苗混合后进行气溶胶免疫，气溶胶活疫苗的空气动力学质量中位粒径为1
‑
10μm，在空气中滞留30分钟后，仍然具有较高的滴度，且免疫保护率高。将猪伪狂犬病活疫苗通过气雾免疫就能对猪只进行免疫，不仅提供了疫苗免疫的便捷性，更大大节省了劳动力和劳动时间，利于在养殖场规模化推广，并可实现自动化。
具体实施方式
[0013]下面将结合具体实施例，对本专利技术作进一步的说明，而非对本专利技术进行限制。
[0014]本专利技术中生物材料的来源：
[0015]1、本专利技术所涉及的“猪伪狂犬病活疫苗(SA215株)(扑伪优)”购自畜科生物工程有限公司，批准文号：兽药生字221271061。
[0016]2、本专利技术所涉及的“伪狂犬病活疫苗(Bartha
‑
K61株)(伪安清)”购自华派生物工程集团有限公司，批准文号：兽药生字221017018。
[0017]3、本专利技术所涉及的“猪伪狂犬病活疫苗(HB
‑
98株)(科卫宁)”购自武汉科前生物股份有限公司，批准文号：兽药生字170041056。
[0018]4、本专利技术所涉及的伪狂犬病病毒ZJ01株(缩写为PRVZJ01株)公开于Gu Z,Dong J,Wang J,Hou C,Sun H,Yang W,Bai J,Jiang P.Anovel inactivated gE/gI deletedpseudorabies virus(PRV)vaccine completely protects pigs from an emerged variant PRV challenge.Virus Res.2015,195:57
‑
63.
[0019]实施例1猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的制备与检验
[0020]1、雾化保护剂的配制
[0021]雾化保护剂A是含有下列物质的水溶液：10g/L海藻糖、10g/L L
‑
精氨酸、10g/L脯氨酸、5％(体积百分浓度)甘油、8g/LNaCl、0.2g/L KCl、1.44g/LNa2HPO4、0.24g/LKH2PO4，pH值7.4。
[0022]2、制备气溶胶活疫苗
[0023]分别取1瓶猪伪狂犬病活疫苗(SA215株，106TCID
50
/瓶)、伪狂犬病活疫苗(Bartha
‑
K61株，106TCID
50
/瓶)及猪伪狂犬病活疫苗(HB
‑
98株，106TCID
50
/瓶)冻干苗，每瓶加入2mL雾化保护剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于猪伪狂犬病气溶胶活疫苗的雾化保护剂，其特征在于所述雾化保护剂是含有如下成分的水溶液：3
‑
24g/L海藻糖、3
‑
24g/L L
‑
精氨酸、3
‑
24g/L脯氨酸、1
‑
10％甘油，pH值7.0
‑
7.8。2.根据权利要求1所述雾化保护剂，其特征在于所述雾化保护剂是含有如下成分的水溶液：5
‑
20g/L海藻糖、5
‑
20g/L L
‑
精氨酸、5
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：冯志新，郝飞，谢星，张珍珍，白昀，韦艳娜，刘蓓蓓，王丽，熊祺琰，邵国青，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：