一种利用液相色谱串联质谱检测尿液游离皮质醇的方法技术

本申请涉及生物样品检测领域，尤其涉及一种利用液相色谱串联质谱检测尿液游离皮质醇的方法；包括：将定标品溶液和待测尿液样本分别与皮质醇同位素内标工作溶液进行混合，后进行离心，取上清液，分别得到定标品上清液和待测样本上清液；采用液相色谱串联质谱对定标品上清液进行检测，并绘制标准曲线；采用液相色谱串联质谱对待测样本上清液进行检测，并根据所述标准曲线得到待测尿液样本游离皮质醇的含量；其中，皮质醇同位素内标工作溶液的溶质包括皮质醇

【技术实现步骤摘要】
一种利用液相色谱串联质谱检测尿液游离皮质醇的方法


[0001]本申请涉及生物样品检测领域，尤其涉及一种利用液相色谱串联质谱检测尿液游离皮质醇的方法。

技术介绍

[0002]皮质醇是一种类固醇激素，在糖代谢、维持血管张力、免疫调节以及压力应激方面起着关键作用，主要受下丘脑
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垂体的反馈调节。尿游离皮质醇(UFC)是各类肾上腺皮质功能障碍的敏感指标，尤其是皮质醇增多症(库欣综合征)的敏感指标，同时24小时UFC的测定被指南推荐为库欣综合征筛查的一线测试。
[0003]UFC的传统检测方法有放射免疫法、发光免疫法、液相色谱
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紫外检测法，气相色谱
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质谱法，这些方法均存在前处理过程复杂且步骤繁琐的缺点，其中临床常用的放射免疫法和发光免疫法还存在易发生交叉反应，且检测灵敏度有限的问题。近年来，液相色谱串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC
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MS/MS)越来越多的被用于UFC的检测，该方法具有灵敏度高、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用液相色谱串联质谱检测尿液游离皮质醇的方法，其特征在于，所述方法包括：将定标品溶液和待测尿液样本分别与皮质醇同位素内标工作溶液进行混合，后进行离心，取上清液，分别得到定标品上清液和待测样本上清液；采用液相色谱串联质谱对所述定标品上清液进行检测，并绘制标准曲线；采用液相色谱串联质谱对所述待测样本上清液进行检测，并根据所述标准曲线，得到待测尿液样本游离皮质醇的含量；其中，所述皮质醇同位素内标工作溶液包括皮质醇同位素内标溶质和皮质醇同位素内标溶剂；所述皮质醇同位素内标溶质包括皮质醇
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d和/或皮质醇
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13C；所述皮质醇同位素内标溶剂包括甲醇和/或水。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：对离体的尿液样本进行固相萃取至不含皮质醇为止，得到空白尿基质；配制皮质醇的母液，并进行第一稀释，后以空白尿基质进行第二稀释，得到定标品溶液其中，所述定标品溶液的浓度为0.625ng/mL～500ng/mL。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一稀释的稀释溶剂为甲醇和水的混合物，其中，所述甲醇和所述水的体积之比为1:3～3:1。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二稀释包括以逐级稀释的方式进行第二稀释，所述第二稀释的终点溶液浓度为0.625ng/mL～500ng/mL。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测尿液样本的体积和所述皮质醇同位素内标工作溶液的体积之比为1:2～1:6。6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈莹，程黎明，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：