【技术实现步骤摘要】
一种体外构建有序微孔仿生神经导管的方法及应用
[0001]本专利技术属于生物
,尤其是涉及一种体外构建有序微孔仿生神经导管的方法及应用。
技术介绍
[0002]中枢神经损伤和外周神经损伤是严重的创伤,常常造成患者永久性的肢体感觉或运动障碍。全球每年有超70万人罹患脊髓损伤,有超200万人罹患外周神经损伤。尽管医学技术不断的发展,但临床上仍然无有效的方法治疗脊髓损伤及外周神经损伤。对于严重的脊髓损伤及周围神经缺损性疾病,替代治疗及自体神经移植是一种新的方法。但自体神经及自体细胞移植存在来源有限,取材部位存在二次损伤。随着组织工程技术的不断发展,构建用于脊髓损伤及周围神经缺损修复的桥接导管是目前的研究热点。神经导管在一定程度上成为桥接神经缺损的关键支架,导管应当具备一定的神经再生引导作用,应当具备与神经组织相似的结构及活性成分。
[0003]神经组织的结构与其他组织有所不同,轴突被髓鞘和外层的神经内膜包裹形成单个神经纤维,多条神经纤维被神经束膜包裹形成神经束。神经组织的脱细胞结构为有序的微孔结构。因此基于仿生学的原 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种体外构建有序微孔仿生神经导管的方法,其特征在于:包括,制备纤维丝,困扎修剪成束;将纤维丝束置于体外培养环境中,持续或多次间隔向纤维丝束上滴加可分泌细胞外基质的细胞,以纤维丝束为模板形成纤维丝束
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细胞复合物;将纤维丝束
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细胞复合物取出,溶解纤维丝、脱细胞后形成有序微孔仿生神经导管。2.根据权利要求1所述的体外构建有序微孔仿生神经导管的方法,其特征在于:体外培养环境为培养瓶、灌流式生物反应器或微流控器官芯片。3.根据权利要求1所述的体外构建有序微孔仿生神经导管的方法,其特征在于:可分泌细胞外基质的细胞包括各种组织来源的成纤维细胞、各种组织来源的平滑肌细胞、各种组织来源的上皮细胞、各种组织来源的间质细胞、各种组织来源的干细胞、内皮细胞、纤维母细胞、成骨细胞、成骨细胞前体细胞、牙周膜细胞、牙周韧带细胞、滑膜细胞、肌腱细胞、软骨细胞、角质形成细胞、支持细胞、Leydig细胞、肾小球系膜细胞、雪旺细胞、星形胶质细胞、嗅鞘细胞、肿瘤相关成纤维细胞、神经鞘瘤细胞、软骨肉瘤细胞、神经纤维瘤细胞、神经母细胞瘤细胞、神经胶质瘤细胞、神经星形胶质母细胞瘤细胞、神经上皮瘤细胞、黑色素瘤细胞、子宫内膜癌细胞、子宫肌瘤细胞、食道癌细胞、胃癌细胞、肝癌细胞、肺癌细胞、喉癌细胞、胰腺癌细胞、乳腺癌细胞中的一种或多种的组合。4.根据权利要求3所述的体外构建有序微孔仿生神经导管的方法,其特征在于:对可分泌细胞外基质的细胞进行体外扩增,滴加到纤维丝束上,每立方厘米纤维丝束中总滴加细胞量为1
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109;优选地,将粘附有细胞的纤维丝束体外培养14
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72天。5.根据权利要求3所述的体外构建有序微孔仿生神经导管的方法,其特征在于:体外培养环境中的培养基中加入成纤维细胞生长因子(FGF)、层粘连蛋白(Laminin)、纤维连接蛋白、结缔组织生长因子(CTGF)、神经生长因子(NGF)、神经营养因子3(NT
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3),神经营养因子4(NT
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4)、胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、脑源神经营养因子(BDNF...
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