RNA的保存方法技术

技术编号:37448365 阅读:28 留言:0更新日期:2023-05-06 09:20
一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的分解防止方法,其中,包括用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对含有皮肤表面上脂质的采集介质进行处理。行处理。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】RNA的保存方法


[0001]本专利技术涉及一种RNA的保存方法。

技术介绍

[0002]通过DNA、RNA等来源于生物体的核酸的分析,能够获得包含生物体的生理状态在内的各种信息。来源于生物体的核酸可以从细胞、组织、体液、分泌物等来源于生物体的试样中提取。专利文献1中记载了在皮肤表面上脂质(skin surface lipids;SSL)中含有RNA,能够将该来源于SSL的RNA用于生物体的分析。但是,由于SSL中所含的RNA的量为微量,因此,要求从由生物体采集的SSL中以尽可能高的产量提取RNA。
[0003]在来源于生物体的核酸中,RNA与DNA相比不稳定且容易分解。此外,作为RNA分解酶的核糖核酸酶(RNase)不仅存在于细胞和组织中,还广泛存在于汗、唾液等体液以及环境中。一直以来,为了防止生物体试样中的RNA的分解,采取立即从采集的试样中提取RNA的方法、将试样中或提取的RNA在

80℃下保存的方法、或使用RNase抑制剂的方法等方法。例如,通过将胍盐等离液盐添加到生物体试样中,能够使试样中的含有RNase的蛋白质变性而使RNase失活。但是,即使在添加了离液盐的情况下,由于在环境温度下不能完全地防止RNA的分解,因此,通常在

80℃下保存试样中或提取的RNA。
[0004]专利文献2中记载了一种核酸的简易提取法,其由以下的工序构成:向生物体试样中添加硫氰酸胍、盐酸胍、硫氰酸钾、硫氰酸钠、尿素等蛋白质改性剂,破坏细胞膜、细胞壁等,使蛋白质变性而仅使核酸游离的工序;添加醇类使游离的核酸凝聚的工序;使得到的含有核酸的提取物通过过滤器而将核酸捕集到过滤器的工序;和通过精制水或低浓度的缓冲液使核酸可溶化并从过滤器回收的工序。
[0005]专利文献3中记载了:使用含有苯酚和硫氰酸胍的RNA提取用药剂从乳中提取RNA后,迅速地冷冻至

80℃,由此能够进行来源于乳的RNA样品的3天以上的长期保存。
[0006]专利文献4中记载了如下方法:应用包含胍盐酸盐、硫氰酸胍、精氨酸、SDS、尿素等蛋白质改性剂、还原剂、以及缓冲剂的组合物以干燥状态存在的固体基质,从试样收集核酸,将该固体基质干燥,在周围条件下将核酸在干燥状态下储存于该固体基质上,从试样中提取并储存核酸。
[0007](专利文献1)国际公开公报第2018/008319号
[0008](专利文献2)日本特开2009

153467号公报
[0009](专利文献3)日本特开2000

264898号公报
[0010](专利文献4)日本特开2018

68303号公报

技术实现思路

[0011]本专利技术提供一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的分解防止方法,其中,包括用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对含有皮肤表面上脂质的采集介质进行处理。
[0012]另外,本专利技术提供一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的保存方法,其中,包括:用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对含有皮肤表面上脂质的采集介质进行处理的步骤;以及,保存该处理后的采集介质的步骤。
[0013]另外,本专利技术提供一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的采集用试剂盒,其中,具备:用于采集皮肤表面上脂质的采集介质;以及用于处理该采集介质的以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液。
[0014]另外,本专利技术提供一种来源于受试者的皮肤表面上脂质的RNA的回收方法,其中,包括:向需要或希望采集来源于皮肤表面上脂质的RNA的受试者,提供上述来源于皮肤表面上脂质的RNA的采集用试剂盒,该试剂盒具备用于采集皮肤表面上脂质的采集介质、以及用于处理该采集介质的以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液的步骤;以及
[0015]从该受试者回收包含从该受试者采集的皮肤表面上脂质的该采集介质的步骤,
[0016]在此,回收的包含皮肤表面上脂质的该采集介质按照上述来源于皮肤表面上脂质的RNA的分解防止方法或保存方法,利用该水溶液进行处理,并且采集该受试者的皮肤表面上脂质后,在环境温度下保存。
附图说明
[0017]图1是表示用于本专利技术的来源于SSL的RNA的采集用试剂盒的用于保存采集介质的容器的一个例子的图。A:侧视图(左)及其剖视图(右)、B:上方立体图(左)及其剖视图(右)。
[0018]图2是表示收纳有含有来源于SSL的RNA的采集介质和干燥剂的状态的图1的容器的一个例子的图。
具体实施方式
[0019]本说明书中引用的所有的专利文献、非专利文献和其他出版物,其整体在本说明书中作为参考被引用。
[0020]本说明书中的“RNA”包含1根链RNA和2根链RNA,例如mRNA、tRNA、rRNA、小RNA(例如microRNA(miRNA)、小干扰RNA(siRNA)、PIWI相互作用RNA(piRNA)等)、基因间区长链非编码(linc)RNA等。
[0021]在本说明书中,“皮肤表面上脂质(skin surface lipids;SSL)”是指存在于皮肤的表面上的脂溶性组分,有时也被称为皮脂。通常,SSL主要含有从在皮肤上的皮脂腺等外分泌腺分泌的分泌物,以覆盖皮肤表面的薄层的形式存在于皮肤表面上。
[0022]在本说明书中,“皮肤”只要没有特别限定,是包含体表的表皮、真皮、毛囊、以及汗腺、皮脂腺和其他腺等组织的区域的总称。
[0023]在本说明书中,“环境温度”是指能够进行SSL的采集的环境中的温度,优选是指室温或其以下的温度。在此,室温是指日本药典规定的1~30℃的温度。
[0024]本专利技术涉及一种用于防止从受试者采集的皮肤表面上脂质(SSL)中含有的RNA的分解,并且稳定地保存该RNA的方法。
[0025]本专利技术人发现,在通过采集介质从受试者采集SSL后,将包含该SSL的采集介质用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液进行处
理,由此能够防止该SSL中所含的RNA的分解,稳定地保存该RNA。
[0026]在一个实施方式中,本专利技术提供一种来源于SSL的RNA的分解防止方法和来源于SSL的RNA的保存方法。这些本专利技术的方法包括用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对从受试者采集的含有SSL的采集介质进行处理。
[0027]根据本专利技术的方法,能够防止从受试者采集的SSL中含有的RNA的分解,稳定地保存该RNA。根据本专利技术,能够在环境温度下保存容易分解且难以处理的RNA。另外,根据本专利技术,能够提高来自SSL的RNA的产量、以及使用了该RNA的各种分析的精度。
[0028]在本专利技术的方法中,采集SSL的受试者只要是在皮肤上具有SSL的生物即本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的分解防止方法,其中,包括:用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对含有皮肤表面上脂质的采集介质进行处理。2.一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的保存方法,其中,包括:用以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液对含有皮肤表面上脂质的采集介质进行处理的步骤;以及保存该处理后的采集介质的步骤。3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,还包括使以所述水溶液处理后的采集介质干燥的步骤。4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,所述溶剂是醇的浓度为20体积%以上且70体积%以下的醇水溶液。5.根据权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,所述水溶液中的所述选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的浓度为0.50g/mL以上。6.根据权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,所述处理包括使所述水溶液渗透到包含所述皮肤表面上脂质的采集介质中。7.一种来源于皮肤表面上脂质的RNA的采集用试剂盒,其中,具备:用于采集皮肤表面上脂质的采集介质;以及用于处理该采集介质的以水或醇水溶液作为溶剂的含有选自胍盐酸盐和胍硫氰酸盐中的至少1种的水溶液。8.根据权利要求7所述的试剂盒,其中...

【专利技术属性】
技术研发人员:长森夏海井上高良上原裕也大矢直树
申请(专利权)人:花王株式会社
类型:发明
国别省市:

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