葡萄糖脱氢酶突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了葡萄糖脱氢酶N37T位点的突变体，突变体的催化活性较野生型有了约19倍提升。将葡萄糖脱氢酶突变体N37T应用到电化学生物传感器上，选用具有巨大的比表面积、导电性良好的多壁碳纳米管作为载体，聚乙二醇作为分散剂，全氟磺酸膜作为成膜材料，所制得电极具有优异重现性、扫描稳定性，构建的电化学传感器不受溶解氧的干扰，可广泛应用于生物传感分析测试和食品检测等领域。析测试和食品检测等领域。析测试和食品检测等领域。

【技术实现步骤摘要】
葡萄糖脱氢酶突变体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及葡萄糖脱氢酶突变体，及其制备和在生物传感器中的应用。

技术介绍

[0002]葡萄糖脱氢酶在按照辅基或辅酶差异可分为：以NAD(P)
+
为辅酶的葡萄糖脱氢酶(EC 1.1.1.47简称NAD(P)
‑
GDH)、以PQQ为辅基的葡萄糖脱氢酶(EC1.1.5.2简称PQQ
‑
GDH)、以FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶(EC 1.1.5.9简称FAD
‑
GDH)。本专利技术所研究的NAD(P)
‑
GDH是短链脱氢酶/还原酶家族中的一员，与同源对应的亚基具有相似的整体折叠和低聚体结构，主要来源于芽孢杆菌和古细菌，在辅酶存在下能够专一地催化底物葡萄糖同时辅酶被还原，其具底物特异性专一和热稳定性良好等特点，有很高的应用和研究价值，但野生型葡萄糖脱氢酶其催化活性较低，对酶的活性提高长期以来是一个重点和难点问题，因此提高葡萄糖脱氢酶的催化活性具有重要的应用和研究价值。
[0003]生物传感器是以微生物、核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.葡萄糖脱氢酶突变体基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。2.葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.含有权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶突变体基因的重组载体。4.使用权1所述的葡萄糖脱氢酶突变体基因或权3所述的重组载体转化的基因工程菌。5.权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶突变体基因、权利要求3所述的重组载体和权利要求4所述的基因工程菌在在制备葡萄糖脱氢酶中的应用。6.一种葡萄糖脱氢酶突变体的制备方法，其特征在于，培养权利要求4所述的基因工程菌，从而获得葡萄糖脱氢酶突变体。7.权利要求2所述的葡萄糖脱氢酶突变体在葡萄糖检测用生物传感器中的应用。8.葡萄糖检测用生物传感器，其特征在于，包含有权利要求2所述的葡萄糖脱氢酶突变体。9.如权利要求8所述的葡萄糖检测用生物传感器，其特征在于，以多壁碳纳米管作为载体，聚乙二醇作为分散剂，全氟磺酸膜作为成膜材料制成。10.一种葡萄糖检测用生物传...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宇鹏，薛卫士，孙杨，李华，许银彪，包倩倩，张锴亮，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：