一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法技术

本发明专利技术属于植物

【技术实现步骤摘要】
一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法


[0001]本专利技术具体涉及一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，属于植物
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微生物交叉


技术介绍

[0002]高粱属牧草因苗期生长快、饲用品质好，是国内外广泛种植的暖季型禾本科牧草，1987
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2020年，我国通过国家草品种审定的高粱属苏丹草、高粱和高粱－苏丹草杂交种、苏丹草
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拟高粱杂交种共28个，其中具有耐盐碱特性的品种12个，耐盐性强的3个品种，分别为：“天农2号”高粱
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苏丹草杂交种、“天农青饲1号”高粱
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苏丹草杂交种和“宁农”苏丹草，均在盐(NaCl)含量≤4
‰
的土壤中生长良好，但是总体而言，耐盐碱特性品种相对较少，繁育方法也有待改进。
[0003]已有的研究表明，耐盐性是数量性状，受多基因控制，且与植物的形态适应和生化适应有关，因而通过常规育种和基因转化途径获得耐盐植物材料是非常困难的。近年来，植物育种思维发生了根本改变，把“植物作为一种共生功能体，包含寄主和微生物群系的生态和进化单元”的育种策略，已成为国内外研究前沿(Vandenkoornhuyse,P.et al.The importance of the microbiome of the plant holobiont，New Phytologist，2015，206(4)，1196
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1206；Zhong Wei，Alexandre Jousset.Plant Breeding Goes Microbia，Trend in Plant Scienc，2017，22(7)：555
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558)。内生真菌共生体一直是国内外研究的热点，但内生细菌共生体育种的正式报道极少，仅见奥地利Birgit Mitter团队把特定的内生菌通过花导入，获得了含内生细菌P.phytofirmansPsJN(伯克霍尔德菌)的辣椒、大豆、玉米、小麦共生体F1代种子(Mitter B et al.A new approach to modify plant microbiomes and traits by introducing beneficial bacteria at flowering into progeny seeds.Frontiers in Microbilogy，2017，8：11)，这些植物均属于粮食作物，与高粱属杂交种差异较大。
[0004]巨大芽胞杆菌(Bacillusmegaterium)是芽胞杆菌属的一种重要的细菌，自然界广泛存在，对人畜和环境友好。已有研究表明，巨大芽孢杆菌作为微生物菌肥，通过种植前浸根、种植后灌根或叶面喷雾方式，内生于植株的巨大芽孢杆菌可通过固氮、溶磷、产生生长激素等方式促进植物生长，提高寄主植物对盐胁迫的耐受性(胡小加，江木兰，巨大芽胞杆菌(A6)在红黄壤中对油菜的促生作用.中国油料作物学报，2003(04):107
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108；罗欢，伍辉军，谢永丽，等，巨大芽胞杆菌CJLC2菌株对盐胁迫下番茄生长及耐盐生理生化指标的影响.植物保护学报，2013，40(05)：431
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436；Xia Li,XiaoyanGeng，RongrongXie,et al.The endophytic bacteria isolated from elephant grass(Pennisetum purpureum Schumach)promote plant growth and enhance salt tolerance of Hybrid Pennisetum.Biotechnology for biofuels,2016,9:190:1
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12.)。但是，现有巨大芽孢杆菌外施效果受环境影响大、对施用人员规范操作要求较高。2018年，钟小仙等公开了一株富集镉促生长的杂交狼尾草内生巨大芽孢杆菌BM18
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2(专利号：ZL201810143961.6)。
[0005]有关禾本科牧草内生巨大芽孢杆菌共生体良种繁育及其在盐土改良中的应用，国内外均未见报道。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本专利技术的第一个目的是提供一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，并对不同盐胁迫下菌草共生体的草产量和饲用品质进行评价，以期为盐土改良提供新的策略；
[0007]本专利技术的第二个目的是提供前文所述的饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法得到的种子；
[0008]本专利技术的第三个目的是提供前文所述的饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法在盐土改良中的应用；
[0009]本专利技术的第四个目的是提供巨大芽孢杆菌，或含有巨大芽孢杆菌的菌剂，或含有巨大芽孢杆菌的培养物，或含有巨大芽孢杆菌的微生物肥料，在内生细菌共生体育种中的应用；
[0010]本专利技术的第五个目的是提供一种快速鉴定巨大芽孢杆菌BM18
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2的CAPS标记。
[0011]本专利技术的目的可通过以下技术方案实现：
[0012]第一方面，本专利技术保护一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，包括如下步骤：在母本柱头抽出2～3d时，用含有巨大芽孢杆菌的菌液喷雾于柱头，再用父本花药抽出后2～5d的花粉授粉，收获成熟种子，即可。
[0013]在本申请的一些优选技术方案中，所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌BM18
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2。
[0014]所述巨大芽孢杆菌BM18
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2，专利号：ZL201810143961.6，2017年11月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号地址为中国武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2017679。
[0015]优选的，本专利技术使用的巨大芽孢杆菌BM18
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2为含有巨大芽孢杆菌BM18
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2的产品，有效活菌数≥2.0亿/mL，为委托扬州绿源生物化工有限公司生产微生物肥料产品。
[0016]其中，巨大芽孢杆菌BM18
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2使用时，将有效活菌数≥2.0亿/mL的巨大芽孢杆菌BM18
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2菌液产品稀释300
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1000倍喷雾于母本柱头上。
[0017]在本申请的一些优选技术方案中，所述母本为苏丹草
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拟高粱杂交种。
[0018]优选的，所述母本为四倍体苏丹草
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拟高粱杂交种SS2010
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2。
[0019]在本申请的一些优选技术方案中，所述父本为甜高粱。
[0020]优选的，所述父本为甜高粱SS2015。
[0021]本专利技术提供了首个含内生巨大芽孢杆菌的多年生饲草高粱良种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：在母本柱头抽出2~3d时，用含有巨大芽孢杆菌的菌液喷雾于柱头，再用父本花药抽出后2~5d的花粉授粉，收获成熟种子，即可。2.根据权利要求1所述的一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌BM18
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2；优选的，使用的巨大芽孢杆菌BM18
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2为含有巨大芽孢杆菌BM18
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2的菌液产品，有效活菌数≥2.0亿/mL；更优选的，巨大芽孢杆菌BM18
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2使用时，将有效活菌数≥2.0亿/mL的巨大芽孢杆菌BM18
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2菌液产品稀释300
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1000倍喷雾于母本柱头上。3.根据权利要求1所述的一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述母本为苏丹草
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拟高粱杂交种，优选为四倍体苏丹草
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拟高粱杂交种SS2010
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2。4.根据权利要求1所述的一种饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，其特征在于，所述父本为甜高粱，优选为甜高粱SS2015。5.权利要求1
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4任一所述的饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法得到的种子。6.权利要求1
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4任一所述的饲草高粱
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巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法，权利要求5所述的种子，在盐土改良中的应用。7.巨...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟小仙，毛峥沣，薛文韬，刘智微，钱晨，吴娟子，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：