本发明专利技术公开了一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用，涉及分子生物学领域和生物化学分析领域。所述类黄酮糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术基于代谢物与全基因组关联分析的方法，发现当茶树中糖基转移酶CsUGT708C的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示时，其具有高效催化多个类黄酮生成糖基化的代谢物的能力，同时对应在茶树体中芹菜素6,8
【技术实现步骤摘要】
一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用
[0001]本专利技术涉及分子生物学领域和生物化学分析领域，特别是涉及一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用。
技术介绍
[0002]类黄酮的糖基化是茶树体中普遍存在的现象，这对于维持茶树体的细胞代谢平衡具有重要作用。UDP
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糖基转移酶(UDP
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glycosyl transferase，UGT)是糖基化酶的主成员之一，以尿苷二磷酸
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糖(UDP
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糖)作为糖基供体，转移到受体分子，以达到调节受体分子的水溶性、稳定性及生物活性。在茶树中类黄酮的糖基化与茶树抵御外界环境胁迫密切相关，糖基化黄酮类代谢物提高了溶解性、稳定性及其他生物活性，参与了茶树的抗寒冷、抗旱、抗盐碱等胁迫。茶树抗逆性的研究是茶树育种重要内容，因此解析类黄酮的糖基化的分子机制，加强对糖基转移酶基因的应用，对开发新的育种方法，提升育种效率具有重要意义。
技术实现思路
[0003]本专利技术的目的是提供一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术基于代谢物与全基因组关联分析的方法，发现当茶树中糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示时，其具有高效催化多个类黄酮生成糖基化的代谢物的能力，因此，可以根据茶树中糖基转移酶的基因型进行茶树育种的前期筛选，从而有利于提高抗逆性茶树的育种效率。
[0004]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0005]本专利技术提供类黄酮糖基转移酶，所述类黄酮糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
[0006]本专利技术还提供上述的分子标记在茶树育种中的应用。
[0007]进一步地，所述应用为筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。
[0008]本专利技术还提供一种筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质的方法，包括以下步骤：
[0009](1)以茶树的cDNA为模板，采用SEQ ID NO.1
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2所示的引物对，进行PCR扩增，得到克隆基因；
[0010](2)对所述克隆基因进行测序和蛋白翻译，当所述克隆基因翻译成的蛋白序列仅如SEQ ID NO.3所示时，所述茶树即为类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。
[0011]进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应体系为所述PCR扩增的反应体系为：cDNA模板2μL，10
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扩增缓冲液3μL，4种dNTP混合物0.6μL，正反向引物各0.6μL，Taq DNA聚合酶2.5μL，超纯水24μL。
[0012]进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应程序为：步骤1温度94℃，2min；步骤2温度94℃，25s；步骤3温度56℃，20s；步骤4温度72℃，35s；步骤5温度72℃5min，步骤2
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4循环35次。
[0013]本专利技术还提供一种筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质的试剂盒，包括SEQ ID NO.1
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2所示的引物对。
[0014]本专利技术公开了以下技术效果：
[0015]本专利技术基于代谢物与全基因组关联分析的方法，成功克隆糖基转移酶CsUGT708C的两个等位基因，并根据该基因的基因型进行茶树的分子标记辅助育种。该基因的单核苷酸多态性(SNP)包含4个非同义突变的碱基，CsUGT708C1基因非同义突变的SNP位点为C(胞嘧啶)
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A(腺嘌呤)
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A(腺嘌呤)
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C(胞嘧啶)，编码的蛋白酶具有高效催化多个类黄酮生成糖基化的代谢物的能力，同时对应在茶树体中芹菜素6,8
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二
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C
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内苷等糖苷化的代谢物含量较高；CsUGT708C2基因非同义突变的SNP位点为T(胸腺嘧啶)
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G(鸟嘌呤)
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G(鸟嘌呤)
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G(鸟嘌呤)时，编码的蛋白酶催化效率较低，同时对应在茶树体中芹菜素6,8
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二
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C
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内苷等糖苷化的代谢物含量较低。根据茶树中糖基转移酶CsUGT708C的基因型进行茶树育种的前期筛选，有利于提高抗逆性茶树品种的选育效率。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0017]图1为不同等位基因对应类黄酮的糖基化代谢物的含量差异；
[0018]图2为芹菜素6,8
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二
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C
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内苷的全基因组关联分析结果；其中，A为代谢物含量区间分布图；B为表型数的分位数
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分位数图；C为代谢物的含量与QTL的关系图；
[0019]图3为糖基化根皮素的全基因组关联分析结果；其中，A为代谢物含量区间分布图；B为表型数的分位数
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分位数图；C为代谢物的含量与QTL的关系图。
具体实施方式
[0020]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0021]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0022]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0023]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实
施方式对技术人员而言是显而易见得的。本专利技术说明书和实施例仅是示例性的。
[0024]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0025]实施例1
[0026](1)利用220份茶树种质资源(表1)的mRNA测序，比对到茶树参考基因组G240(茶树参考基因组G240注释文件从下载，https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)，根据RNA测序结果获得表本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种类黄酮糖基转移酶，其特征在于，所述类黄酮糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。2.一种如权利要求1所述的类黄酮糖基转移酶在茶树育种中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用为筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。4.一种筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以茶树的cDNA为模板，采用SEQ ID NO.1
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2所示的引物对，进行PCR扩增，得到克隆基因；(2)对所述克隆基因进行测序和蛋白翻译，当所述克隆基因翻译成的蛋白序列仅如SEQ ID NO.3所示时，所述茶树即为类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。5.根据权利要求4所述的方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：闻玮玮，姜晓辉，邱海吉，张小亮，刘琳，任雨嘉，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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