用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于玉米赤霉烯酮(ZEA)检测的电化学免疫传感器，以TB为电活性物质，将PDDA

【技术实现步骤摘要】
用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器及检测方法


[0001]本专利技术涉及电化学检测
，具体涉及用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器及检测方法。

技术介绍

[0002]在食品污染物中，真菌毒素是对人类和动物有毒性作用的真菌次级代谢产物。玉米赤霉烯酮(ZEA)是由禾谷镰刀菌、枯枝镰刀菌和克鲁克韦镰刀菌等不同丝状真菌产生的一种真菌毒素，ZEA存在于谷物中，主要是玉米和加工食品。它是世界上分布最广的真菌毒素之一，其致死剂量为体重的4000至10000mg/kg。此外，长期接触ZEA可导致生殖障碍、雌激素、流产和不育，以及肝毒性、免疫毒性和血液毒性效应。在阿根廷，玉米中允许的玉米赤霉烯酮最大含量为200μg/kg。因此对于食品中玉米赤霉烯酮的检测具有重要意义。
[0003]目前，已使用高效液相色谱(HPLC)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、毛细管电泳、表面等离子体共振、固相萃取等方法检测玉米赤霉烯酮。这些分析方法具有敏感性和选择性，但由于仪器庞大，不适合现场监测和分析。此外，这些方法价格昂贵，需要训练有素的熟练人员进行操作，并且需要漫长的样品制备和清理程序。因此需要寻找一种有快速、简单、便捷、准确度的方法用于玉米赤霉烯酮的检测。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术中的问题，本专利技术提供一种用于玉米赤霉烯酮(ZEA)检测的电化学免疫传感器。
[0005]除特殊说明外，本专利技术所述份数均为重量份，所述百分比均为质量百分比。
[0006]一种用于玉米赤霉烯酮(ZEA)检测的电化学免疫传感器，其特征在于，
[0007]所述构建用于玉米赤霉烯酮(ZEA)检测的电化学免疫传感器的方法为：将Ti
‑
MOF/KB溶液滴加到清洁的玻碳电极表面上，室温干燥后再将AuNPs溶液滴加到电极表面，室温干燥，将Ab1滴加在电极上，4
‑
5℃冰箱过夜孵育12
‑
13h；用DEPC水冲洗干净后滴加1％牛血清蛋白(BSA)溶液4
‑
5℃孵育30
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35min；最后将获得的电极用DEPC水冲洗干净后，滴加PDDA
‑
NG/HNT/TB
‑
AuNPs/Ab2信号探针溶液于室温孵4
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5h，即得到用于玉米赤霉烯酮(ZEA)检测的电化学免疫传感器；
[0008]所述PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs/Ab2信号探针溶液的制备：将玉米赤霉烯酮多克隆抗体Ab2加入到制得的PDDA
‑
NG/HNT/TB
‑
AuNPs分散液中，冰浴搅拌12
‑
13h,离心，水洗，将沉淀物重新分散于超纯水中，即得到PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs/Ab2信号探针溶液。
[0009]所述PDDA
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NG/HNT/TB
‑
AuNPs分散液的制备方法为：制得的AuNPs加入到制得的PDDA
‑
NG/HNT/TB分散液中，搅拌4
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5h，离心，洗涤后，将沉淀分散于超纯水中得到PDDA
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NG/HNT/TB
‑
AuNPs分散液。
[0010]所述PDDA
‑
NG/HNT/TB分散液制备方法为：在制得的PDDA
‑
NG/HNT分散液加入甲苯胺蓝(TB)搅拌12
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13h，离心、洗涤，将沉淀分散于超纯水中得到PDDA
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NG/HNT/TB分散液。
[0011]所述PDDA
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NG/HNT分散液的制备方法为：将氮掺杂石墨烯(NG)溶于N,N
‑
二甲基甲酰胺(DMF)中，加入聚二烯二甲基氯化铵(PDDA)搅拌2
‑
3h，取溶液加入埃洛石纳米管(HNT)搅拌3h得到PDDA
‑
NG/HNT分散液。
[0012]所述Ti
‑
MOF/KB分散液的制备方法为:将2
‑
氨基对苯二甲酸(NH2‑
BDC)加入到N,N
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二甲基甲酰胺(DMF)
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甲醇混合溶剂中然后加入钛酸四丁酯和科琴黑(KB)，室温超声10
‑
15min后，将溶液转移到反应釜中150
‑
160℃反应20
‑
24h，冷却，在10000转/分的条件下离心5
‑
6min、用DMF和甲醇洗涤后,在60
‑
70℃烘箱中干燥，得到墨绿色的Ti
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MOF/KB纳米材料；然后用超纯水溶解得到Ti
‑
MOF/KB分散液。
[0013]所述AuNPs的制备方法为：将1％ HAuCl4溶液加入至超纯水中煮沸，然后加入1％柠檬酸三钠溶液继续煮沸15分钟，冷却后用超纯水恢复至原体积得透明的酒红色溶液即为纳米金(AuNPs)。
[0014]一种用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器，其特征在于，所述构建用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器的方法包括如下步骤：
[0015](1)信号探针的制备：
[0016]1)PDDA
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NG/HNT:将10mg氮掺杂石墨烯(NG)溶于10mL N,N
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二甲基甲酰胺(DMF)中，加入4mL聚二烯二甲基氯化铵(PDDA)搅拌2h，取2mL上述溶液分别加入埃洛石纳米管(HNT)(1mg；2mg；3mg；4mg；5mg；)搅拌3h得到PDDA
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NG/HNT分散液；
[0017]2)PDDA
‑
NG/HNT/TB:取1mL制得的PDDA
‑
NG/HNT分散液加入1mL浓度为1mg/mL甲苯胺蓝(TB)搅拌12h,离心、用超纯水洗涤后，将黑色沉淀分散于1mL超纯水中得到PDDA
‑
NG/HNT/TB分散液；
[0018]3)AuNPs：将1mL 1％ HAuCl4溶液加入至100mL超纯水中煮沸，然后迅速加入2.5mL1％柠檬酸三钠溶液继续煮沸15分钟，冷却后用超纯水恢复至原体积得透明的酒红色溶液即为纳米金(AuNPs)；
[0019]4)PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs:取500μL制得的AuNPs加入到1mL制得的PDDA
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NG/HNT分散材料中，搅拌4h，离心，用超纯水洗涤后，将黑色沉淀分散于1mL超纯水中得到PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs分散液；
[0020]5)PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs/Ab2:向1m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于玉米赤霉烯酮（ZEA）检测的电化学免疫传感器，其特征在于，所述构建用于玉米赤霉烯酮（ZEA）检测的电化学免疫传感器的方法为：将Ti
‑
MOF/KB溶液滴加到清洁的玻碳电极表面上，室温干燥后再将AuNPs溶液滴加到电极表面，室温干燥，将Ab1滴加在电极上，4
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5℃冰箱过夜孵育12
‑
13h；用DEPC水冲洗干净后滴加1% 牛血清蛋白（BSA）溶液4
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5℃孵育30
‑
35 min；最后将获得的电极用DEPC水冲洗干净后，滴加PDDA
‑
NG/HNT/TB
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AuNPs/Ab2信号探针溶液于室温孵4
‑
5 h，即得到用于玉米赤霉烯酮（ZEA）检测的电化学免疫传感器；所述PDDA
‑
NG/HNT/TB
‑
AuNPs/Ab2信号探针溶液的制备：将玉米赤霉烯酮多克隆抗体Ab2加入到制得的PDDA
‑
NG/HNT/ TB
‑
AuNPs 分散液中，冰浴搅拌12
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13 h, 离心，水洗，将沉淀物重新分散于超纯水中，即得到PDDA
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NG/HNT/ TB
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AuNPs/ Ab2信号探针溶液；所述PDDA
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NG/HNT/TB
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AuNPs分散液的制备方法为：制得的AuNPs加入到制得的PDDA
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NG/HNT/TB分散液中，搅拌4
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5h，离心，洗涤后，将沉淀分散于超纯水中得到PDDA
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NG/HNT/ TB
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AuNPs分散液；所述PDDA
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NG/HNT/TB分散液制备方法为：在制得的PDDA
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NG/HNT分散液加入甲苯胺蓝(TB)搅拌12
‑
13 h，离心、洗涤，将沉淀分散于超纯水中得到PDDA
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NG/HNT/TB分散液；所述PDDA
‑
NG/HNT分散液的制备方法为：将氮掺杂石墨烯(NG) 溶于N,N
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二甲基甲酰胺（DMF）中，加入聚二烯二甲基氯化铵(PDDA) 搅拌2
‑
3 h，取溶液加入埃洛石纳米管(HNT)搅拌3h得到PDDA
‑
NG/HNT分散液；所述Ti
‑
MOF/KB分散液的制备方法为:将 2
‑
氨基对苯二甲酸（NH2‑
BDC）加入到N,N
‑
二甲基甲酰胺（DMF）
‑
甲醇混合溶剂中然后加入钛酸四丁酯和科琴黑(KB)，室温超声10
‑
15 min后，将溶液转移到反应釜中150
‑
160 ℃反应20
‑
24 h，冷却，在10000转/分的条件下离心5
‑
6 min、用DMF和甲醇洗涤后,在60
‑
70 ℃烘箱中干燥，得到墨绿色的Ti
‑
MOF/KB纳米材料；然后用超纯水溶解得到Ti
‑
MOF/KB分散液。2.如权利要求1所述的用于玉米赤霉烯酮（ZEA）检测的电化学免疫传感器，其特征在于，所述AuNPs的制备方法为：将1% HAuCl4溶液加入至超纯水中煮沸，然后加入1% 柠檬酸三钠溶液继续煮沸15分钟，冷却后用超纯水恢复至原体积得透明的酒红色溶液即为纳米金 (AuNPs)。3.一种用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器，其特征在于，所述构建用于玉米赤霉烯酮检测的电化学免疫传感器的方法包括如下步骤：（1）信号探针的制备：1）PDDA
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NG/HNT:将10 mg 氮掺杂石墨烯(NG) 溶于10mL N,N
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二甲基甲酰胺（DMF）中，加入4mL聚二烯二甲基氯化铵(PDDA) 搅拌2 h，取2 mL 上述溶液分别加入 埃洛石纳米管(HNT)(1 mg; 2 mg; 3 mg; 4 mg; 5 mg;)搅拌3h得到PDDA
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NG/HNT分散液；2）PDD...

【专利技术属性】
技术研发人员：母昭德，蒋晓丹，白丽娟，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：