一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型及检测方法技术

本发明专利技术公开一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型及检测方法，评估的步骤如下：将实验动物拔除须，然后通过将含待评估物质注射到实验动物一侧的触须垫或胡须垫或须囊腔中，将对照溶液注射到实验动物另一侧的触须垫或胡须垫或相对称的须囊腔中；注射一定次数后，对照溶液注射一侧的须长出，而含待评估物质的溶液注射一侧的须长出或未长出，对长出须的长度和/或着色情况进行定量检测和对比，即可准确评估物质对毛发生长和/或着色等作用。本发明专利技术利用了实验动物须的对称性，得到了一种简单直接、高灵敏度的在体内定量评估物质对毛发生长作用的方法，可用于研究皮肤病以及开发相关药品、化妆品等，具有重要科学意义和应用价值。科学意义和应用价值。科学意义和应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型及检测方法


[0001]本专利技术属于检测评估毛发生长和/或着色作用的
，具体涉及一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型及检测方法。

技术介绍

[0002]毛发由微小器官毛囊通过毛囊干细胞增殖分化产生。在全世界范围内，有数以亿计的男性、女性甚至儿童饱受脱发的困扰，影响患者的社交自信。国家卫健委2019年发布的脱发人群调查显示，近年来我国脱发人群呈直线上升，人数已超2.5亿，即平均每6人中就有1人有脱发情况，其中男性约占65％。造成脱发的原因很多，例如遗传因素、免疫因素、熬夜、衰老、癌症治疗(如化疗脱发)、分娩、烧伤以及精神压力过大等。脱发目前的临床治疗手段非常有限，经美国FDA批准的只有两个药物，米诺地尔(Minoxidil)和非那雄胺(Finasteride)，但这两种药物的治疗效果都不尽人意，需每日涂药后清洗，有气味，停药后会复发，且会有接触性皮炎、头痛等副作用，因而目前有很多科学家研究能调控毛发生长的因子，很多公司也在研发新的治疗脱发的药物或者缓解脱发的护发剂。
[0003]现有评估药物和因子促进或抑制毛发生长功能的方法主要有以下3种，且都存在明显的不足：
[0004]1.利用体外培养的毛囊观察药物/因子对毛囊生长的影响。自1990年Philpott MP等首先成功地培养了游离的人头发毛囊后，人们将人头皮/动物毛皮/小鼠触须等分离出单根毛囊，并将毛囊浸泡在含有药物/因子(如蛋白质因子)的培养液中，记录每根毛囊生长毛发的长度，从而评估药物/因子对毛发生长的促进/抑制作用；参见现有文献1(Philpott MP,Green MR,Kealey T.Human hair growth in vitro[J].J Cell Sci,1990,97(Pt3):463
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471.)、现有文献2(Zheng M,Choi N,Jang Y,Kwak DE,Kim Y,Kim WS,Oh SH,Sung JH.Hair growth promotion by Necrostatin
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1s[J].Sci Rep.2020,10(1):17622)和现有文献3(人游离毛囊体外培养及病理切片制作[C]，严欣；胡志奇；冀航)中的记载。但该方法的缺点是：1)需要解剖单根活的毛囊，费时费力，且操作困难；2)由于不同的毛囊可能处于不同毛发生长周期，毛囊间的差异增加了方法的系统误差；3)其采用的是毛囊器官体外培养，不一定完全反应体内情况；4)其毛囊需要完全浸泡在含有药物/因子的溶液中，因此所需的药物/因子的用量较多。
[0005]2.将小鼠剃毛后在背部皮下注射药物/因子，观察毛发生长情况。参见现有文献4(Leishman E,Howard JM,Garcia GE,Miao Q,Ku AT,Dekker JD,Tucker J,Nguyen H.Development.Foxp1 maintains hair follicle stem cell quiescence through regulation of Fgf18[J].Development.2013；140(18):3809
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18)和现有文献5(专利申请号为CN201710425556.9、专利技术名称为“一种促进毛发生长的方法”)中的记载。但该方法只能大致评估毛发生长的快慢，难以做定量评估；需要使用年龄一致且处于特定毛发生长周期(比如静止期)的小鼠用于评估；此外其注射药物/因子的剂量较大，注射的药物/因子在注
射部位附近扩散，导致注射效应不够均一。
[0006]3.将小鼠背部剃毛后涂抹小分子药物，使其通透皮吸收发挥作用，观察毛发生长情况；参见现有文献6(专利申请号为CN201710425587.4、专利技术名称为“一种毛发生长抑制剂及其用途”)中的记载。但该方法仅适用于评估可透皮吸收的小分子物质，而对不能透皮的大分子物质如蛋白等没有效果；该方法由于透皮效率有限导致其灵敏度不高；该方法需要使用年龄一致且处于特定毛发生长周期(比如静止期)的小鼠用于评估；且该方法也只能大致评估毛发生长的快慢，难以做定量评估。
[0007]此外，色素性皮肤病也困扰着大批人群，如白癜风、雀斑、毛发变黄变白等等；因而开发能改变色素沉着的药物或者化妆品也具有广阔的应用价值。目前对于毛发粗细、颜色和光泽进行评估检测的方法鲜有报道。
[0008]基于此，研发一种能够操作简单、准确性好、灵敏度高的评估药物/因子调控毛发生长和/或着色作用的检测方法具有重要的科学意义和应用价值。

技术实现思路

[0009]针对现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型及检测方法。本专利技术利用了实验动物须的对称性，尤其是长度和毛色的对称性，将待评估物质注射到触须垫或胡须垫或须囊腔中，从而得到了一种简单高效、灵敏度高的在体内定量评估物质调控毛发生长和/或着色作用的方法，尤其通过使用与须直径相当的微针直接精准注射到须囊腔中可显著提高准确度和灵敏度。本专利技术的模型和方法可用于研究毛发和皮肤异常疾病的机理，以及辅助开发相关药品、化妆品等，具有重要的科学意义和应用价值。
[0010]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0011]本专利技术提供了一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，包括以下步骤：
[0012]A1、将具有对称性须的实验动物拔除须，然后通过皮下注射将含待评估物质的溶液直接注射到实验动物一侧的触须垫或胡须垫中，或通过微针注射将含待评估物质的溶液直接注射到实验动物一侧的须囊腔中，将对照溶液采用相同的方法直接注射到实验动物另一侧的触须垫或胡须垫或相对称的须囊腔中；
[0013]A2、每间隔1
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5天注射一次，注射一定时间，对照溶液注射一侧的须长出，而含待评估物质的溶液注射一侧的须长出或未长出，即得评估物质促进或抑制毛发生长和/或着色作用的动物模型。
[0014]优选地，步骤A1中，所述具有对称性须的实验动物为具有对称性须的哺乳动物，包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、猫、貂、狗中的任意一种；
[0015]所述的须为触须或胡须。
[0016]优选地，所述待评估物质选自化合物、蛋白质、DNA、RNA、病毒、多肽、抗体、外泌体中的任意一种或多种的组合；
[0017]所述对照溶液为不含待评估物质的空白溶液或含其他物质的空白溶液；所述其他物质选自化合物、蛋白质、DNA、RNA、病毒、多肽、抗体、外泌体中的任意一种或多种的组合，且与待评估物质不相同。
[0018]优选地，所述的调控毛发生长的作用包括促进或抑制毛发生长长度的作用、调控毛发生长粗细的作用、调控毛发生长光泽的作用、调控毛发着色的作用、调控毛囊皮脂腺分泌皮脂的作用；
[0019]所述待评估物质包括促进或抑制毛发生长长度的因子、调控毛发生长粗细的因子、调控毛发生长光泽的因子、调控毛本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：A1、将具有对称性须的实验动物拔除须，然后通过皮下注射将含待评估物质的溶液直接注射到实验动物一侧的触须垫或胡须垫中，或通过微针注射将含待评估物质的溶液直接注射到实验动物一侧的须囊腔中，将对照溶液采用相同的方法直接注射到实验动物另一侧的触须垫或胡须垫或相对称的须囊腔中；A2、每间隔1
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5天注射一次，注射一定时间，对照溶液注射一侧的须长出，而含待评估物质的溶液注射一侧的须长出或未长出，即得评估物质促进或抑制毛发生长和/或着色作用的动物模型。2.根据权利要求1所述的用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，其特征在于，步骤A1中，所述具有对称性须的实验动物为具有对称性须的哺乳动物，包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、猫、貂、狗中的任意一种；所述的须为触须或胡须；所述待评估物质选自化合物、蛋白质、DNA、RNA、病毒、多肽、抗体、外泌体中的任意一种或多种的组合；所述对照溶液为不含待评估物质的空白溶液或含其他物质的空白溶液；所述其他物质选自化合物、蛋白质、DNA、RNA、病毒、多肽、抗体、外泌体中的任意一种或多种的组合，且与待评估物质不相同。3.根据权利要求1或2所述的用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，其特征在于，所述的调控毛发生长的作用包括促进或抑制毛发生长长度的作用、调控毛发生长着色的作用、调控毛发生长粗细的作用、调控毛发生长光泽的作用、调控毛囊皮脂腺分泌皮脂的作用；所述待评估物质包括促进或抑制毛发生长长度的因子、调控毛发生长着色的因子、调控毛发生长粗细的因子、调控毛发生长光泽的因子、调控毛囊皮脂腺分泌皮脂的因子中的任意一种或多种的组合。4.根据权利要求1所述的用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，其特征在于，步骤A1中，所述皮下注射方法具体为：利用一次性胰岛素注射器将针头直接扎入触须垫或胡须垫中，定量地将含待评估物质的溶液或对照溶液直接注射到触须垫中；所述微针注射方法具体为：利用微针注射器将针头直接插入拔除须的空的须囊腔中，定量地将含待测物质的溶液或对照溶液直接注射到空的须囊腔中；所述微针注射器针头的外径小于、等于或略大于须的直径。5.根据权利要求1或4所述的用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法，其特征在于，步骤A1和A2中，所述注射的剂量为0.1
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20μL/次/须囊腔；注射的次数为1
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10次；步骤A2中，所述注射的时间为1
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30天。6.根据权利要求1所述的用于评估物质调控毛发生长和/或着色作用的动物模型的构建方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖新化，高礼鹏，张何丽，谭肖阳，邱爔爔，
申请(专利权)人：今素生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：