一种构建Lrp5A241T基因点突变高骨量小鼠模型的方法技术

本发明专利技术提供了一种构建Lrp5A241T基因点突变高骨量小鼠模型的方法，属于生物技术领域。本发明专利技术的方法较传统Cre/loxP系统操作更为简单，能够实现精准基因修饰，具有技术周期短、效率高的优点。此外，本发明专利技术构建的小鼠仅发生目的基因点突变，不携带其他基因修饰，同患者人群的真实突变一致，通过microCT等方式检测小鼠具有高骨量表征，对后续探究高骨量相关机制、研发相关靶向治疗药物或基因修饰疗法治疗骨质疏松等疾病、拓展LRP5高骨量突变的临床应用具有重要应用意义。用具有重要应用意义。用具有重要应用意义。

【技术实现步骤摘要】
一种构建Lrp5 A241T基因点突变高骨量小鼠模型的方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种构建Lrp5 A241T基因点突变高骨量小鼠模型的方法。

技术介绍

[0002]跨膜受体低密度脂蛋白受体相关蛋白5(Low
‑
density lipoprotein receptor
‑
related protein 5，LRP5)与骨密度密切相关，主要认为其通过经典Wnt/β
‑
catenin信号通路调控骨形成，LRP5功能获得性突变可引起骨密度增加、骨皮质增厚、骨硬度和抗骨折能力增强等高骨量表现，通常不伴视网膜、心脏等其他系统疾病，相关神经并发症主要由过度骨形成所致，整体表现为良性突变。
[0003]研究发现LRP5高骨量突变具有降低因老龄化、长期使用激素、绝经、废用性萎缩等引起的骨质疏松风险，可挽救成骨不良、Stat3缺失导致的骨骼缺陷等，还可延缓胰岛素缺乏小鼠血糖升高以及控制血糖水平，这可能与增强糖酵解作用相关，表明其在治疗骨质疏松、成骨不良、糖尿病等疾病中的潜在应本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建Lrp5 A241T基因点突变高骨量小鼠模型的方法，包括以下步骤：将Cas9 mRNA、Donor DNA和guideRNA混合后对供体小鼠的受精卵进行显微注射，再将显微注射后的受精卵移植到假孕母鼠中，繁殖子代，得到Lrp5A241T基因点突变高骨量小鼠模型；所述Donor DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述guideRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述繁殖子代包括对繁殖获得的F0代小鼠进行基因型鉴定，选取其中携带A241T突变的阳性小鼠与野生型小鼠交配，获得稳定遗传Lrp5 A241T突变的F1代杂合子小鼠。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述野生型小鼠包括C57BL/6J小鼠。4.根据权利要求1所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨国利，姜治伟，王雪婷，傅梦蝶，贺瑾，李娜，叶钰儿，潘奕祺，张回，张芩梦，陈朝真，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属口腔医院，
类型：发明
国别省市：