一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用，属于分子生物学领域。该长链非编码RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其通过减少肺组织中炎症细胞的浸润、降低肺泡灌洗液的总蛋白浓度和白细胞数量，以及减少炎症因子的表达量，实现治疗肺纤维化的功效。本发明专利技术利用雾化吸入博来霉素构建肺纤维化小鼠模型，进一步通过雾化lncENAF腺相关病毒液进行治疗，证实lncENAF对肺部炎症和肺纤维化有显著的治疗效果，为开发治疗肺纤维化的药物提供了新策略。维化的药物提供了新策略。维化的药物提供了新策略。

【技术实现步骤摘要】
一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，特别是涉及一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用。

技术介绍

[0002]肺纤维化是肺损伤、间质性肺疾病等多种肺部疾病终末期的病理过程。肺组织的纤维化导致正常肺组织结构改变、功能丧失，患者由缺氧最终进展为呼吸衰竭、死亡。近年来，由于职业因素、家居环境因素、空气污染雾霾和药物使用等因素，使肺纤维化的发病率逐年上升，一旦确诊为肺纤维化，患者大多生存时间只有3至5年，病死率高，五年生存率仅为23％，其治疗仍属世界性难题。有研究表明口服吡非尼酮和尼达尼布克可缓解肺纤维化进展，为患者带来新希望，但仍不足以降低肺纤维化的高致死率，需要新的治疗方式和思路。
[0003]长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是一类长度大于200nt，不具有编码功能的RNA。LncRNA表达具有时空特异性，能在染色质重塑、转录调控以及转录后加工等多种水平调节基因的表达，参与多种疾病的发生和发展。随着非编码人类转录组越来越多的作用被发掘，研究者们开始从中探索新的治疗策略，寻求新的机遇。但是目前能够有效治疗肺纤维的LncRNA研究报道较少，因此本专利技术提供一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，该长链非编码RNA可缓解肺纤维化以及肺组织中炎症细胞的浸润，减少肺部血清和组织中的炎症细胞因子IL
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6和IL
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1β产生，提高小鼠生存率，为开发治疗肺纤维化的药物提供了新策略。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种长链非编码RNA(lncENAF)在制备治疗肺纤维化药物中的应用，所述长链非编码RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
[0007]进一步地，所述长链非编码RNA通过减少肺组织中炎症细胞的浸润、降低肺泡灌洗液的总蛋白浓度和白细胞数量，以及减少炎症因子的表达量，实现治疗肺纤维化的功效。
[0008]进一步地，所述炎症因子包括IL
‑
6和IL
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1β。
[0009]进一步地，所述减少炎症因子的表达量具体为：减少血清和肺组织中的炎症因子表达量。
[0010]本专利技术还提供一种腺相关病毒重组载体在制备治疗肺纤维化药物中的应用，所述重组载体包括如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。
[0011]进一步地，所述重组载体通过上调表达SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，达到治疗肺纤维化的作用。
[0012]本专利技术还提供一种治疗肺纤维化的药物，所述药物包括上述的长链非编码RNA或上述的重组载体。
[0013]本专利技术公开了以下技术效果：
[0014]本专利技术先利用雾化吸入博来霉素构建肺纤维化小鼠模型，进一步通过雾化吸入lncENAF腺相关病毒液进行治疗，结果显示lncENAF不但可以减轻肺组织中炎症细胞的浸润，而且还可以减少肺部血清和组织中的炎症细胞因子IL
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6和IL
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1β产生，延缓肺纤维化，提高小鼠生存率，说明lncENAF是一种有望用于肺纤维化治疗的lncRNA。本专利技术研究为开发治疗肺纤维化的药物提供了新策略。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0016]图1为HE染色观察各组小鼠肺脏的病理情况；
[0017]图2为观察6组小鼠1周内的生存情况，并作K
‑
M生存曲线图进行分析；
[0018]图3为LncENAF对博来霉素刺激下的肺纤维化小鼠体内炎症反应影响的检测；A：利用BCA法对各组小鼠肺泡灌洗液中的蛋白浓度进行测定；B：利用改良牛鲍计数板法对各组小鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数进行计数；C：利用ELISA实验检测各组小鼠血清中IL
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6的蛋白浓度；D：利用ELISA实验检测各组小鼠血清中IL
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1β的蛋白浓度；E：利用RT
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qPCR检测肺组织中Il
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6的mRNA相对表达量；F：利用RT
‑
qPCR检测肺组织中Il
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1β的mRNA相对表达量；*表示P<0.05，**表示P<0.01，***表示P<0.001；
[0019]图4为CD68免疫组化染色观察各组小鼠肺组织中肺泡巨噬细胞阳性视野的数量。
具体实施方式
[0020]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0021]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0022]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0023]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实
施方式对技术人员而言是显而易见的。本专利技术说明书和实施例仅是示例性的。
[0024]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0025]在前期研究工作中，专利技术人团队通过转录组测序发现了一条在小鼠脂肪肝中高表达的lncRNA
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lncENAF，进一步发现其可以影响小鼠体内外巨噬细胞炎症因子表达水平。所述lncENAF的核苷酸序列如下所示(SEQ ID NO：1)：
[0026]ATTGTACACCATGCAGACAAAGCGCTCAAACACTTGCAATGCTGGGCTTTCTCCCAATATCCTCTGCCATCTTTCCTACCCTTATAAAAGTCCAGAAAGAAAATAATC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种长链非编码RNA在制备治疗肺纤维化药物中的应用，其特征在于，所述长链非编码RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述长链非编码RNA通过减少肺组织中炎症细胞的浸润、降低肺泡灌洗液的总蛋白浓度和白细胞数量，以及减少炎症因子的表达量，实现治疗肺纤维化的功效。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述炎症因子包括IL
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6和IL
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1β。4.根据权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李伟，付廷明，刘林，冯榕，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：