一种清开灵注射液类过敏反应检测模型制造技术

本发明专利技术提供了一种清开灵注射液类过敏反应检测模型。该模型包括七大模块，分别是小鼠耳蓝染面积占比测试与数据存储模块、小鼠耳蓝染面积评分模块、小鼠耳蓝染面积结果判断模块，以及小鼠耳组织中伊文思蓝(EB)渗出量定量测试与数据存储模块、小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量计算模块、小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量结果判断模块、结果输出模块；该模型给出了明确的评估分析方法和结果判断标准，检测反应率高，清开灵注射液在10ml/kg的给药剂量下，反应率可达100％，EB渗出量是阴性对照组的6

【技术实现步骤摘要】
一种清开灵注射液类过敏反应检测模型


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种清开灵注射液类过敏反应检测模型。

技术介绍

[0002]清开灵注射液主要是由栀子、板蓝根、金银花、黄芩苷、胆酸、猪去氧胆酸、珍珠母和水牛角等组方药材经现代生产工艺制备而成。清开灵注射液有类过敏反应(anaphylactoid reaction)的临床报道，因此探索清开灵注射液类过敏反应的检测方法，对于指导临床用药具有重要的意义。
[0003]《清开灵注射液类过敏反应应急检验方法探讨，余小雁，北方药学2015年第12卷》探讨了清开灵注射液类过敏反应应急检验方法，采用ICR小鼠体内类过敏反应检查法联合体外RBL
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2H3细胞β
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氨基己糖苷酶及组胺释放率检查法，作为清开灵注射液类过敏反应应急检验方法。但该方法在体外检测时，需要同时检测上清液和裂解液的吸光度，试验操作及数据处理过程较为繁琐，不利于大批量样品检查。
[0004]本专利技术人团队前期研究了一种药物类过敏反应的临床前评价方法研究《梁爱华，2012，中国中药杂志，药物类过敏反应的临床前评价方法研究(I)——小鼠类过敏反应评价方法的建立和验证》，该方法以小鼠一次性静脉注射含0.4％伊文思蓝(EB)的受试物，以耳廓蓝染发生率和EB渗出量作为类过敏评价指标来评估静脉注射类过敏反应。但是该方法对不同的注射液药品的评价差异明显，根据研究数据显示，该方法对双黄连注射液、生脉注射液的反应强；而对清开灵注射液类过敏反应测试反应率很差(反应率仅有40％，见文献中表3数据)，清开灵注射液在12ml/kg的给药浓度下，反应率(反应率＝出现耳廓蓝染的动物数/组内动物数
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100％)是40％，EB渗出量数据也不理想，EB渗出量较生理盐水组增高仅1倍余。该方案针对清开灵注射液的检测效果无法满足临床需求。
[0005]因此，研究探索效率更高、耗时缩短、反应率高、检测结果更加准确和稳定的清开灵注射液类过敏反应检测方案，对清开灵注射液质量控制、工艺研究，以及临床应用安全性，具有重要价值和意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是针对清开灵注射液类过敏反应检测技术的不足，旨在提供一种清开灵注射液类过敏反应检测模型及检测方法。
[0007]本专利技术通过以下技术方案实现上述专利技术目的：
[0008]一种清开灵注射液类过敏反应检测模型，包括七大模块：
[0009](1)模块一：小鼠耳蓝染面积占比测试与数据存储模块；
[0010]该模块包括：注射模块、耳蓝染面积占比统计模块、数据存储模块；
[0011]所述注射模块包括注射用试剂：清开灵注射液、伊文思蓝、组胺、生理盐水；
[0012]所述耳蓝染面积占比统计模块用于统计注射后小鼠耳蓝染面积占耳廓面积比例的数据，得到各组小鼠耳蓝染面积占比数据；所得各组数据存储入数据存储模块；
[0013](2)模块二：小鼠耳蓝染面积评分模块；
[0014]该模块包括表1所示的评分标准；
[0015]该模块用于接收上述模块一的数据，并按照表1所示的评分标准进行分析，给出评分数据；
[0016]表1耳廓蓝染面积(S)评分标准
[0017][0018](3)模块三：小鼠耳蓝染面积结果判断模块；
[0019]该模块包括根据模块二的评分数据进行结果判断的标准；标准如下：
[0020]清开灵注射液组：如果各动物均未出现蓝染，则结果为阴性；
[0021]清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥1的动物≤30％，且评分均＜2，则结果为阴性；
[0022]清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥1的动物＞30％，但各动物评分≥3的动物≤10％，结果判断为可疑；
[0023]清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥3的动物＞10％，结果为阳性。
[0024]结果为可疑时，需再次试验；如果再次试验的结果仍然为可疑或者阴性，则判断为阴性，不再重新试验；如果再次试验结果为阳性，则再试一次，以三次试验中二次结果一致的结果作为最终判断；
[0025](4)模块四：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量定量测试与数据存储模块；
[0026]该模块包括：萃取模块、过滤模块、吸光度测试模块、数据存储模块；
[0027]萃取模块包括含0.2
‑
1.0％(优选0.5％KOH)的甲酰胺溶液，用于萃取小鼠耳组织中的伊文思蓝，可得萃取液；
[0028]过滤模块用于过滤萃取液，可得滤出液；
[0029]吸光度测试模块用于测试滤出液的吸光度数据，所得数据存储在数据存储模块并输出传给模块五；
[0030](5)模块五：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量计算模块；
[0031]该模块包括伊文思蓝标准曲线；
[0032]该模块接受模块四的吸光度数据，并根据伊文思蓝标准曲线计算出各组小鼠耳组织的伊文思蓝渗出量；
[0033](6)模块六：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量结果判断模块；
[0034]该模块接受模块五的各组小鼠耳组织的伊文思蓝渗出量数据，如果清开灵注射液组伊文思蓝(EB)渗出量相比阴性对照组增高幅度较大，则判断为可疑或阳性，具体判断标准如下：
[0035]增高幅度<50％，阴性；
[0036]增高幅度50
‑
75％，且统计差异P<0.05，可疑；
[0037]增高幅度75％
‑
100％，弱阳性；
[0038]增高幅度>100％，阳性；
[0039](7)模块七：结果输出模块；
[0040]该模块用于按照下述标准综合分析模块三和模块六的结果，给出最终判断结果并输出：
[0041]模块三和模块六的结果均为阴性，则最终结果判断为阴性；
[0042]模块三和/或模块六的结果为可疑，则最终结果判断为可疑；
[0043]模块三和/或模块六的结果为阳性，则最终结果判断为阳性。
[0044]即综合耳廓蓝染面积评分判断和伊文思蓝(EB)渗出量判断的结果，作为最终判断结果。
[0045]优选地，上述模型的模块一中，各组数据的来源要求：
[0046]①
清开灵注射液组小鼠耳蓝染面积占比数据，来源要求及测试方法：清开灵注射液与0.6
‑
1.0％(优选0.8％)伊文思蓝溶液以体积比1:1混合后，给予小鼠静脉注射后30min内，观测到的小鼠耳蓝染面积占比数据；
[0047]②
组胺阳性对照组小鼠耳蓝染面积占比数据，来源要求及测试方法：0.5
‑
2.0mg/ml(优选1.0mg/ml)组胺与0.6
‑
1.0％(优选0.8％)伊文思蓝溶液以体积比1:1混合后，给予小鼠静脉注射后30min内，观测到的小鼠耳蓝染面积占比数据；
[0048]③
生理盐水阴性对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种清开灵注射液类过敏反应检测模型，其特征在于，包括七大模块：(1)模块一：小鼠耳蓝染面积占比测试与数据存储模块；该模块包括：注射模块、耳蓝染面积占比统计模块、数据存储模块；所述注射模块包括注射用试剂：清开灵注射液、伊文思蓝、组胺、生理盐水；所述耳蓝染面积占比统计模块用于统计注射后小鼠耳蓝染面积占耳廓面积比例的数据，得到各组小鼠耳蓝染面积占比数据；所得各组数据存储入数据存储模块；(2)模块二：小鼠耳蓝染面积评分模块；该模块包括表1所示的评分标准；该模块用于接收上述模块一的数据，并按照表1所示的评分标准进行分析，给出评分数据；表1耳廓蓝染面积(S)评分标准(3)模块三：小鼠耳蓝染面积结果判断模块；该模块包括根据模块二的评分数据进行结果判断的标准；标准如下：清开灵注射液组：如果各动物均未出现蓝染，则结果为阴性；清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥1的动物≤30％，且评分均＜2，则结果为阴性；清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥1的动物＞30％，但各动物评分≥3的动物≤10％，结果判断为可疑；清开灵注射液组：如果出现蓝染评分≥3的动物＞10％，结果为阳性；结果为可疑时，需再次试验；如果再次试验的结果仍然为可疑或者阴性，则判断为阴性；如果再次试验结果为阳性，则再试一次，以三次试验中二次结果一致的结果作为最终判断；(4)模块四：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量定量测试与数据存储模块；该模块包括：萃取模块、过滤模块、吸光度测试模块、数据存储模块；萃取模块包括含0.2
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1.0％KOH的甲酰胺溶液，用于萃取小鼠耳组织中的伊文思蓝，可得萃取液；过滤模块用于过滤萃取液，可得滤出液；吸光度测试模块用于测试滤出液的吸光度数据，所得数据存储在数据存储模块并输出传给模块五；
(5)模块五：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量计算模块；该模块包括伊文思蓝标准曲线；该模块接受模块四的吸光度数据，并根据伊文思蓝标准曲线计算出各组小鼠耳组织的伊文思蓝渗出量；(6)模块六：小鼠耳组织中伊文思蓝渗出量结果判断模块；该模块接受模块五的各组小鼠耳组织的伊文思蓝渗出量数据，如果清开灵注射液组伊文思蓝渗出量相比阴性对照组增高幅度较大，则判断为可疑或阳性，具体判断标准如下：增高幅度<50％，则结果为阴性；增高幅度50
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75％，且统计差异P<0.05，则结果为可疑；增高幅度75％
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100％，则结果为弱阳性；增高幅度>100％，则结果...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁爱华，陈红英，潘碧妍，张宇实，邵妙霞，杨晓曼，
申请(专利权)人：广州白云山明兴制药有限公司，
类型：发明
国别省市：