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一种中高温Argonaute蛋白在特异性切割靶核酸中的应用制造技术

技术编号:37326288 阅读:36 留言:0更新日期:2023-04-21 23:05
本发明专利技术公开了一种中高温Argonaute蛋白在特异性切割靶核酸中的应用,所述Argonaute蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该Argonaute蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术提供了上述Argonaute蛋白的体外合成方法,并发现该蛋白对两种向导5

【技术实现步骤摘要】
一种中高温Argonaute蛋白在特异性切割靶核酸中的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学
,具体涉及一种中高温Argonaute蛋白在特异性切割靶核酸中的应用。

技术介绍

[0002]目前,真核生物来源的Argonaute蛋白(简称eAgos)能够在常温条件下催化RNA向导(gRNA)引导的RNA切割反应,并在体内的RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径中发挥至关重要的作用。原核生物来源的Argonaute蛋白(简称pAgos)相比eAgos功能和结构更加多样化,但其生理功能长期以来难以捉摸。大部分原核Argonaute蛋白偏爱利用5

末端磷酸化(5

P)的向导DNA(gDNA)切割靶单链DNA(single

stranded DNA,ssDNA)。随着越来越多关于pAgos性质的探究,发现有些pAgos能够利用5

末端羟基化(5

OH)的gDNA切割靶ssDNA,包括CbAgo(Clostridium but本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中高温Argonaute蛋白在特异性切割靶核酸中的应用,其特征在于,所述Argonaute蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码所述Argonaute蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述Argonaute蛋白在核酸切割体系中特异性切割靶RNA或靶DNA,所述核酸切割体系包括单链向导RNA,Argonaute蛋白以及与所述单链向导RNA序列互补配对的靶RNA或靶DNA。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述互补配对具体为:(a)所述靶DNA或靶RNA具有与所述单链向导RNA序列完全互补的核苷酸序列;或(b)所述靶DNA或靶RNA具有与所述单链向导RNA序列存在单个碱基错配的的核苷酸序列。4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述靶RNA没有高级结构,或有高级结构,或为双链RNA,或为体外转录的RNA,或为病毒基因组RNA,或为mRNA...

【专利技术属性】
技术研发人员:马立新王飞王珑瑜谢晓晨陈晚苹
申请(专利权)人:湖北大学
类型:发明
国别省市:

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