一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明专利技术构建了一株强化番茄红素胞外分泌能力的重组酿酒酵母菌株，所述重组酿酒酵母强化表达了截短3

【技术实现步骤摘要】
一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用


[0001]本专利技术涉及一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用，属于发酵工程


技术介绍

[0002]四萜化合物番茄红素是目前保健品市场上使用最为广泛的类胡萝卜素之一，具有抗氧化、抗衰老、预防癌症等作用，被广泛应用于食品、医药、化妆品和膳食补充剂等领域，具有极高的市场价值。
[0003]随着代谢工程领域的发展，将番茄红素合成途径引入微生物异源宿主已成为番茄红素生产的一种更经济、可持续的策略。作为在工业发酵中广泛使用的一种平台微生物，酿酒酵母(S.cerevisiae)具有繁殖周期短、营养要求简单、易于遗传操作等诸多优点。其胞内存在的甲羟戊酸(MVA)途径可以天然为萜类产物合成提供前体，因此是番茄红素异源生产的优良宿主。
[0004]然而，作为一种非产油酵母，过量合成的番茄红素会在酿酒酵母胞内积累，造成反馈抑制和细胞毒性，限制了酿酒酵母对番茄红素生产能力的进一步提高。通过转运蛋白促进过量生产的番茄红素向胞外分泌是缓解上述瓶颈的一种潜在策略，然而目前还没有关于番茄红素本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母强化表达了截短的3
‑
羟基
‑3‑
甲基戊二酰辅酶A还原酶tHMG1、异戊烯基焦磷酸异构酶IDI1、法尼基焦磷酸合酶ERG20、内质网大小调节因子INO2、NADH激酶POS5和ABC转运蛋白Snq2；并异源表达了Taxusx media来源的香叶基香叶基二磷酸合酶CrtE、Blakeslea trispora来源的八氢番茄红素脱氢酶CrtI、Phaffia rhodozyma来源的双功能番茄红素环化酶/八氢番茄红素合酶CrtYB的突变体CrtYBM1；同时敲除了麦角甾醇生物合成(ERG)基因的转录抑制因子ROX1、葡聚糖1,3
‑
β
‑
葡萄糖苷酶EXG1和半乳糖/乳糖代谢调节蛋白GAL80；并且对乳清酸苷5'
‑
磷酸脱羧酶URA3进行了回补。2.如权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母利用P
GPD
启动子表达tHMG1，利用P
PGK1
启动子表达INO2，利用P
TEF1
启动子表达ERG20和IDI1，利用P
GAL1,10
双向启动子表达CrtI和CrtE，利用P
GAL7
启动子表达POS5并异源表达CrtYBM1，利用P
TDH3
启动子表达Snq2，利用P
URA3
启动子表达URA3。3.如权利要求2所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述P
GPD
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述P
PGK1
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，P
TEF1
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，P
GAL1,10
双向启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述P
GAL7
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述P
TDH3
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述P
URA3
启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。4.如权利要求1～3任一所述的重组酿酒酵母，其特征在于，以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BY4741为出发菌株。5.如权利要求1或2所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述tHMG1的Gene ID为42650，所述IDI1的Gene ID为855986，所述ERG20的Gene ID为853272，所述INO2的Gene ID为8...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘龙，陈坚，吕雪芹，堵国成，李江华，刘延峰，刘家恒，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：