一种积雪草3号提取物的新用途制造技术

本发明专利技术提供了一种积雪草3号提取物的新用途，所述提取物为2α,3β,6β,23

【技术实现步骤摘要】
一种积雪草3号提取物的新用途


[0001]本专利技术涉及中药
，尤其是一种积雪草3号提取物的新用途。

技术介绍

[0002]积雪草为伞形科积雪草属Centella L.植物积雪草Centella asiatica(L.)Urb.的干燥全草，又名“雷公根”、“铜钱草”、“崩大碗”等，广泛分布于长江流域以南各地(四川、云南、贵州)。积雪草始载于《神农本草经》，为《中华人民共和国药典》收载用药。其味苦、辛，性寒，归肝、脾、肾经，具有清热利湿、解毒消肿的功效，现多用于治疗湿热黄疸、痈肿疮毒、跌扑损伤等。
[0003]皮肤光老化属于外源性老化，是引起皮肤衰老的重要原因之一，严重损害人体健康，甚至会引起皮肤癌。外源性衰老通常是由紫外线辐射、吸烟及接触有害化学物质等环境因素引起的皮肤衰老。来自太阳的紫外线(ultraviolet，UV)包括长波紫外线UVA，320～400nm)、中波紫外线(UVB，290～320nm)和短波紫外线(UVC，270～290nm)。其中，UVB对皮肤伤害最大，长期照射会导致皮肤松弛、粗糙和出现红斑。
[0004]皮肤光老化组织学变化主要表现多为表皮不规则增厚，过量的UVB照射会对人体表皮产生较大损害。角质层是表皮的最外层，主要由角质形成细胞组成，占表皮细胞的90％以上，易被UVB损害，而HaCaT细胞是一种被转化但不致癌的角质形成细胞系，也是UVB的靶细胞，在形态学和生物学特性上与正常人角质形成细胞相似，保留了所有的表皮分化能力，现代药理学研究中HaCaT细胞常用于评价抗光老化活性。
[0005]乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的细胞质中，一旦细胞膜受损，LDH即被释放到细胞外，因此可以通过检测细胞培养上清中LDH活性判断细胞的受损程度。这也成为研究中药提取物对UVB损伤影响程度的重要参照。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种积雪草3号提取物的新用途。
[0007]本专利技术采用的技术方案是：
[0008]一种积雪草3号提取物，为三萜类化合物2α,3β,6β,23
‑
四羟基
‑
齐墩果烷
‑
13
‑
烯
‑
28
‑
酸
‑
O
‑
α
‑
L
‑
吡喃鼠李糖基
‑
(1
‑
4)
‑
O
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖基
‑
(1
‑
6)
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷，具有(Ⅰ)所示结构：
[0009][0010]上述积雪草3号提取物的制备方法，具体步骤如下：
[0011](1)积雪草乙醇溶液加热回流提取，收集提取液；
[0012](2)提取液减压浓缩得到粗提物浸膏，以水分散后经大孔树脂柱色谱，得到水层和乙醇层；
[0013](3)将得到的95％乙醇层干法上样，经过开放硅胶柱色谱，用二氯甲烷
‑
甲醇/二氯甲烷
‑
甲醇
‑
水进行梯度洗脱，得到组分Fr.34；
[0014](4)Fr.34经MCI柱色谱，以甲醇
‑
水梯度洗脱得到组分Fr.34.9；
[0015](5)Fr.34.9经高效液相色谱制备得到积雪草3号提取物。
[0016]优选的，上述积雪草3号提取物的制备方法，具体步骤如下：
[0017](1)积雪草干燥全草打粉后用十倍量体积分数70％乙醇溶液加热回流提取3次，每次3h，合并提取液；
[0018](2)提取液减压浓缩得到粗提物浸膏，以水分散后经D101大孔树脂柱色谱，得到水层和95％乙醇层；
[0019](3)将得到的95％乙醇层干法上样，经过开放硅胶柱色谱，用二氯甲烷
‑
甲醇/二氯甲烷
‑
甲醇
‑
水(100∶0
→
20∶1
→
10∶1
→
5∶1
→
10∶3∶1
→
7∶3∶1
→
6∶4∶1
→
0∶100)进行梯度洗脱，共得到40个组分Fr.1～Fr.40；
[0020](4)Fr.34经MCI柱色谱，以甲醇
‑
水(0∶100
→
100∶0)梯度洗脱得到20个组分Fr.34.1～Fr.34.20；
[0021](5)Fr.34.9经高效液相色谱(26％乙腈
‑
水，t
R
＝30.9min)制备得到积雪草3号提取物。
[0022]上述积雪草3号提取物在制备提高HaCaT细胞活性的产品中的应用。
[0023]上述积雪草3号提取物在制备抗皮肤光老化及氧化损伤产品中的应用。
[0024]优选的，上述积雪草3号提取物的应用，所述产品为抗皮肤光老化及氧化损伤药物或化妆品。
[0025]本专利技术的有益效果是：
[0026]上述积雪草3号提取物可显著提高HaCaT细胞活性，并且对由UVB引起的HaCaT细胞氧化损伤具有保护作用，可有效对抗皮肤光老化及氧化损伤，为积雪草及其活性成分在抗
皮肤衰老领域的研究提供重要依据。
附图说明
[0027]图1是YCA
‑
3的主要HMBC、1H
‑1H COSY和NOESY相关，其中，(a)YCA
‑
3的主要HMBC和1H
‑1H COSY相关；(b)YCA
‑
3的主要NOESY相关；
[0028]图2是YCA
‑
3的1H
‑
NMR(600MHz,C5D5N)谱图；
[0029]图3是YCA
‑
3的
13
C
‑
NMR(150MHz,C5D5N)谱图；
[0030]图4是YCA
‑
3的DEPT(150MHz,C5D5N)谱图；
[0031]图5是YCA
‑
3的HSQC谱图；
[0032]图6是YCA
‑
3的HMBC谱图；
[0033]图7是YCA
‑
3的1H
‑1H COSY谱图；
[0034]图8是YCA
‑
3的TOCSY谱图；
[0035]图9是YCA
‑
3的NOESY谱图；
[0036]图10是YCA
‑
3的UPLC
‑
Q
‑
TOF
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种积雪草3号提取物在制备提高HaCaT细胞活性的产品中的应用，所述积雪草3号提取物，其特征在于：为2α,3β,6β,23
‑
四羟基
‑
齐墩果烷
‑
13
‑
烯
‑
28
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酸
‑
O
‑
α
‑
L
‑
吡喃鼠李糖基
‑
(1
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：李楠，张晗，张鹏，吕英爽，景毅，秦文宵，郏霖霖，杨妙婕，党逸云，柴欣，崔英，姜苗苗，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：