一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ及其扩增引物、重组载体和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ及其扩增引物、重组载体和应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术克服了现有技术中缺少玉米抗旱基因的问题，在玉米中发现ZmDnaJ基因，分离克隆该基因，并首次在玉米中过量表达了ZmDnaJ基因，证实了玉米ZmDnaJ基因具有可提高植物耐旱性的功能，为培育耐旱转基因植物提供了新思路。对农作物抗旱育种及生产应用具有重要的指导意义，具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ及其扩增引物、重组载体和应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ及其扩增引物、重组载体和应用。

技术介绍

[0002]玉蜀黍(学名：Zeamays L.)是禾本科、玉蜀黍属植物，俗称玉米。玉米原产于中美洲和南美洲，在全世界热带和温带地区广泛种植。其营养价值较高，是优良的粮食作物；也是食品、医疗卫生、轻工业、化工业等不可或缺的原料之一。
[0003]玉米对耐旱胁迫十分敏感，干旱导致玉米品质和产量降低。因此，研究抗旱相关基因，明确抗旱分子机制，提高玉米抗旱性非常重要。随着分子生物学技术的发展，将抗旱基因转入玉米中，使其在玉米中高效表达，从而提高玉米对逆境环境的适应性，提高玉米产量及品质已经成为目前研究的重点。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ及其扩增引物、重组载体和应用，以解决现有技术中缺少玉米抗旱基因的问题。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]本专利技术还提供了上述植物耐旱性相关基因ZmDnaJ编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0008]本专利技术还提供了上述植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的应用，通过过表达ZmDnaJ来提高植物的耐旱性。
[0009]优选的，所述过表达ZmDnaJ的方法包括以下步骤：
[0010]将克隆的ZmDnaJ构建至基因过表达载体中，得到重组载体；
[0011]将所得重组载体转化至农杆菌中；
[0012]将农杆菌接种至作物，实现基因的过表达。
[0013]优选的，所述作物为玉米。
[0014]本专利技术还提供了一种检测上述植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的扩增引物，所述引物的上游5
’
端到3
’
端的序列如SEQ ID NO.3所示，下游引物5
’
端到3
’
端的序列如SEQ ID NO.4所示。
[0015]本专利技术还提供了上述检测植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的扩增引物在作物性状相关研究中的应用，用于作物的抗旱性状辅助育种。
[0016]本专利技术还提供了一种过表达上述植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的重组载体，所述重组载体包括初始表达载体和基因ZmDnaJ。
[0017]优选的，所述重组载体的序列如SEQ ID NO.5所示。
[0018]本专利技术还提供了上述过表达植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的重组载体在提高植物耐旱性中的应用。
[0019]本专利技术的技术效果和优点：
[0020]本专利技术在玉米中发现ZmDnaJ基因，分离克隆该基因，并首次在玉米中过量表达了ZmDnaJ基因，证实了玉米ZmDnaJ基因具有可提高植物耐旱性的功能，为培育耐旱转基因植物提供了新思路。对农作物抗旱育种及生产应用具有重要的指导意义，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0021]图1为农杆菌侵染及共培养玉米以及组培转基因玉米的照片；
[0022]图2为荧光定量检测各株系过表达玉米基因表达量结果；
[0023]图3为各株系玉米苗期干旱处理后存活率鉴定结果；
[0024]图4为各株系玉米苗期抗旱性鉴定结果；
[0025]图5为过表达植株叶片失水速率测定结果；
[0026]图6为过表达植株叶片ABA含量测定结果；
[0027]图7为过表达植株生物量测定结果。
具体实施方式
[0028]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0029]实施例1基因克隆及载体构建
[0030]取三叶期玉米幼苗叶片，液氮速冻研磨，使用全能型植物RNA提取试剂盒(OminiPlant RNAKit，康为世纪，北京，中国)提取总RNA。使用EasyScript一步法gDNA去除及cDNA合成试剂盒(北京全式金生物技术有限公司，北京，中国)，以总RNA为模板进行cDNA的合成。
[0031]ZmDnaJ基因：序列为AAACAAGCTGAAATATCTGCAGAAAAATAACCGGCCAGC CCTGGAGCTGCTTCTCGGCTCTTCCAACATCCCGTACCTGCCACCGTTCAGTTCAGTCTTCAGTTATCCGCTGCCACTGCCAGGCGACCAACAAGTGACCGTGGATCAGGCATGCCTGCGCTTCTCGTGAACACCGTCTCGGTCTCCCCCGCCGCCTCAAGGCTAGGCTCCTCGCGGCCCGCCACGGCACGGCGAGCAGCAAGCGCCCGCCACGGCCACAGGTGCCGAGCCGAAGCATCCGGCAGCTCGTGGGTGTCGGACTACGACCTGTACGAGCTGCTGGGCGTGGAGCGGTCCTCGCCGCAGTCGGAGATCAAGGCGGCGTACCGGTCGCTGCAGAAGCGGTGCCACCCGGACGTGGCCGGCGCCGCCGGCGGCCACGACATGGCCGTCGTCCTCAACGAGGTGTACGCGCTGCTCTCCGACCCGGACGCGCGCCTGGCCTACGACCAGGAGCAGGCGCGCCGCTCCGAGTTCGCCGGCTACACGGGCCGCCCGCTATACTCCTCCTGGGTCGGCGCCGAGTCCGAGCGCCGGGCGGTGTTCGTCGACGAGGTGCGCTGCGTCGGCTGCCTCAAGTGCGCGCTCCACGCGTCCCGGACCTTCGCCGTCGAGTCCGTCTACGGCCGCGCCCGCGCCGTCGCACAGTGGGCCGACGACGAGGACAGGATCGTCGACGCCATCAACACCTGCCCCGTCGACTGCATCTCGTACGTAAACTCACTCTTCGTCGTCCATGCGCATCCCATGCATCGTCATCGGCGATCGGTCTTCTGATTATTCCCCACGGCCGGCCGTCCAGGATGGTGGAGAGGTCGGACCTGGCGGCTCTCGAGTTCTTGATGTCCAAGCAACCGCGCGGCAGAGTCCGCGTCTCCGAAGGCAACGCGGTGGGAGCTCGCGCGCCCAACATCTTCAACGAA
GTCGCCAAGTTCAAGAAAAGGTTCGATGAGATGAAGCAGAAATCTGCGGCCAGAGAATTCCAGGTGATCGCTCACTGTTTCTGTCTTCTCCGTTGTTCGTCTGAAACTGACACGACCGAACGCTGCCTGCGCAGGAGTCGGAGGCGGCACGGCAGTCG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物耐旱性相关基因ZmDnaJ，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.权利要求1所述的植物耐旱性相关基因ZmDnaJ编码的蛋白质，其特征在于，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.权利要求1所述的植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的应用，其特征在于，通过过表达ZmDnaJ来提高植物的耐旱性。4.根据权利要求3所述的植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的应用，其特征在于，所述过表达ZmDnaJ的方法包括以下步骤：将克隆的ZmDnaJ构建至基因过表达载体中，得到重组载体；将所得重组载体转化至农杆菌中；将农杆菌接种至作物，实现基因的过表达。5.根据权利要求3或4所述的植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的应用，其特征在于，所述作物为玉米。6.一种检测权利要求1所述的植物耐旱性相关基因ZmDnaJ的扩增引物，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：段会军，王楠，闫小翠，董安忆，钟源，杨倩，邢悦，翟秀珍，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：