【技术实现步骤摘要】
活细胞膜整合素
α
v
β3聚糖的原位糖链延长方法
一、
[0001]本专利技术介绍了一种活细胞膜整合素α
v
β3聚糖的原位糖链延长方法。该方法通过构建特异性识别α
v
β3的聚糖重构探针,氧化活细胞表面α
v
β3糖链的末端聚糖生成醛基,进一步与酰肼修饰糖分子反应,实现细胞膜α
v
β3聚糖的糖链延长。
二、
技术介绍
[0002]糖基化是普遍存在于真核生物中的蛋白质翻译后修饰模式。细胞表面的聚糖参与了一系列重要的生物过程。异常的糖基化与多种疾病的发生和发展密切相关,因此对活细胞表面特定蛋白的聚糖结构进行编辑,是一种重要的疾病干预手段,已被用于增强赫赛汀对乳腺癌的治疗效果。
[0003]整合素α
v
β3是细胞膜表面由α亚基(CD51)和β3亚基(CD61)形成的跨膜异源二聚体糖蛋白。α
v
β3介导细胞与细胞外基质间的双向信号传递,是一个高度糖基化的蛋白。α
v
β3的聚糖结构与细 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种活细胞膜整合素α
v
β3聚糖的原位糖链延长方法,其特征在于偶联整合素α
v
β3特异性识别多肽(Pep)和半乳糖氧化酶(GAO),制备聚糖重构探针Pep
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GAO,该探针在被K4[Fe(CN)6]抑制酶活性的条件下,识别活细胞表面α
v
β3,然后加入K3[Fe(CN)6]激活GAO活性,特异性氧化α
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β3糖链上的半乳糖/N
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乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)生成可以发生生物正交反应的醛基,该基团与酰肼功能化的糖分子发生连接反应,实现α
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β3糖链的延长。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于以琥珀酰亚胺酯和马来酰亚胺双修饰的聚乙二醇1000(NHS
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PEG1000
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