一种产香草胺和辣椒碱的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种产香草胺和辣椒碱的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术首次在酿酒酵母中异源表达香草胺合成途径，首次实现了香草胺的生物合成。本发明专利技术经前体物供应优化和SAM循环圈优化，使香草胺的产量达到了16.48g/L，使香草胺的合成效率提升了将近155％，是目前优化SAM辅因子策略得到的最高的优化效率。本发明专利技术基于酿酒酵母合成香草胺，异源构建8

【技术实现步骤摘要】
一种产香草胺和辣椒碱的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用


[0001]本专利技术属于生物工程
，尤其涉及一种产香草胺和辣椒碱的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。

技术介绍

[0002]伯苄胺作为化工领域不可或缺的一种大宗类化学品，在生物化合物生产、个人护理产品以及生产聚合物领域占据着重要地位。香草胺，也被称为3
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甲氧基
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羟基苯甲胺，属于一种经典的伯苄胺类化合物，是合成生物活性化合物以及生产聚环氧化物的前体，最新研究表明香草胺在溶栓药物研究领域中存在巨大的优势。在植物中香草胺与8
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甲基
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烯壬酸在辣椒碱合成酶催化下酯化生成辣椒碱。辣椒碱作为一种辣椒中合成活性生物碱，由于具有显著的抗炎、抗菌等活性，在食品、药品等领域被广泛应用。由于其具有特殊的刺激性特征，也被用于生产催泪弹等军用产品；辣椒碱与吗啡类药物同时使用，可以降低对吗啡类药物的成瘾性。目前，辣椒碱的获取主要是依靠从辣椒中提取，但由于辣椒碱在植物中含量低以及结构类似物多，使后续的分离纯化造成为了极大的挑战本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种产香草胺的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌中插入有两个基因模块，基因模块一含有PAL2、C4H、4CL2和HCT基因，基因模块二含有CCoAoMT1、FerB2和pAMT基因。2.一种产香草胺的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌为将pheA、Aro9和TAL基因构建至权利要求1所述酿酒酵母工程菌中。3.一种产香草胺的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌为将SahH和SAM2基因构建至权利要求1或权利要求2所述酿酒酵母工程菌中。4.一种产香草胺的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌为将mtn、luxS和SAM2基因构建至权利要求1或权利要求2所述酿酒酵母工程菌中。5.一种产辣椒碱的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌为将Kas、Acl、Fat和AT3基因构建至权利要求1
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4任意一项所述酿酒酵母工程菌中。6.权利要求1所述酿酒酵母工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：构建TPI1t
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PAL2
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TDH3p
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ADH1p
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C4H
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PGI1t和ADH1t
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4CL2
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PGK1p
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TEF2p
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HCT
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CYC1t两个双转化单元，将所述两个双转化单元构建到酿酒酵母基因组的YPRCΔ15位点，获得Z1菌株；构建FBA1p
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pAMT
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ATP15t基因表达盒和HOG1t
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CCoAoMT1
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ENO2p
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PYK1p
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FerB2
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LRP1t双转化单元后，再共同构建到Z1菌株的YORWΔ17位点。7.权利要求2所述酿酒酵母工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：构建PFY1p
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pheA
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PRC1t
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ACT1p
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Aro9
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张根林，李媛媛，赵金雨，邱笛，张燕，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：