玛咖酰胺的制备及检测方法与玛咖咖啡的制备方法与产品技术

本发明专利技术提供一种玛咖酰胺的制备及检测方法与玛咖咖啡的制备方法，属于食品药品领域。本发明专利技术提供一种基于玛咖酰胺有效部位的制备及检测方法，以及添加玛咖提取物的玛咖咖啡及其制备方法及应用。本发明专利技术提供采用qNMR法直接对玛咖酰胺类化合物的总含量进行测定，且不需要玛咖酰胺标准品，在对与玛咖酰胺生成有关的各因素进行分析时，更准确可靠。本发明专利技术的方法操作简单快捷，能作为玛咖中玛咖酰胺类化合物指标成分控制的通用方法。指标成分控制的通用方法。指标成分控制的通用方法。

【技术实现步骤摘要】
玛咖酰胺的制备及检测方法与玛咖咖啡的制备方法与产品


[0001]本专利技术属于食品、医药领域，具体涉及一种基于玛咖酰胺有效部位的制备及检测方法，以及添加玛咖提取物的玛咖咖啡产品及其制备方法及应用。
技术背景
[0002]玛咖(Lepidium meyenii Walp)为十字花科(Brassicaceae)独行菜属(Lepidium)一年或两年生草本植物，其原产自海拔3700
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4500米的南美安第斯山脉，主要分布在秘鲁中部地区。玛咖的传统应用主要体现在强身健体、提高生育能力及性功能。当地居民将玛咖进行煮汤或者制备饮料，以期治疗贫血、失眠以及用来调节女性生理健康。1992年，玛咖被联合国粮食及农业组织(AFO)列为安全可食用食品。我国也于2002年玛咖被批准为新资源食品在云南、新疆、台湾等地区广泛种植，云南丽江玛咖的种植规模巨大，玛咖产品品质优异，形成了一个玛咖产业及产品品牌。
[0003]玛咖酰胺和玛咖烯被认为是玛咖中的特征标记化合物，这类化合物目前只在玛咖被发现天然存在。玛咖酰胺被认为是由苄胺和脂肪酸结合而成的。到目前为止，从玛咖中共发现了二十个玛咖酰胺和三个玛咖烯。六个主要的玛咖酰胺在玛咖中比较广泛存在。HPLC分析表明新鲜未受损的玛咖块根中是不含玛咖酰胺的。而N
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苄基十六烷酰胺在秘鲁玛咖中含量最为丰富，N
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苄基
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9Z,12Z
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十八烷酰胺在丽江玛咖中最为丰富，却是是秘鲁玛咖中含量次高的玛咖酰胺。
[0004]玛咖酰胺类化合物作为玛咖中的标志性化合物，具有很多生物活性。研究表明：因其分子中含有脂肪链，玛咖酰胺可以很容易穿过肠壁和血脑屏障；这些玛咖酰胺表现出中度脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)抑制活性。此外，活性最好玛咖酰胺，N
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(m
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甲氧基苄基)
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9Z,12Z
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十八烯酰胺，表现出明显的时间依赖性、非竞争性FAAH抑制活性，表明玛咖酰胺可能有潜在的神经保护、镇痛和抗炎活性。此外，N
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苄基
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9Z,12Z
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十八烷酰胺对大麻素CB1受体具有选择性结合亲和性，且其对神经酰胺细胞吸收具有潜在的抑制作用。
[0005]目前，玛咖酰胺含量测定方法主要为HPLC
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UV和UHPLC/HPLC
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MS，测定结果由于所针对的主成分不同，使用标准品不同，测定结果往往存在很大差异。Esparza等用HPLC法对新鲜玛咖及秘鲁传统风干玛咖块茎中的玛咖酰胺含量测定，主要三个玛咖酰胺为N
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benzyl
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hexadecanamide、N
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benzyl
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(9Z,12Z)
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octadecadienamide、N
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benzyl
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(9Z,12Z,15Z)
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octadecatrienamide，测定结果显示，新鲜未受损的玛咖块茎中是检测不到玛咖酰胺的，而玛咖块茎收获后经安第斯传统方法干燥或工业烤箱烘烤后，其中玛咖酰胺的总含量可高达800μg/g。而云南丽江玛咖中玛咖酰胺测定结果，含量最高的为N
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benzyl
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(9Z,12Z)
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octadecadienamide，在秘鲁玛咖中，含量最高的玛咖酰胺为N
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benzyl
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hexadecanamide，其次才是N
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benzyl
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(9Z,12Z)
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octadecadienamide。
[0006]由于不同玛咖酰胺化合物的UV吸收有差异，在用HPLC
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UV法对玛咖酰胺类化合物进行分析时，一般是用几个玛咖酰胺的含量来代表玛咖酰胺的总含量，很容易造成误差。

技术实现思路

[0007]针对现有技术存在的上述不足之处，本专利技术的目的在于提供一种基于玛咖酰胺有效部位的制备及检测方法，以及添加玛咖提取物的玛咖咖啡及其制备方法及应用。本专利技术提供采用qNMR法直接对玛咖酰胺类化合物的总含量进行测定，且不需要玛咖酰胺标准品，在对与玛咖酰胺生成有关的各因素进行分析时，更准确可靠。本专利技术的qNMR法，操作简单快捷，能用作玛咖中玛咖酰胺类化合物指标成分控制的通用方法。
[0008]为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0009]一种玛咖酰胺的检测方法，该方法包括下述步骤：
[0010]玛咖酰胺有效部位的制备：分别取丽江黄玛咖、丽江紫玛咖、秘鲁黑玛咖、秘鲁黄玛咖块茎，粉碎粉末，以乙酸乙酯为提取溶剂，冷浸提取2次，每次冷浸2天，过滤提取液，浓缩后分别得到棕色浸膏玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE；
[0011]上述的玛咖提取物浸膏MACA
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CE分别过反相硅胶分段，依次用50％甲醇
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水、70％甲醇
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水，90％甲醇
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水梯度洗脱，浓缩洗脱液后分别得到棕色浸膏，90％甲醇
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水洗脱浸膏，得玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE；
[0012]然后进行玛咖酰胺提取物MACA
‑
CE或MACA
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RE的NMR分析样品制备，再进行玛咖酰胺的qNMR分析和qNMR分析中玛咖酰胺特征信号的指认，最后用qNMR测定玛咖酰胺提取物MACA
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CE或MACA
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RE或玛咖酰胺类化合物的总含量。
[0013]一种添加玛咖提取物的玛咖咖啡的制备方法，先根据上述的方法制备玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE、玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE样品，然后根据qNMR总玛咖酰胺的含量测定结果，分别确定丽江黄玛咖、丽江紫玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE中玛咖酰胺的含量为3.5％，7％；玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE中玛咖酰胺的含量分别为15.9％，31.7％；确定玛咖酰胺总含量后，作为速溶玛咖咖啡粉的添加原料加入咖啡产品中。
[0014]一种添加玛咖提取物的玛咖咖啡速溶粉的制备方法，该方法包括下述步骤：在纯咖啡速溶粉中添加玛咖酰胺，在每份1袋纯咖啡速溶粉1.8g
‑
3.0g中添加玛咖乙酸乙酯提取物MACA
‑
CE 40mg
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120mg，或添加玛咖酰胺有效部位提取物MACA
‑
RE 10mg
‑
40mg，混合均匀；干燥分装，制备成两类添加玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE、玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玛咖酰胺的检测方法，其特征在于该方法包括下述步骤：玛咖酰胺有效部位的制备：分别取丽江黄玛咖、丽江紫玛咖、秘鲁黑玛咖、秘鲁黄玛咖块茎，粉碎粉末，以乙酸乙酯为提取溶剂，冷浸提取2次，每次冷浸2天，过滤提取液，浓缩后分别得到棕色浸膏玛咖乙酸乙酯提取物MACA
‑
CE；上述的玛咖提取物浸膏MACA
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CE分别过反相硅胶分段，依次用50%甲醇
‑
水、70%甲醇
‑
水，90%甲醇
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水梯度洗脱，浓缩洗脱液后分别得到棕色浸膏，90%甲醇
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水洗脱浸膏，得玛咖酰胺有效部位提取物MACA
‑
RE；然后进行玛咖酰胺提取物MACA
‑
CE或MACA
‑
RE的NMR分析样品制备，再进行玛咖酰胺的qNMR分析和qNMR分析中玛咖酰胺特征信号的指认，最后用qNMR测定玛咖酰胺提取物MACA
‑
CE或MACA
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RE或玛咖酰胺类化合物的总含量。2.一种添加玛咖提取物的玛咖咖啡的制备方法，其特征在于先根据权利要求1所述的方法制备玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE、玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE样品，然后根据qNMR总玛咖酰胺的含量测定结果，分别确定丽江黄玛咖、丽江紫玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE中玛咖酰胺的含量为3.5%，7%；玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE中玛咖酰胺的含量分别为15.9%，31.7%；确定玛咖酰胺总含量后，以此为依据作为速溶玛咖咖啡粉的添加原料加入咖啡产品中。3.一种添加玛咖提取物的玛咖咖啡速溶粉的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤：在纯咖啡速溶粉中添加玛咖酰胺，在每份1袋纯咖啡速溶粉1.8g
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3.0g中添加玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE 40mg
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120mg，或添加玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE 10mg
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40mg，混合均匀；干燥分装，制备成两类添加玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE、玛咖酰胺有效部位提取物MACA
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RE的纯咖啡粉速溶玛咖咖啡粉产品。4.一种添加玛咖提取物的2合1或3合1咖啡粉的玛咖咖啡速溶粉的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤：在2合1咖啡粉或3合1咖啡粉中添加玛咖酰胺，在每份1袋2合1咖啡粉或3合1咖啡粉10g
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30g中，添加玛咖乙酸乙酯提取物MACA
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CE40mg
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120mg，或添加玛咖酰胺有效部位提取物MACA
‑
RE10mg
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40mg，混合均匀；干燥分装，制备成2类添加玛咖乙酸乙酯提取物MA...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱明华，李忠荣，周琳，黄艳杰，张然然，吴周维，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：