猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用，涉及猪精液冷冻保护技术领域。所述冷冻保护剂包括渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂，所述渗透性冷冻保护剂包括甘油、DMSO和异丙醇；所述非渗透性冷冻保护剂包括PVP、吐温20、Triton

【技术实现步骤摘要】
猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用


[0001]本申请涉及猪精液冷冻保护
，具体涉及一种猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用。

技术介绍

[0002]当前养猪业碰到很大的困难，需要在活体保种之外探索一些技术方法来遗传资源。2019年悉尼大学使用了50多年前冷冻的美利奴公羊的精液给56只母羊进行体外受精，其中34只母羊成功受孕，受孕率达到61％，并且没有发现使用冷冻精子的受孕率随着冷冻时间的延长而下降的现象。该方法的成功为养猪业的精子保种提供了思路。但猪一次射精量很大(约300ml)，在进行精液冷冻的时候，会遇到慢速冷冻损伤和快速冷冻损伤的问题。
[0003]常见的猪冷冻精液稀释液都是基于甘油
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卵黄保护剂进行开发的，开发的思路是在两种损伤之间寻找平衡点，使损伤的总和达到最小，得到最大的冷冻生存率。然而，此种冷冻保护方式精液的损伤仍然相对较大，且冷冻方法复杂。
[0004]因此，业内亟需研发一种猪精液冷冻保护剂及其制备方法和冷冻、解冻方法，克服冷冻精子过程中慢速冷冻损伤和快速冷冻损本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪精液冷冻保护剂，其特征在于：所述冷冻保护剂包括渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂，所述渗透性冷冻保护剂包括甘油、DMSO和异丙醇；所述非渗透性冷冻保护剂包括PVP、吐温20、Triton
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100和SDS，且渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂的体积比为1:1。2.根据权利要求1所述的猪精液冷冻保护剂，其特征在于：所述冷冻保护剂还包括TRIS稀释液，各成份在冷冻保护剂中所占的百分比为：甘油5％
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7％v/v、DMSO 3％
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5％v/v、异丙醇1％
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2％v/v、PVP 3％
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5％g/v、吐温20 0.3
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0.6％v/v、Triton
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100 0.1％v/v、SDS 5％
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8％v/v，余量为TRIS稀释液；所述TRIS稀释液中各成分及含量为：成分质量TRIS2.44g柠檬酸一水合物1.36g葡萄糖0.82g蛋黄20.0mlPolymixin B硫酸盐100,000IU超纯水100.0ml渗透压(mOsm kg21)301.0pH值6.553.一种猪精液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于：将渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂混合均匀后，添加到TRIS稀释液中稀释，即得。4.一种利用权利要求1
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2任一项所述的冷冻保护剂冷冻猪精液的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1：将猪精液稀释预处理后离心，弃去上清液，然后加入TRIS稀释液，使得0.5m...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖红卫，华再东，张立苹，陈矾，周昌繁，任红艳，毕延震，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：