本发明专利技术涉及用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物及其应用。该环状RNA诊断标记物，包括：circPHACTR4、circZMYM4中的一个或两个，circPHACTR4和circZMYM4的cDNA序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。这2个环状RNA诊断标记物在PAS外周血中显著上调，可用于单独或组合作为PAS诊断标记物，实现对胎盘植入谱系高敏感性、特异性且客观的检测。circPHACTR4单独预测的敏感型为74％，circZMYM4单独预测的敏感型为68.4％，当由circPHACTR4和circZMYM4这2个circRNA组合起来对PAS有很好的预测效果，再结合临床指标和B超的诊断结果最终的，敏感性、特异性可达到82％、88.9％，极大地提高的PAS产前诊断的精准度。度。
【技术实现步骤摘要】
用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物及其应用
[0001]本专利技术涉及疾病诊断标记物
，尤其涉及用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物及其应用。
技术介绍
[0002]胎盘植入谱系(PAS)指胎盘滋养层细胞异常侵入子宫壁肌层的一种疾病，其死亡率高达7％。因为胎盘剥离时大量出血可能导致多器官衰竭，弥散性血管内凝血，子宫切除术甚至死亡，使其成为孕产妇发病和死亡的主要原因之一。准确的产前诊断可以使医生提前准备手术方案，从而降低疾病风险并能得到较好的预后效果。目前临床对PAS主要的诊断方法是B超，但B超的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性较低，分别为53.5％、88.0％、82.1％、64.8％和64.8％。而且B超诊断除了依赖设备的精度，还和医生的经验有很大关联，诊断结果有一定的主观性，导致在临床实践中，高达有三分之一到三分之二的PAS病例在分娩前仍未确诊，在一些不发达地区PAS的诊断率更低。为了克服这一临床挑战，迫切需要高敏感性、特异性且结果客观的生物标记物，特别是非侵入性标记物。然而经过数十年的研究，临床上还没有开发出血液或尿液中的可靠标记物以诊断PAS。
[0003]环状RNA(circRNA)作为一类RNA异构体出现，在动物中广泛且组织特异性表达，通常其表达水平独立于相应的线性mRNA。circRNA非常稳定，一些circRNA表达丰度高且在外周血中可以稳定检测到，因此有作为某些疾病诊断的血液生物标记物的潜力。目前，已研究出一些环状RNA在某些疾病诊断中作为标记物进行应用，比如：中国专利CN 109852684 A公开了环状RNA hsa_circ_0003764作为宫腔粘连诊断标记物的应用，中国专利CN111593116A公开了用于诊断复发性流产的环状RNA为hsa_circRNA_100737，中国专利CN108796086A公开了环状RNA circBCBM1在乳腺癌脑转移风险预测及临床诊断中的应用。但是，目前还未见有作为胎盘植入谱系诊断标记物的环状RNA分子的相关报道，而PAS诊断技术的进一步推进无疑是一种迫切需求。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组。
[0006]本专利技术的又一目的在于提供所述环状RNA诊断标记物在制备胎盘植入谱系诊断产品中的应用。
[0007]本专利技术的再一目的在于提供所述用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组的应用。
[0008]本专利技术的再一目的在于提供一种胎盘植入谱系诊断产品。
[0009]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：
[0010]第一方面，本专利技术提供用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物，所述环状
RNA诊断标记物，包括：circPHACTR4、circZMYM4中的一个或两个，circPHACTR4和circZMYM4的RNA序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
[0011]circPHACTR4、circZMYM4这2个环状RNA诊断标记物在PAS外周血中显著上调，可用于单独或组合作为PAS外周血诊断标记物，实现对胎盘植入谱系高敏感性、特异性且客观的检测。
[0012]在一些实施方案中，所述环状RNA诊断标记物包括circPHACTR4。
[0013]在一些实施方案中，所述环状RNA诊断标记物包括circZMYM4。
[0014]优选地，所述环状RNA诊断标记物由circPHACTR4和circZMYM4组成，所述2个circRNA组合起来对PAS有很好的预测效果。
[0015]第二方面，本专利技术提供用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组，所述引物组包含用于检测circPHACTR4和/或circZMYM4的引物对，其中，用于检测circPHACTR4的引物对序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；用于检测circZMYM4的引物对序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。
[0016]第三方面，本专利技术提供上述环状RNA诊断标记物在制备胎盘植入谱系诊断产品中的应用。
[0017]第四方面，本专利技术提供上述用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组在制备胎盘植入谱系诊断产品中的应用。
[0018]进一步地，所述诊断产品为：试剂、试剂盒、芯片等，凡是可以用于检测上述环状RNA诊断标记物的产品种类均应在本专利技术保护范围内。
[0019]第五方面，本专利技术提供一种胎盘植入谱系诊断产品，包含检测环状RNA诊断标记物表达量的试剂，所述环状RNA诊断标记物由circPHACTR4和circZMYM4中的一个或两个组成。
[0020]进一步地，所述试剂包括用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组。
[0021]进一步地，所述引物组包含用于检测circPHACTR4和/或circZMYM4的引物对，其中，用于检测circPHACTR4的引物对序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；用于检测circZMYM4的引物对序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。
[0022]进一步地，当所述环状RNA诊断标记物由circPHACTR4和circZMYM4组成，为检测circPHACTR4和circZMYM4的表达量，以RPLP0为内参基因，根据QPCR结果套入公式，进行ROC曲线分析：
[0023]C
PAS
＝0.7784
×
Exp
circPHACTR4
+2.1975
×
Exp
circZMYM4
+1.1064
×
ultrasound
‑
4.2773，
[0024]上述公式中，C
pas
表示被检测者患PAS疾病的概率，Exp
circPHACTR4
为QPCR检测的circPHACTR4的相对表达水平，Exp
circZMYM4
表示为QPCR检测的circZMYM4的相对表达水平，ultrasound表示B超诊断结果，如果B超诊断结果为PAS阴性，则ultrasound值为0，如果B超诊断结果为PAS阳性，则ultrasound值为1。
[0025]本专利技术还提供所述环状RNA诊断标记物用于诊断胎盘植入谱系的方法，是在孕妇生产前提母亲外周血RNA进行QPCR或者芯片检测或者高通量测序等手段检测上述2个环状RNA诊断标记物的表达量，如果发现胎盘来源的circRNA表达升高则此病人胎盘植入的概率较高。
[0026]优选地，是通过所述引物组检测circPHACTR4和circZMYM4的表达量，以RPLP为内参基因，根据QPCR结果套入以下公式进本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于胎盘植入谱系诊断的环状RNA诊断标记物，其特征在于：所述环状RNA诊断标记物，包括：circPHACTR4、circZMYM4中的一个或两个，circPHACTR4和circZMYM4的RNA序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。2.用于检测权利要求1所述的环状RNA诊断标记物的引物组，其特征在于：所述引物组包含用于检测circPHACTR4和/或circZMYM4的引物对，其中，用于检测circPHACTR4的引物对序列分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；用于检测circZMYM4的引物对序列分别如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。3.权利要求1所述的环状RNA诊断标记物在制备胎盘植入谱系诊断产品中的应用。4.权利要求2所述的引物组在制备胎盘植入谱系诊断产品中的应用。5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于：所述诊断产品为试剂、试剂盒或者芯片。6.一种胎盘植入谱系诊断产品，其特征在于：包含检测环状RNA诊断标记物表达量的试剂，所述环状RNA诊断标记物由circPHACTR4和circZMYM4中的一个或两个组成。7.根据权利要求6所述的一种胎盘植入谱系诊断产品，其特征在于：所述试剂包括用于检测所述环状RNA诊断标记物的引物组。8.根据权利要求7所述的一种胎盘植入谱系诊断产品，其特征在于：所述引物组包含用于检测circPHACTR4和/或circZMYM4的引物对，其中，用...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏来新，陈敦金，肖姗，石俊芳，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：
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