CRISPR/SaCas9系统在大豆基因编辑中的应用技术方案

本发明专利技术公开了CRISPR/SaCas9系统在大豆基因编辑中的应用。实验证明，根据大豆基因组中基因GmFT2a或GmFT5a设计SgRNA，之后将SgRNA的编码基因和编码SaCas9蛋白的基因导入大豆，敲除大豆基因GmFT2a和GmFT5a；SaCas9蛋白识别靶点的PAM序列为5

【技术实现步骤摘要】
CRISPR/SaCas9系统在大豆基因编辑中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及CRISPR/SaCas9系统在大豆基因编辑中的应用。

技术介绍

[0002]基因组编辑技术CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR
‑
associated 9)的出现是生命科学领域一次巨大且彻底的技术革新。多样化的特性和不断衍生的新功能为其在植物中实现基因定点敲除、长片段删除、单碱基编辑、定点敲入、目的片段替换、转录激活和抑制等用途提供了新的手段，该技术也为深度研究植物基因功能、创制特异突变体材料提供了强有力的工具。
[0003]CRISPR/Cas9系统靶向识别和切割与前间隔序列邻近基序(protospacer adjacent motif，PAM)相邻的特定DNA位点。大豆(Glycine max)富含蛋白质和油脂，是重要的粮油兼用作物。目前，在大豆基因组编辑中，使用最为频繁的Cas9酶是来自酿脓链球菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种定向编辑大豆靶基因的方法，包括如下步骤：(1)根据大豆基因组中预期进行定向编辑的靶基因设计SgRNA；(2)将SgRNA的编码基因和编码SaCas9蛋白的基因导入大豆，实现大豆中靶基因的定向编辑；SaCas9蛋白识别靶点的PAM序列为5
’‑
NNGRRT
‑3’
，N为A、T、G或C，R为A或G。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述靶基因为GmFT2a基因。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：靶基因为GmFT2a基因时，SgRNA识别的靶点为A1)、A2)或A3)：A1)SEQ ID NO：1自5
’
末端起第191
‑
217位所示的DNA分子；A2)SEQ ID NO：1自5
’
末端起第81
‑
107位所示的DNA分子；A3)SEQ ID NO：1自5
’
末端起第100
‑
126位所示的DNA分子。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述靶基因为GmFT5a基因。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：靶基因为GmFT5a基因时，SgRNA识别的靶点为B1)或B2)：B1)SEQ ID NO：4自5
’
末端起第177
‑
203位所示的DNA分子；B2)SEQ ID NO：4自5
’
末端起第67
‑
93位所示的DNA分子。6.一种定向编辑大豆基因组的方法，为利用CRISPR/SaCas9系统对待编辑大豆进行基因组...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡宇鹏，侯文胜，陈莉，韩天富，张岩，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：