一种miRNA或piRNA的检测系统和包括其的试剂盒及应用技术方案

本发明专利技术公开了一种miRNA或piRNA的检测系统和包括其的试剂盒及应用，涉及生物技术领域。miRNA或piRNA的检测系统包括：核酸探针A，核酸探针B，发夹探针A，连接发夹，连接发夹包括针对miRNA的发夹探针B或针对piRNA的发夹探针C。该系统无需化学修饰，可以直接应用于含高活性核酸酶的生物样品中的核酸检测，包括用于血液样本外泌体内痕量核酸的定量测定。通过联合该检测系统和正丁醇脱水反应程序，在30分钟反应时间里实现对miRNA和piRNA 10

【技术实现步骤摘要】
一种miRNA或piRNA的检测系统和包括其的试剂盒及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种miRNA或piRNA的检测系统和包括其的试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]DNAzyme是具有催化活性的人工合成的单链DNA分子，可催化广泛的化学反应，包括RNA或DNA的裂解和连接、蛋白质修饰以及脱糖裂解等，目前有很多研究致力于DNAzyme在生物传感器的开发、纳米技术、诊断治疗方面的应用。
[0003]分裂DNAzyme，是将DNA酶单链在合适的位置分割成两条寡核苷酸链，并在两条分裂酶链上各加上一段寡核苷酸序列作为帮助序列，能够在连接分子存在的情况下组装成完整的活性DNAzyme核心，产生催化活性。分裂位点的选择对于分裂DNAzyme的检测灵敏度影响很大。而由于分裂DNAzyme独特的结构，其多被设计为多功能生物传感器，但它们的检测灵敏度较低，对核酸的检出限在μM～nM级别，反应时间长，通常需要数小时，且易被核酸酶降解。分裂DNAzyme的传感器大多都是以依赖二价金属离子Mn
2+/>、Zn
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
ID NO.11所示；优选地，所述靶标piRNA为piR
‑
20365，所述发夹探针C的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。5.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述miRNA的检测系统，或权利要求3或4所述piRNA的检测系统。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括正丁醇、反应试剂、二价金属螯合剂中的至少一种；所述反应试剂包括Na
+
。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的使用方法包括以下步骤：将所述检测系统与待检测样品、反应试剂混合，即得反应体系；将所述反应体系与9～12倍体积的正丁醇混合，反应后，根据荧光强度对miRNA或piRNA进行定性和/或定量检测。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述反应的温度为16℃～26℃；优选地，所述反应的时间为20min～60min；优选地，反应体系中，Na
+

【专利技术属性】
技术研发人员：段文军，高庆新，张丽敏，谢宝平，陈俊，吴千千，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：