一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法技术

本发明专利技术公开一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，包括大鼠着床胚胎的分离、培养体系及细胞系的鉴定。以SD大鼠着床后8.5天的胚胎为研究对象，分离大鼠受精后8.5天的胚胎进行着床后原始内胚层干细胞的分离，可用于早期胚胎发育体外研究的模型和再生医学(干细胞治疗)的探索，弥补了现有大鼠原始内胚层干细胞分离来源的不足。胞分离来源的不足。胞分离来源的不足。

【技术实现步骤摘要】
一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法


[0001]本专利技术属于啮齿类动物原始内胚层干细胞分离建系的方法领域，涉及一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，尤其涉及一种着床后大鼠胚胎原始内胚层干细胞分离建系方法。

技术介绍

[0002]原始内胚层干细胞(Extraembryonicendodermstemcell，XEN)来源于哺乳动物囊胚中内细胞团(innercellmass，ICM)产生的原始内胚层(primaryendoderm，PrE)，具有干细胞的自我更新和多向分化能力，其发育过程是随着胚胎发育而逐渐改变的。哺乳动物发育早期，受精卵经多次卵裂形成囊胚，起初囊胚内的ICM同时表达PrE细胞和EPI(epiblast)细胞的特征性标记物。在E4.5时，PrE特异性标记物Gata6
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细胞和EPI标记物Nanog
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细胞两谱系发生了空间上的分离(Nakai
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FutatsugiYetal.,2015)。PrE细胞迁移至囊胚腔侧并进一步分化成脏壁内胚层(visceralendoderm，V本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，其特征在于，包括：步骤一：获取着床后胚胎,取受精后8.5天雌性大鼠解剖并剪取子宫着床点获取着床后胚胎；步骤二：从着床胚胎中分离出原始内胚层谱系对应的胚外组织，培养于原始内胚层干细胞培养体系中并置于二氧化碳细胞培养箱中，经过换液传代后获得大鼠原始内胚层干细胞细胞系。2.根据权利要求1所述的一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，其特征在于，还包括：步骤三：大鼠原始内胚层干细胞细胞系鉴定。3.根据权利要求1所述的一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，其特征在于，所述步骤二中原始内胚层干细胞是从大鼠着床后胚胎中分离建系。4.根据权利要求1所述的一种大鼠原始内胚层干细胞分离建系的方法，其特征在于，所述步骤二中原始内胚层干细胞培养体系为胎牛血清(FBS)，白血病抑制因子(LIF)和...

【专利技术属性】
技术研发人员：董旭东，万慧敏，席佳玮，胡梅，腾玥，林江维，徐建林，
申请(专利权)人：云南省第一人民医院，
类型：发明
国别省市：