牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组及检测方法技术

本发明专利技术属于病毒检测技术领域，为一种牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组及检测方法。基于该牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组构建的PCR反应体系，在用于牛呼吸道合胞体病毒分子生物学检测时，具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、重复性好的优势，最低可检测10 copies/μL，可用于BRSD流行病学检测，且可对BRSV的感染程度进行精确定量，为开展BRSV分子流行病学和致病机理奠定基础。基于该牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组所建立的PCR反应体系针对BRSV进行检测，有利于提高BRSV的检测灵敏度及效率。灵敏度及效率。灵敏度及效率。

【技术实现步骤摘要】
牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组及检测方法


[0001]本专利技术属于病毒检测
，具体涉及一种牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组及检测方法。

技术介绍

[0002]牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus，BRSV)是一种单股负链RNA病毒，属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)，是牛呼吸道合胞体病(Bovine respiratory syncytial disease，BRSD)的病原体，也是牛呼吸道疾病综合征(Bovine respiratory disease complex，BRDC)主要的病毒性病原之一。BRSV主要通过呼吸道气溶胶和体表接触进行传播，具有较强的传染性。
[0003]BRSV可感染多种反刍动物，其中以牛最易感。动物感染后可能不表现出任何临床症状，作为传染源长期排毒；急性期的奶牛以严重间质性肺炎为主要特征，还伴有临床症状，如体温升高、呼吸困难且急促、产奶量显著下降或废绝，妊娠母牛严重时可致流产。每年因呼吸道疾病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组，其特征在于，包括：上游引物BRSV
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M
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F，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物BRSV
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M
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R，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；探针BRSV
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M
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P，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。2.根据权利要求1所述的牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组，其特征在于：所述探针的5
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端带有荧光报告基团，3
’
端带有荧光淬灭基团。3.根据权利要求2所述的牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测的引物探针组，其特征在于：所述荧光报告基团为FAM，所述荧光淬灭基团为BHQ1。4.权利要求1所述的引物探针组的用于非疾病的诊断和治疗方法的实时荧光定量PCR检测牛呼吸道合胞体病毒的检测方法，包括以下步骤：（1）提取待测样品病毒RNA；（2）使用上游引物BRSV
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M
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F、下游引物BRSV
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M
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R、探针BRSV
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M
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P及qRT
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PCR扩增试剂盒对RNA中目的条带进行PCR扩增反应；（3）对PCR扩增反应产物进行分析。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：在所述步骤（2）中，进行PCR扩增反应的反应体系成分如下：2
ꢀ×ꢀ
One Step U
+ Mix为10 μL，One Step U
+ Enzyme Mix为1 μL，10 μmol/L的上游引物BRSV
‑
M
‑
F为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：梁晓珊，宁鹏，李昊，王雪妍，许立华，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：