一种基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供一种基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法及试剂盒，所述方法包括以下步骤：(1)ERA特异性引物和探针设计：上游引物序列如SEQ ID NO:1所示，下游引物序列如SEQ ID NO:2所示，所述探针依序包括SEQ IDNO:3，THF，SEQ ID NO:4和C3间臂；(2)提取待测样品DNA；(3)将设计的特异性引物和探针添加至ERA检测体系中进行ERA检测。本发明专利技术的白斑综合症病毒的ERA引物和探针可以有效扩增靶基因，灵敏度达到100copies/μLcopies/μL。检测特异性高，与传染性皮下及造血组织坏死病毒、副溶血弧菌、肝肠胞虫以及健康对虾DNA均无交叉反应。应。应。

【技术实现步骤摘要】
一种基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]凡纳滨对虾是我国水产养殖的重要经济品种之一。随着对虾产业的发展，养殖行业也面临多种致病原的出现。其中，白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是全球甲壳类动物水产养殖中最普遍的病毒。WSSV感染通常在3
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10d内造成高达100％的死亡率。针对WSSV的感染，目前并无十分有效的治疗方案，因此有必要建立一种白斑综合症病毒快速检测的方法，在早期做出感染状态的诊断，能够有效避免产生巨大的经济损失。目前，已经开发出多种方法来检测WSSV，基于其靶向蛋白质或DNA可以分成两类，一类是免疫学检测，另一类是分子生物学检测。免疫学检测主要包括：酶联免疫技术(ELISA)、免疫胶体金技术以及免疫荧光抗体技术，免疫学检测技术由于检测灵敏度较低，制备抗体的步骤繁琐，成本较高且耗时长等不利条件，限制了其在现场检测中的应用。目前，分子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)ERA特异性引物和探针设计：上游引物:5
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ACAACACTGTGACCAAGACCATCGAAACCC
‑3’
下游引物:5
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TCCGCATCTTCTTCCTTCATCTGTGCATCA
‑3’
探针:依序包括TTGGATCAGGCTACTTCAAGATGACTGATGTGT，THF，CTTGACAGCGACACCTT和C3间臂；(2)提取待测样品DNA；(3)以待测样品的DNA为模板，采用步骤一设计的引物和探针进行ERA反应，得到ERA扩增产物并检测荧光信号强度。2.根据权利要求1所述的基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法，其特征在于，步骤(3)中，ERA检测程序为：32℃
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45℃反应30min。3.根据权利要求1所述的基于ERA技术的白斑综合症病毒快速检测方法，其特征在于，步骤(3)中，E...

【专利技术属性】
技术研发人员：王孟强，张璐，胡景杰，包振民，王燕，刘可欣，邵烁如，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：