一种具有高加帽效率的牛痘加帽酶突变体制造技术

技术编号:37200730 阅读:32 留言:0更新日期:2023-04-20 22:56
本发明专利技术提供一种具有高加帽效率的牛痘加帽酶突变体。通过蛋白结构建模分析,突变体表达筛选,将D1亚基中529

【技术实现步骤摘要】
一种具有高加帽效率的牛痘加帽酶突变体


[0001]本专利技术涉及酶工程领域,尤其涉及一种具有高加帽效率的牛痘加帽酶突变体。

技术介绍

[0002]牛痘病毒加帽酶 (Vaccinia Capping Enzyme) 能够给体外转录合成的mRNA催化加上帽子结构(Cap0),显著改善mRNA的稳定性和翻译效率, 成为mRNA疫苗生产中的一种关键原料酶。
[0003]牛痘病毒加帽酶由D1和D12两个亚基组成,D1亚基含有RNA三磷酸酶(TPase)、鸟苷酰基转移酶(GTase)和甲基转移酶(G

N7 MTase)三个结构域。MTase需要与D12结合才能有效发挥作用。酶催化加帽过程,首先由RNA三磷酸酶(TPase)水解mRNA的5'γ

磷酸,产生5'β

磷酸。鸟苷转移酶(GTase)以GTP为底物,形成共价酶

GMP中间体,将mRNA 5'端的β

磷酸与GMP结合形成5'

5'连接的Gppp

RNA 无本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛痘加帽酶突变体,包括D1亚基和D12亚基,其特征在于:D1亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所述,D12亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所述。2.根据权利要求1所述的牛痘加帽酶突变体,其特征在于,D1亚基的基因序列如SEQ ID NO:4所述,D12亚基的基因序列如SEQ ID NO:6所述。3.一种重组表达载体,其特征在于:包括权利要求2所述的D1亚基和D12亚基的基因序列。4.根据权利要求3所述的重组表达载...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐万熙钟翼高磊冉晓园
申请(专利权)人:恺佧生物科技上海有限公司
类型:发明
国别省市:

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